王晓玮
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌CFP10、ESAT6蛋白的原核表达、纯化及ELISPOT检测方法的建立与应用被引量：5
- 2015年
- 以结核分枝杆菌CFP10、ESAT6蛋白原核表达、纯化体系为基础,建立稳定的ELISPOT方法;检测164份疑似结核患者标本的外周血ELISPOT,与临床诊断及T-SPOT·TB结果对比。表达所得重组蛋白浓度和纯度如下:CFP10为0.5 mg/ml,84%;ESAT6为4 mg/ml,98%。ELISPOT方法最佳实验条件为每孔细胞密度2×105/孔,CFP10、ESAT6蛋白抗原浓度分别为10μg/孔,细胞孵育时间20 h。ELISPOT的灵敏度与特异度分别为88.50%、82.35%,检测结果与TSPOT·TB方法结果一致(χ2=0.57)。
- 王晓玮程筱雯张焰徐东芳王东萍韦薇王庆徐元宏
- 关键词：结核病诊断Γ-干扰素ELISPOTCFP10ESAT6
- 人体菌群研究的新兴技术
- 2019年
- 目的目前研究已知人的个体与多达1014微生物存在共生关系[1],这些与宿主相关的微生物大多生活在胃肠道、口腔、呼吸道等部位,具有非凡的代谢潜力,在人类健康调节中起着双重作用。人体菌群一方面增强了宿主对病原体入侵的反应[2],调节宿主基因的表达和免疫反应,另一方面也可出现菌群异常导致机体免疫系统紊乱,最终影响整体健康[3-5]。深入研究人体中的微生物组成,探究菌群与人体之间的作用以及其与疾病发生、发展以及预后的相关性,从而将微生物组学研究与临床应用相结合,探寻新型疾病的预防控制及治疗途径,具有重要意义。
- 王晓玮徐元宏
- 关键词：肠道菌群
- 弥漫大B细胞淋巴瘤患者肠道菌群动态分析被引量：2
- 2020年
- 目的:追踪1例弥漫大B细胞淋巴瘤,观察该患者肠道菌群结构的动态变化,研究肠道菌群与疾病进展的联系。方法:收集1例初诊血液恶性肿瘤中的弥漫大B细胞淋巴瘤患者入院当天、第16天时第1次化疗及第30天时第2次化疗后样本,通过16S rDNA技术分析肠道菌群多样性和差异性。结果:初诊时肠道菌群分布主要为韦荣球菌属、拟杆菌属、粪杆菌属、萨特菌属、链球菌和普氏菌属。16 d后韦荣球菌属、拟杆菌属、普氏菌属占优势。30 d后菌群主要为梭状芽孢杆菌属、拟杆菌属及布劳特氏菌。该例血液恶性肿瘤淋巴瘤患者厚壁菌门丰度始终占明显优势,而益生菌双歧杆菌属及乳杆菌属始终丰度极低,随疾病的进展,梭杆菌门几乎消失。粪球菌属及布劳特氏菌随病情进展逐渐上升,梭状芽孢杆菌属及大肠埃希菌属总体也呈上升趋势。萨特菌属、链球菌、副杆菌属明显下降,普氏菌属、小杆菌属及梭杆菌属及丁酸球菌属几乎消失。香茅梭菌增加,益生菌狄氏副杆菌及Butyricicoccus pullicaecorum减少。而被认为与肿瘤细胞凋亡有关的糖精梭菌增加,考虑与治疗有效相关。结论:随病程的进展,血液恶性肿瘤患者的肠道菌群结构发生改变,可为血液恶性肿瘤的治疗方案提供新思路。
- 钟佩王晓玮李亚娟徐元宏
- 关键词：肠道菌群弥漫大B细胞淋巴瘤
- 结核患者CD4＋ T淋巴细胞CFP-10蛋白刺激前后基因表达谱分析
- 2017年
- 结核病严重危害人类健康,目前全球每年新增活动性结核患者约1 040万,年死亡约140万,全球超过1/3的人口感染过结核分枝杆菌,同时随着合并HIV感染和多重耐药病例的增多,使得结核病的全球防治形势依旧严峻.培养滤液蛋白10（10-kDa culture filtrate protein, CFP-10）由结核分枝杆菌基因组差异区1（region of difference 1, RD1） Rv 3874编码产生,并且RD 1区只出现在致病结核分枝杆菌中,其他分枝杆菌和卡介苗（bacillus Calmette-Guerin, BCG） 不表达CFP-10,是结核病诊断的特异性蛋白抗原.CFP-10可诱发结核纯蛋白衍生物（purified protein derivative,PPD） 皮肤试验阳性患者外周血单个核细胞增殖并产生γ-干扰素（interferon γ,IFN-γ）[4].本研究基于全基因组表达谱芯片,检测CFP-10刺激结核患者外周血CD4＋ T淋巴细胞前后的基因表达谱的变化,就IFN-γ的释放进行探讨,为进一步研究结核发病机制提供分子生物学基础.
- 张焰王晓玮程筱雯徐东芳王东萍韦薇王庆徐元宏
- 关键词：CFP-10结核病诊断T淋巴细胞CD4+表达谱分析
- ESAT-6刺激结核患者CD4^+ T淋巴细胞前后释放IFN-γ mRNA差异表达及信号通路变化被引量：1
- 2016年
- 目的利用全基因组表达谱芯片对早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)刺激结核患者外周血CD4^+T淋巴细胞前后释放γ-干扰素(IFN-γ)mRNA进行检测,并对mRNA在刺激过程中可能涉及到的信号通路变化进行分析。方法抽取3例初诊结核患者外周静脉血各10 ml,密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(PBMC),ESAT-6刺激PBMC,6 h后磁珠法分选CD4^+T淋巴细胞,提取细胞总RNA,全基因组表达谱芯片检测刺激前后差异表达基因。利用GO分析对差异表达的基因进行功能分类,KEGG进行信号通路分析。结果 ESAT-6刺激后差异表达的mRNA共有2 297条,相对高表达的mRNA有1 071条,相对低表达的mRNA有1 226条(>2倍变化且P<0.05)。信号通路分析显示差异表达的mRNA参与了17条信号通路的调控,其中JAK-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等5条信号通路与结核释放IFN-γ关系密切。结论 ESAT-6刺激后的CD4^+T淋巴细胞有大量mRNA发生差异表达,其在多个与结核释放IFN-γ密切相关的信号通路中发挥着重要的调控作用。
- 张焰王晓玮程筱雯徐元宏
- 关键词：Γ-干扰素信号通路结核
- 结核分枝杆菌CFP-10与ESAT-6原核质粒的构建及表达
- 目的构建结核分枝杆菌特异性分泌蛋白培养滤液蛋白10(CFP-10)及早期分泌抗原靶分子(ESAT-6)的高表达体系,为建立结核菌特异性IFN-γElispot及流式诊断方法及其作用机制的研究奠定基础。方法以结核分枝杆菌H...
- 王晓玮程筱雯徐元宏
- 关键词：结核分枝杆菌蛋白表达
- 文献传递
- 结核高负担地区结核分枝杆菌快速诊断方法的研究进展被引量：3
- 2014年
- 人类患结核病的历史悠久,18世纪科学家分离出结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）,随后抗结核药物的使用使结核病得到有效控制。但20世纪80年代后期,世界结核病疫情又开始回升,且日趋严重。
- 王晓玮徐元宏
- 关键词：结核分枝杆菌核酸扩增技术抗原
- 6697例血流感染患儿的病原菌菌种及其耐药谱分析被引量：5
- 2021年
- 目的了解儿童患者血流感染病原菌菌种,并分析其病原菌的耐药谱。方法回顾性分析6697例流血感染患儿病原菌菌种及病原菌耐药谱。结果患儿病原菌阳性率为3.90%,其中革兰阳性菌168株(64.4%)、革兰阴性菌93株(35.6%)。金黄色葡萄球菌对青霉素G、苯唑西林,克林霉素的耐药率均大于80%,凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素G、苯唑西林、克林霉素耐药率均小于80%;凝固酶阴性葡萄球菌中均未检出对万古霉素以及替加环素耐药的菌株。在肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株检出率31.2%,嗜麦芽窄食单胞菌对于亚胺培南存在天然耐药,而对头孢他啶及米诺环素等药物耐药性低。结论儿童患者血流感染的病原菌分布以革兰阳性球菌为主,前3位的病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌。菌种之间耐药性差异较大,且耐药性较强。
- 王晓玮徐元宏
- 关键词：感染性疾病血流感染病原微生物抗药性
- 肠道菌群与甲状腺相关疾病的研究进展被引量：2
- 2017年
- 肠道菌群是由大量需氧菌、厌氧菌、病毒等组成,参与了机体许多生理功能的维持,与营养物质的消化吸收、免疫系统的调节、内分泌系统的激素代谢平衡有着至关重要的联系,二者相互作用,使宿主机体保持稳定。其与机体相关作用需要的信号物质可能是细菌相互作用的部分或其产生的代谢物,可作用于外源作用以及内生作用等。当肠道菌群出现紊乱时,机体可能出现一系列疾病。经研究许多内分泌及免疫相关疾病如1型糖尿病、2型糖尿病、炎症性肠炎、类风湿性关节炎等与肠道菌群紊乱多存在一定相关性。甲状腺作为机体重要的内分泌腺体,对于机体激素环境调节极其重要,作用复杂,同时甲状腺疾病种类多,发病过程中症状多较为复杂,机制尚不明确,如Graves病、桥本甲状腺炎、亚急性甲状腺炎等。本文通过对甲状腺相关疾病与肠道菌群紊乱之间的关联性研究进展作一综述,探究肠道菌群对于甲状腺疾病的预防、诊断以及治疗的指导意义。
- 王晓玮徐元宏
- 关键词：肠道菌群GRAVES病桥本甲状腺炎亚急性甲状腺炎
