马健
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
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- 缺氧条件下维生素E对视网膜色素上皮细胞生长的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:自行设计细胞模型并观察缺氧条件下维生素E对培养视网膜色素上皮细胞生长的影响。方法:实验于2006-10/2007-03在南京医科大学生理实验室完成。①实验操作:取对数生长期的细胞,以正常条件为对照(常规培养和体积分数为0.95的空气,体积分数为0.05的CO2),建立人视网膜色素上皮细胞的缺氧模型(缺氧培养,体积分数为0.95的N2和体积分数为0.05的CO2混合气体,测氧仪测氧浓度<1%,24h),作用于细胞的维生素E浓度分别为0.1,0.2,0.3mol/L。②实验评估:四甲基偶氮唑盐法检测24h细胞活力(以吸光度A值表示);激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧水平;黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶活性。结果:①四甲基偶氮唑盐检测细胞生长活力:缺氧组细胞活力低于对照组(P<0.01),缺氧+维生素E组细胞活力有所提高,与缺氧组相比,差异显著(P<0.05)。随着维生素E浓度的提高,活力逐渐升高。②细胞内活性氧水平:与对照组比较,缺氧组细胞内活性氧的产生明显增多;与缺氧组比较,缺氧+维生素E组抑制视网膜色素上皮细胞内活性氧的产生。③超氧化物歧化酶活力检测:与对照组比较,缺氧组超氧化物歧化酶的活力降低;与缺氧组比较,缺氧+维生素E组超氧化物歧化酶活力升高,差异均具有显著性意义(P<0.05)。结论:缺氧引起视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤,维生素E抑制了缺氧情况下视网膜色素上皮细胞的损伤作用,维生素E主要通过提高超氧化物歧化酶活性来发挥抗氧化损伤作用,其抗氧化损伤作用有剂量依赖性。
- 马健袁志兰帅捷曹鎏洪瑾
- 关键词：老年性黄斑变性维生素E缺氧活性氧
- 褪黑素对高糖刺激人视网膜色素上皮细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响被引量：9
- 2007年
- 目的研究褪黑素对高糖刺激体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法培养人RPE细胞,分为对照组、甘露醇组、高糖组和高糖+褪黑素组,作用48h后,光镜观察细胞形态;MTT法检测细胞活性;免疫荧光染色法和Western blot检测RPE细胞中iNOS的蛋白表达。结果MTT检测结果表明高糖可以抑制RPE细胞增生,加入褪黑素后,抑制作用减弱;免疫荧光染色法和Western blot检测结果表明,与对照组相比,高糖组iNOS蛋白表达明显增高,加入褪黑素后,iNOS表达被显著抑制。结论高糖可以抑制RPE细胞增生,诱导RPE细胞iNOS的表达上调,而褪黑素可减轻细胞损伤。
- 曹鎏洪瑾帅捷马健袁志兰戈应滨
- 关键词：高糖视网膜色素上皮细胞褪黑素
- 金雀异黄素对培养的人RPE细胞诱导凋亡作用的研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究金雀异黄素(genistein,Gen)对培养的人视网膜色素上皮(retinal pig-ment epithelium,RPE)细胞的诱导凋亡作用,探讨其作用机制。方法 0、25、50、100、200μmol.L-1Gen分别作用RPE细胞24h;MTT检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期,定量分析凋亡;免疫印迹技术检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated proteinkinas-es,ERK)、p38MAPK的表达及活性。结果不同浓度的Gen作用RPE细胞24h后,细胞生长明显受到抑制,抑制率分别为6.44%、14.71%、28.97%、45.75%;细胞凋亡率明显增高,分别为16.87%、19.44%、23.14%、34.81%;细胞周期表现为S期和G2/M期阻滞,并伴随G0/G1期细胞减少;p-ERK1/2表达下调,p-p38表达下调。ERK1/2的激活与Gen诱导的细胞凋亡呈负相关,p38的激活与凋亡可能也存在一定的关系。结论 Gen可以抑制人RPE细胞的增殖,并诱导其凋亡,存在量效关系,且主要是通过ERK通路发挥生物学效应。
- 曹鎏马健袁志兰戈应滨
- 关键词：视网膜色素上皮细胞金雀异黄素细胞凋亡
