周楠
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 裂殖酵母SAGA复合物亚基Spt20参与钙调蛋白磷酸酶调节的Cl^-胞内平衡
- 2013年
- SAGA(Spt-Ada-Gcn5acetyltransferase)复合物是真核生物中高度保守的蛋白复合体,参与转录激活、mRNA转运等诸多生物学过程。为了探究SAGA复合物亚基的潜在生物学功能,文章以裂殖酵母(Schizosac-charomyces pombe)SAGA复合物核心结构亚基Spt20为诱饵蛋白进行酵母双杂交筛选,获得了Ppb1蛋白。Ppb1是真核生物重要信号分子-钙调蛋白磷酸酶的催化亚基。酵母双杂交验证及免疫共沉淀实验均表明Spt20与Ppb1可以在体内发生蛋白相互作用。裂殖酵母ppb1+缺失突变体对高浓度Cl敏感,而spt20+缺失突变体则能抵抗高浓度的外源Cl,维持细胞的正常生长。荧光共定位分析表明,当外源Cl浓度升高时,Ppb1蛋白能够从细胞质迁移入核,与Spt20蛋白在细胞核内发生共定位。遗传分析显示,spt20+缺失可以抑制ppb1+缺失突变体对Cl高度敏感的表型,spt20+与ppb1+处于Cl平衡调节的同一通路,且spt20+位于ppb1+的下游。上述结果表明,spt20+缺失突变体耐受外源高浓度Cl,Spt20参与了钙调蛋白磷酸酶调节的Cl胞内平衡。在高等生物中胞内Cl浓度异常升高与心肌缺血/再灌注损伤等疾病的发生密切相关。鉴于Spt20在真核生物中高度保守,Spt20可能成为潜在的药物靶点应用于Cl失衡相关疾病的防治中。
- 周楠雷秉坤周幸余垚吕红
- 关键词：裂殖酵母
- 裂殖酵母SAGA各亚基亚细胞荧光定位分析被引量：1
- 2014年
- SAGA(Spt-Ada-Gcn5 Acetyltransferase complex)是一个多亚基保守的转录复合物,在裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)里由19个亚基组成,调控体内10%基因的转录。文章通过构建原位整合荧光菌株,完整地分析了SAGA所有亚基的亚细胞荧光定位。荧光数据显示这些亚基的定位可分为4种类型,提示SAGA亚基除共同参与转录调控之外,可能还有其他功能。SAGA亚基Sgf73是联系去泛素化模块与SAGA其他模块的桥梁,它的缺失不仅明显减少了去泛素化亚基Ubp8、Sgf11、Sus1核内的定位,同时也影响了乙酰化亚基Gcn5、Sgf29、Ngg1以及核心结构亚基Spt7在细胞核内的定位,这提示Sgf73对维持SAGA的酶学功能和稳定性至关重要。另外,sgf73+的缺失还造成了胞质分裂的缺陷,导致细胞出现多核多膈膜表型。在△sgf73里过量表达膈膜降解途径中的关键基因ace2+和mid2+的回补结果表明,ace2+不能回补sgf73+缺失造成的缺陷,而mid2+也仅能部分回补,提示Sgf73可能还通过其他途径影响了胞质分裂。
- 周幸周楠余壵吕红
- 关键词：SAGA胞质分裂
- 模式酵母基因组稳定性维持的分子机制
- 基因组无时无刻不受到来自外界(如紫外线、辐射、化学试剂等)和来自生命内部(如DNA复制错配、减数分裂重组错配等)带来的DNA损伤的威胁,而这些损伤正是癌症发生、衰老、免疫缺陷以及一些退行性疾病的根源。细胞为了维持基因组的...
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- 文献传递
