王淑红
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LEF-1截短型基因真核荧光表达载体的构建及其在SW480细胞系中的功能研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建LEF-1截短型基因的真核表达荧光质粒,在真核细胞中表达,并检测其对人结肠癌细胞系SW480增殖和凋亡的影响。方法利用PCR方法从人淋巴结cDNA文库中克隆LEF-1截短型的编码基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1中,同时插入红色荧光示踪片段mRFP。用脂质体将重组质粒pcDNA3.1-LEF-1-mRFP瞬时转染Hela细胞,通过Westernblot和流式细胞仪检测LEF-1截短型的表达,同法瞬时转染SW480细胞,观察细胞形态变化,MTT检测对细胞生长的影响,CSFE染色检测细胞的增殖情况,AnnexinV方法检测细胞凋亡情况,PI染色检测细胞周期。结果克隆LEF-1截短型的编码基因,经测序比对证实与GenBank中给出的序列一致。以含有LEF-1截短型的编码基因的真核表达荧光载体瞬时转染Hela细胞,LEF-1截短型基因的表达产物通过Westernblot和流式细胞仪方法得到证实。转染SW480细胞,光镜下观察发现部分细胞中出现颗粒,失去正常形态,细胞数目明显减少;MTT检测显示细胞活性下降,流式检测显示细胞增殖受到抑制,凋亡水平增加,细胞在G0/1期发生阻滞。结论成功构建LEF-1截短型的编码基因的真核荧光表达载体,证实其在真核细胞Hela中可以表达。同时可以抑制SW480细胞的活性和增殖,促进其凋亡,细胞被阻滞在G0/1期。
- 王淑红田涛南克俊
- 关键词：克隆结肠癌真核表达
- 截短型LEF-1对HeLa细胞系生物学行为的影响及其相关机制被引量：1
- 2010年
- 目的探讨淋巴细胞增强因子(LEF-1)截短亚型对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响及其分子机制。方法利用PCR方法从人淋巴结cDNA文库中克隆LEF-1截短型的编码基因,将其插入pCDNA3.1/V5-His载体中构建截短型LEF-1的真核表达质粒,脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-Δ-LEF-1转染HeLa细胞,G418筛选稳定表达目的基因的细胞株,Western blot鉴定目的基因的表达,流式细胞术分析转染后细胞的增殖,凋亡和胞周期变化,以及CXCR4的表达情况;细胞外基质实验检测细胞的黏附能力;Transwell检测细胞的迁移能力。结果成功构建截短型LEF-1真核表达质粒,获得稳定表达LF-1截短亚型的HeLa细胞株,目的基因稳定表达,转染后的细胞增殖速度减慢,凋亡增加,细胞阻滞在G0/G1期,迁移能力降低,CXCR4的表达降低。结论 LEF-1截短亚型可以抑制HeLa细胞增殖和迁移,而这种调控作用可能和CXCR4的表达有关。
- 王淑红南克俊田涛梁璇王文娟
- 关键词：凋亡宫颈癌CXCR4
- β-catenin依赖性LEF-1亚型对宫颈癌HeLa细胞生物行为学的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨β-catenin依赖性LEF-1亚型对宫颈癌HeLa细胞生物行为学的影响。方法利用PCR方法从人淋巴结cDNA文库中克隆全长型LEF-1的编码基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His中,脂质体法转染Hela细胞,G418筛选稳定表达目的基因的细胞株,Western blot鉴定目的基因的表达,MTT和平板克隆形成实验检测转染后细胞的增殖情况,Annexin V方法检测细胞凋亡情况,裸鼠体内成瘤实验检测β-catenin依赖性LEF-1亚型对肿瘤细胞体内成瘤能力的影响。结果成功构建LEF-1真核表达质粒,获得稳定表达β-catenin依赖性LEF-1亚型的HeLa细胞株,转染后的细胞增殖速度加快,凋亡水平降低,体内成瘤能力加强。结论全长型LEF-亚型的上调表达对于HeLa细胞的部分恶性生物学行为的发生具有一定的促进作用。
- 王淑红南克俊田涛梁璇
- 关键词：增殖凋亡宫颈癌
- LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义被引量：2
- 2013年
- 目的探讨淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义。方法采取免疫组化SP法检测184例人结直肠癌组织及184例癌旁正常组织中LEF1和Jagged1的表达,分析两者与人结直肠癌临床病理因素之间的关系。结果 LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的阳性表达率分别为68.5%和65.8%,均明显高于癌旁正常组织(P<0.001)。LEF1的表达与患者的淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05);Jagged1的表达与患者的组织分化程度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05)。LEF1和Jagged1在结直肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.373,P<0.001)。结论 LEF1和Jagged1的高表达与结直肠癌发生发展以及转移密切相关,两者联合检测对人结直肠癌的早期诊断及判断预后具有一定的参考价值。
- 王文娟南克俊王淑红胡婷华姜丽丽马婕群
- 关键词：结直肠癌JAGGED1免疫组织化学
- 非小细胞肺癌组织中CXCR4和Nrf2的表达及其临床意义被引量：11
- 2014年
- 目的通过检测临床非小细胞肺癌(NSCLC)标本中CXCR4和Nrf2的表达情况,以探究两者在疾病发生发展中的重要作用及相关性,为肺癌诊断和治疗提供新的思路。方法应用免疫组化及Real-time PCR方法对资料统计完整的66例NSCLC标本检测CXCR4及Nrf2的表达情况。结果在NSCLC组织中,CXCR4与Nrf2蛋白及mRNA的表达量均明显高于正常组织(P<0.01)。CXCR4的阳性表达与较大的肿瘤体积(P=0.048)、肿瘤低分化(P=0.024)、较晚的TNM分期(P=0.018)、淋巴转移(P=0.004)及远处转移(P=0.016)相关。Nrf2的阳性表达与较大的肿瘤体积(P=0.008)、较晚的肿瘤TNM分期(P=0.028)、淋巴结转移(P=0.038)与远处转移(P=0.023)相关。进一步发现NSCLC组织中CXCR4与Nrf2的表达呈正相关(r=0.324,P<0.01),且CXCR4、Nrf2共同阳性表达与淋巴结转移及远处转移存在显著相关性。结论证明CXCR4和Nrf2的异常表达与NSCLC的进展、恶性生物学行为密切相关,且二者在NSCLC的发生发展中存在协同作用。
- 胡婷华姚煜于硕郭卉田涛韩丽丽王文娟郭倩倩王晶南克俊王淑红
- 关键词：CXCR4非小细胞肺癌生物标记物CXCR4NRF2
- LKB1基因转染对人肺腺癌细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨外源性LKB1基因表达对人肺腺癌细胞生物学行为的影响。方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA-LKB1质粒和空载体pcDNA3.1质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Western blot检测LKB1和STAT3在A549细胞中的表达变化。通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测获得性表达LKB1基因后肺癌细胞的增殖变化,流式细胞术(FCM)分析其细胞周期及其凋亡的变化。结果:成功获得了稳定表达外源性LKB1基因的A549细胞系,与转染空白载体组比较,转染LKB1基因的细胞生长速度明显减慢,细胞周期中G1/G0期比例明显增加,S期比例减少,细胞凋亡率升高;同时STAT3蛋白的磷酸化水平明显降低。结论:LKB1可能通过下调STAT3蛋白磷酸化水平的表达从而抑制A549细胞的恶性生物学行为。
- 梁璇南克俊李春丽姚煜田涛王淑红
- 关键词：LKB1转染STAT3
