薛添
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目陕西省社会发展科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的 制备高特异性的抗雌三醇（E3）单克隆抗体（mAb）, 建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法。方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA。应用mAb技术制备抗E3的mAb; 以硝酸纤维素膜为固相载体, 抗E3 mAb为包被抗体, 建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法。结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株。mAb效价为1×10^5～5×10^5, 亲和常数为5.1×10^8～5.2×10^9 L/mol。检测敏感度为2 ng/mL, 检测范围2～200 ng/mL。结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法。
- 薛添赵轶君董洁李红民
- 关键词：雌三醇单克隆抗体
- 阿莫西林人工抗原的合成及其单克隆抗体的制备被引量：5
- 2011年
- 目的:合成阿莫西林(AMX)完全抗原,获得稳定、高效分泌抗AMX单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。方法:采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法制备AMX-OVA(免疫原)AMX-BSA(检测抗原),紫外光谱分析检测偶联物克分子比,以AMX-OVA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选分泌抗AMX mAb的杂交瘤细胞,体内诱生法制备腹水,辛酸-硫酸胺法从腹水中纯化mAb,ELISA法测定mAb亚类。结果:紫外光谱显示偶联物表现出小分子与蛋白载体叠加的特征,具有良好的免疫原性和反应原性。获得了5株可稳定分泌特异性抗AMX mAb的杂交瘤细胞株,亚类鉴定均为IgG1。mAb对AMX最小检测极限(limit of detection,LOD)为0.25 ng/mL,但与同属β-内酰胺类抗生素的氨苄青霉素有一定程度的交叉反应。结论:该细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。
- 薛添宋凯薛小平
- 关键词：阿莫西林单克隆抗体小鼠
- 汉滩病毒包膜糖蛋白糖基化位点突变体重组假病毒的构建及初步鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:为进一步研究汉坦病毒包膜糖蛋白的糖基化与病毒的感染性和免疫原性等的关系,构建含有汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(GP)糖基化位点突变体的重组假病毒。方法:利用定点突变的方法,分别突变了HTNV 76-118株的5个N-糖基化位点并克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染293T细胞,构建5株重组假病毒。感染HEK293细胞后,进行RT-PCR鉴定及免疫荧光检测。结果:经测序显示构建的含有N-糖基化位点突变体的5个重组假病毒原序列中的天冬酰胺(N)均被置换为谷氨酰胺(Q)。RT-PCR结果显示5个重组假病毒均有HTNV GP基因的表达。免疫荧光检测5个重组假病毒均可表达HTNV的Gn和Gc蛋白。结论:成功构建了含有HTNV包膜糖蛋白糖基化位点突变体的5个重组假病毒,分别命名为rLV-M1、rLV-M2、rLV-M3、rLV-M4和rLV-M5。本研究为明确N-糖基化对汉坦病毒生物学活性的影响提供了有利的研究工具,并为汉坦病毒疫苗及致病机理的进一步研究打下了一定的基础。
- 于澜张亮张蕾王芳刘梓谕程林峰薛添吴兴安徐志凯张芳琳
- 关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白
