李茜
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：北京理工大学生命学院更多>>
- 发文基金：霍英东教育基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- K.pneumoniae XJPD-Li甘油脱水酶基因的定点突变及其性能研究
- 2009年
- 针对菌株K.pneumoniae XJPD-Li高效转化生产1,3-丙二醇的特性,将其甘油脱水酶与已知报道的甘油脱水酶(U60992)的序列比对分析,根据差异位点设计了Nβ47I的定点突变,利用反向PCR定点突变技术构建了甘油脱水酶(dhaBCE)的突变体质粒M1821,并在E.coli BL21(DE3)中高效表达。SDS-PAGE结果显示,诱导表达后在相对分子质量66、24、16KD出现三条特征条带,与预期结果一致。突变体M1821甘油脱水酶的比酶活为38.7U/mg,催化反应最适pH为8.0,最适温度为40℃,与未突变重组甘油脱水酶比较,最适温度降低了约5℃。
- 吕波徐小琳张根林李茜李春
- 关键词：甘油脱水酶定点突变
- 模拟微重力下影响重组Escherichia coli外源蛋白质表达途径分析
- 2015年
- 空间微重力对航天医学、材料学等领域发展起到极其重要的推动作用,然而在生物化工领域的研究尚处于起步阶段。微生物在微重力环境中培养时,其生长代谢和基因转录表达都与地球重力场中截然不同。前期研究表明表达重组β-葡萄糖醛酸苷酶的大肠杆菌在模拟微重力(simulated microgravity,SMG)环境中菌体生长和外源蛋白质表达量均比正常重力对照(normal gravity,NG)环境要高。为深入分析SMG环境效应对菌株在外源蛋白质表达过程中的影响,对该重组大肠杆菌菌株在SMG和NG培养过程中加入IPTG诱导外源蛋白质表达4 h后的全细胞蛋白质酶解产物,通过三重稳定同位素二甲基标记方法并结合质谱分离鉴定技术,在肽段水平上标记后进行差异定量蛋白质组学分析。结果表明:与NG对照相比,SMG条件下共有124个蛋白质表达水平发生显著变化,其中92个蛋白质上调,6个蛋白质下调。上调蛋白质集中在细胞压力胁迫、氨基酸代谢、翻译转录和碳代谢等途径,这些相关途径的蛋白质表达水平变化可以影响大肠杆菌生理代谢及外源蛋白质表达效率。
- 皇甫洁李茜李珺李春
- 关键词：生物工程模拟微重力蛋白质组学
