李菁菁
- 作品数：10 被引量：22H指数：2
- 供职机构：河北医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- FAK和ILK介导骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移被引量：9
- 2006年
- 黏着斑激酶(FAK)和整合素偶联激酶(ILK)是整合素信号途径中的重要信号转导分子,为阐明两者在血管平滑肌细胞(VSMC)黏附和迁移中的作用,以骨桥蛋白(OPN)作为VSMC黏附和迁移的诱导剂,检测其对FAK和ILK磷酸化以及对两者之间结合的影响.在此基础上,用FAK磷酸化特异性抑制剂黏着斑相关非激酶(FRNK)或ILK反义RNA分别阻断FAK磷酸化或ILK表达,进一步探讨两者在VSMC黏附和迁移中所起的作用.结果显示,OPN诱导可促进FAK磷酸化,诱导10min后FAK磷酸化水平升高到对照组的2·4倍;与此同时,ILK的磷酸化受到抑制,30min降至对照细胞的44·6%.OPN诱导FAK磷酸化的同时使FAK与ILK的结合减少.外源性FRNK在VSMC中的过表达显著降低FAK的磷酸化水平,促进ILK磷酸化和FAK与ILK之间的结合,抑制VSMC的黏附和迁移.用ILK反义RNA抑制ILK表达使VSMC在OPN上的黏附增加1·8倍,迁移细胞数降低45·5%.结果提示,FAK和ILK介导OPN诱导的VSMC黏附和迁移过程,两者通过对同一刺激信号产生不同的磷酸化变化而对VSMC的黏附和迁移产生不同的影响.
- 李菁菁温进坤韩梅
- 关键词：FAKILK迁移血管平滑肌细胞
- 改善间充质干细胞移植治疗心肌梗死疗效方法的研究进展
- 2021年
- 间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)来源广泛,具有易获得、易增殖、免疫原性低等独特优势,是治疗缺血性心脏病,如心肌梗死的可靠细胞来源。然而移植干细胞在梗死区缺血缺氧微环境下会出现存活率低、活性差以及细胞衰老等问题,使其临床应用受到限制。本文将近年来改善间充质干细胞移植治疗心肌梗死疗效的研究方法作一综述,总结了药物预处理、药物联合应用、基因修饰、封装干细胞以及改善衰老干细胞活力五个方面的有效方法和手段,为MSC移植治疗缺血性心脏病的基础和临床研究提供参考。
- 王旭付天乐麻正翔李宣儒高品潘琳琰李菁菁周娜静
- 关键词：间充质干细胞心肌梗死干细胞移植基因修饰外泌体
- 整合素β3亚单位胞内区在骨桥蛋白诱导血管平滑肌细胞黏附和迁移中的作用被引量：1
- 2006年
- 为阐明整合素β3亚单位胞内区及其不同保守序列在骨桥蛋白(OPN)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)黏附和迁移中所起的作用,构建了整合素β3亚单位胞内区肽段真核表达载体(pEGFP-C3-β3CD),并人工合成了含有β3亚单位胞内区不同保守序列(NXXY)的寡肽(肽-747和肽-759),通过导入VSMC,观察它们对OPN诱导VSMC黏附和迁移的影响.结果显示,整合素β3胞内区在VSMC中强制性表达可使细胞在OPN上的黏附和迁移明显下降(分别为对照组的34.3%和31.7%);导入肽-747、肽-759和肽-747+肽-759均可显著抑制VSMC的黏附和迁移,其中肽-747+肽-759的作用更强(分别为对照组的36.4%和31.1%).免疫荧光结果显示,在转染pEGFP-C3-β3CD或肽-747+肽-759的VSMC中,黏着斑蛋白的磷酸化水平降低,黏着斑形成明显减少.研究结果表明,整合素β3亚单位胞内区及其NXXY保守序列在黏着斑相关蛋白募集、黏着斑形成及VSMC黏附和迁移方面发挥重要作用.
- 李菁菁温进坤韩梅陈英珠
- 关键词：寡肽迁移黏着斑
- 钙离子对小鼠肝脏铁调素表达的影响及其调节机制
- 2017年
- 目的探讨钙离子对小鼠肝脏铁调素(hepcidin)mRNA表达的影响及其机制。方法实验小鼠随机分3组,对照组腹腔注射0.9%生理盐水,实验组腹腔注射CaCl_2溶液(140 mg/kg),注射0、6、24 h后分别取材。试剂盒检测血清铁和转铁蛋白饱和度,RT-PCR检测肝脏hepcidin mRNA表达,Western印迹检测脾脏Fpn1蛋白和肝脏中几个关键信号分子的表达。结果相对于对照组,小鼠腹腔注射CaCl_2溶液6、24 h后血清铁明显下降(P<0.05),肝脏中hepcidin mRNA表达在6 h下降显著(P<0.05),Fpn1蛋白表达上升,p-SMAD蛋白在6 h略有下降,而p-STAT蛋白在6 h后下降明显。结论 SMAD、STAT信号分子参与了钙离子对小鼠肝脏hepcidin mRNA的表达。
- 雷宇华吕雨虹刘丽李菁菁常彦忠
- 关键词：钙离子铁代谢
- Src介导骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移过程被引量：2
- 2006年
- 为阐明酪氨酸激酶Src在整合素被骨桥蛋白(OPN)激活所触发的细胞黏附和迁移信号途径中所起的作用,应用Src特异性抑制剂PP2阻断Src,观察OPN诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)黏附和迁移活性的改变,并利用免疫沉淀检查PP2对整合素下游信号分子黏着斑激酶(FAK)和整合素偶联激酶(ILK)磷酸化及其相互作用的影响。结果显示,PP2可明显抑制OPN诱导的VSMC黏附和伤口愈合(黏附和迁移活性分别为对照组的76.6%和33.8%);OPN可显著诱导FAK磷酸化(磷酸化水平达对照组的1.9倍),促进ILK去磷酸化,并使FAK与ILK的结合减少(降至对照组的46.4%)。10μmol/LPP2可明显抑制OPN诱导的FAK磷酸化、拮抗OPN诱导对ILK的去磷酸化作用、促进FAK与ILK之间的结合。研究结果表明,Src作为OPN-整合素-FAK信号途径中的信号分子,通过影响FAK和ILK的磷酸化以及两者之间的相互作用来调节VSMC的黏附和迁移活性。
- 李菁菁温进坤韩梅
- 关键词：血管平滑肌细胞SRC黏着斑激酶
- 骨桥蛋白趋化和趋触作用对FAK和ILK磷酸化修饰的影响
- 2007年
- 为探讨可溶性(趋化作用)或锚定(趋触作用)形式的骨桥蛋白(OPN)与整合素相互作用对下游信号分子黏着斑激酶(FAK)和整合素偶联激酶(ILK)磷酸化修饰的影响,分别用包被于培养瓶上锚定型或加在培养液中的可溶性OPN刺激血管平滑肌细胞(VSMC)后,观察FAK和ILK的磷酸化及FAK与ILK相互作用的变化。结果显示,包被于培养瓶上的OPN通过趋触作用促进VSMC黏附和伸展,接种45min时,黏附细胞数达对照组的2.4倍(P<0.05);OPN的趋触及趋化作用均可诱导FAK磷酸化、ILK去磷酸化并抑制FAK与ILK结合;转染可表达整合素β3亚单位胞内区的表达质粒pEGFP-C3-β3CD能阻断OPN与整合素相互作用所引发的FAK磷酸化及ILK去磷酸化。研究结果表明,OPN的趋触和趋化作用对整合素下游信号分子FAK和ILK的影响是一致的,且这些作用是由整合素β3亚单位胞内区所介导的。
- 李菁菁温进坤韩梅
- 关键词：骨桥蛋白趋化作用黏着斑激酶
- 骨桥蛋白13肽抑制球囊内皮剥脱术后血管狭窄的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的:利用含有骨桥蛋白(OPN)多种功能位点的13肽(Gly158-Lys170),从细胞和整体水平观察其对VSMC和单核巨噬细胞黏附、浸润以及内膜增生的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用不同浓度OPN13肽(0,100,200,300mg/L)检测其对体外培养的平滑肌细胞(VSMC)与OPN黏附的抑制作用;以不含黏附序列的6肽分子为对照组,用以确定13肽抑制黏附特异性。用球囊内皮剥脱法建立大鼠内膜增生模型。实验动物分为4组:治疗组大鼠自术前1h及术后静脉滴注13肽,连续给药7d;对照组大鼠给予非特异性对照6肽分子;模型组大鼠给予相同剂量的生理盐水;正常对照组大鼠施假手术。并利用免疫组织化学染色和Western印迹分析方法,检测血管壁中OPN、FAK、ILK的表达变化。结果:OPN13肽能特异性的及浓度依赖性的抑制VSMC与OPN的相互作用,血管内膜剥脱后给予13肽治疗组血管壁单核/巨噬细胞浸润减少,OPN及其下游信号分子ILK,FAK表达下调,内膜增生被明显抑制。结论:含有OPN多功能位点的13肽可通过阻断OPN与膜受体的相互作用而抑制血管炎症的进展和内膜增生。
- 卢洁韩梅温进坤李菁菁
- 关键词：骨桥蛋白细胞黏附血管内膜增生信号分子
- 鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响及机制被引量：1
- 2016年
- 目的观察鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对骨桥蛋白（OPN）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响,探讨其作用机制。方法采用常规贴块法分离培养SD大鼠VSMC,收集对数生长期的第3-5代细胞随机分为14组,对照组常规培养,OPN组加入终浓度为20 mg/mL的OPN,鼠妇水提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为2、1、0.5 mg/mL的鼠妇水提取物,鼠妇乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为1、0.5、0.25 mg/mL的鼠妇乙酸乙酯提取物,OPN＋鼠妇水提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为20 mg/mL的OPN及终浓度为2、1、0.5 mg/mL的鼠妇水提取物,OPN＋鼠妇乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组分别加入终浓度为20 mg/mL的OPN及终浓度为1、0.5、0.25 mg/mL的鼠妇乙酸乙酯提取物,各组均培养24 h;采用MTT法检测细胞增殖情况（OD值）,采用Western boltting法检测细胞FAK蛋白相对表达量。结果 OPN组OD值及FAK蛋白相对表达量均高于其他各组（P均〈0.05）;OPN＋各浓度鼠妇水提取物及OPN＋各浓度鼠妇乙酸乙酯提取物组OD值及FAK蛋白相对表达量均低于OPN组（P均〈0.05）,各浓度组间比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）。结论鼠妇水提取物和乙酸乙酯提取物对OPN诱导的VSMC增殖均具有抑制作用,抑制FAK胞内信号传导可能是二者共同的作用机制。
- 段哲萍于新江吴大勇李菁菁赵娟
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖黏着斑激酶
- 鼠妇提取物可抑制ILK调节骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖
- 2017年
- 背景:前期实验通过MTT法及细胞划痕实验检测出鼠妇可影响血管平滑肌细胞的增殖和迁移过程,但其相关作用机制尚不清楚。目的:探讨鼠妇对于骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖影响的相关分子机制。方法:按常规方法培养SD大鼠胸腹主动脉血管平滑肌细胞,选取3-5代细胞用于实验。实验分为8组:对照组、骨桥蛋白组、鼠妇水提取物(0.5,1.0,2.0 g/L)+骨桥蛋白组、鼠妇乙酸乙酯提取物(0.25,0.5,1.0 g/L)+骨桥蛋白组。加入相应药物培养24 h后,收集细胞,采用Western bolt检测PCNA、ILK蛋白表达水平。结果与结论:(1)在鼠妇水提取物及乙酸乙酯提取物的作用下血管平滑肌细胞PCNA蛋白表达下降,其中0.5 g/L的鼠妇水提取物组和1.0 g/L的鼠妇乙酸乙酯提取物组抑制作用最明显,分别为骨桥蛋白组的77.8%和74.1%;(2)低质量浓度(0.5 g/L)的鼠妇水提取物抑制ILK表达作用明显,是骨桥蛋白组的81.4%;鼠妇乙酸乙酯提取物作用下血管平滑肌细胞ILK的表达水平没有明显改变;(3)结果表明,鼠妇水提取物及乙酸乙酯提取物均可抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖,且鼠妇水提取物该作用可能与ILK蛋白通路有关。
- 段哲萍于新江李菁菁赵娟
- 关键词：骨桥蛋白质鼠妇骨桥蛋白ILK
- 任务驱动式翻转课堂在医学遗传学实验课的应用被引量：10
- 2017年
- 医学遗传学是一门重要的医学基础必修课,也是一门以实验为基础的自然科学。翻转课堂是一种新型的教学模式,提倡以学生为主体的现代教学理念。在医学遗传学实验教学中,引入翻转课堂教学模式,设置问题作为学习任务,具体实施分为任务驱动式的课前自学和学生为主的课堂内化两部分。任务驱动式翻转课堂教学有效提高学生的学习主动性和学习效率,获得了较好的教学效果。
- 雷宇华吕品赵娟李菁菁
- 关键词：医学遗传学实验教学
