于梅
- 作品数：9 被引量：144H指数：7
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- 葛根芩连汤含药血清对HepG2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用被引量：21
- 2015年
- 目的:探讨葛根芩连汤含药血清对Hep G2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的调节作用。方法:大鼠分别按含生药6 g·kg-1剂量ig葛根芩连汤,空白组ig给予等量蒸馏水,按3 mg·kg-1剂量ig吡格列酮,2次/d,连续7 d,末次给药1 h后,心脏穿刺取血制备葛根芩连汤、空白和吡格列酮含药血清。采用MTT法检测葛根芩连汤含药血清对细胞增殖的影响;Hep G2细胞以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基传代培养,将处对数生长期细胞消化后,用含2%FBS DMEM培养基调整细胞密度为106个/m L,以10 mg·L-1胰岛素处理24 h,复制Hep G2细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法检测葛根芩连汤含药血清对Hep G2细胞葡萄糖消耗的影响;蒽酮法检测细胞内糖原含量;乳酸脱氢酶偶联比色法测定肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的活性。结果:与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量明显下降(P<0.01),糖原含量显著降低(P<0.05),而PEPCK活性升高(P<0.05);8%葛根芩连汤含药血清作用Hep G2细胞胰岛素抵抗模型24 h能显著增加葡萄糖消耗量(P<0.05),且葛根芩连汤含药血清(8%,16%)能够增加糖原含量,葛根芩连汤含药血清(4%,8%,16%)能够降低PEPCK活性(P<0.05)。结论:葛根芩连汤含药血清可调节肝糖代谢,进而可改善肝细胞胰岛素抵抗。
- 章常华邓可众于梅魏学鑫屈飞徐国良盛军庆
- 关键词：葛根芩连汤含药血清糖代谢
- 葛根芩连汤含药血清对L6肌细胞胰岛素抵抗模型中PI3K、Akt、GLUT4、AMPK蛋白的影响被引量：14
- 2018年
- 目的通过观察葛根芩连汤含药血清对L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、葡萄糖转运子4(GLUT4)的影响,探讨葛根芩连汤抗2型糖尿病胰岛素抵抗的信号通路相关机制。方法将诱导分化好的L6肌细胞接种于6孔板内,以1μmol/L DEX诱导L6肌细胞24 h产生胰岛素抵抗,予以不同浓度的葛根芩连汤含药血清(20%、10%和5%),采用western blot法检测L6骨骼肌细胞p-PI3K、Akt、p-Akt、p-AMPK、GLUT4蛋白的表达。另设实验,分组方法如上,采用ELISA法检测膜蛋白GLUT4含量。结果葛根芩连汤含药血清(20%、10%和5%)(高、中和低剂量组)治疗后,p-PI3K、Akt、p-Akt、p-AMPK、GLUT4蛋白的表达明显升高(P<0.05);用葛根芩连汤含药血清(20%、10%和5%)(高、中和低剂量组)治疗后,膜GLUT4蛋白的表达明显升高(P<0.05)。结论葛根芩连汤抗2型糖尿病胰岛素抵抗作用可能与影响PI3K、Akt、GLUT4、AMPK蛋白相关。
- 章常华孙军肖琴刘彤彤魏学鑫涂秀英于梅盛军庆
- 关键词：葛根芩连汤AMPK
- 小檗碱和黄芩苷对葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量干扰作用研究被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨小檗碱和黄芩苷对葡萄糖氧化酶（GOD）法测定葡萄糖含量的干扰作用。方法：用GOD法测定加入不同浓度小檗碱和黄芩苷的含血清培养基葡萄糖含量结果,对其结果进行分析、比较。结果：对照组与小檗碱和黄芩苷给药组间葡萄糖含量无显著差异,表明小檗碱和黄芩苷对GOD测定葡萄糖含量无明显干扰作用（1-200μmol/L）,结论：在用GOD法测定葡萄糖含量时,小檗碱和黄芩苷对GOD测定葡萄糖含量无明显干扰作用（1-200μmol/L）。
- 涂秀英李瑛魏学鑫于梅徐国良章常华
- 关键词：小檗碱黄芩苷葡萄糖氧化酶法
- 葛根芩连汤及其主要成分对L6骨骼肌细胞糖代谢的调节作用被引量：3
- 2016年
- 目的建立地塞米松(DEX)诱导的L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,探讨葛根芩连汤及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)对L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量的影响。方法将诱导分化好的L6肌细胞按106个·ml-1接种于96孔板内,以MTT法检测葛根芩连汤含药血清对L6肌细胞增殖的影响;以1μmol/L DEX诱导L6肌细胞24 h产生胰岛素抵抗,予以不同浓度的葛根芩连汤含药血清及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)进行干预,100 nmol/L胰岛素刺激30min,采用葡萄糖氧化酶法检测L6肌细胞的葡萄糖消耗量。结果葛根芩连汤含药血清对L6肌细胞增殖无显著影响。与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量明显下降;葛根芩连汤含药血清(5%、10%、15%)、葛根素(1,10,100μmol·L-1)、小檗碱(1μmol/L)和黄芩苷(1,10,100μmol·L-1)能显著增加L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量(P<0.05)。结论葛根芩连汤及其主要成分(葛根素、小檗碱、黄芩苷)可调节L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型糖代谢,进而可改善肌细胞胰岛素抵抗。
- 章常华盛军庆熊淑平涂秀英于梅魏学鑫关志宇
- 关键词：葛根芩连汤糖代谢
- 基于蛋白质组学技术筛选葛根芩连汤防治胰岛素抵抗作用的血清差异表达蛋白被引量：12
- 2016年
- 目的采用蛋白质组学技术筛选鉴定2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠模型组、葛根芩连汤组血清差异表达蛋白,推测葛根芩连汤防治胰岛素抵抗的机制。方法葛根芩连汤组和模型组通过体内高脂饲料联合链脲佐菌素建立大鼠胰岛素抵抗动物模型,连续灌胃给药3个月,于末次给药后1h,取血清,去除高丰度蛋白后,进行蛋白变性、还原、烷基化、酶解及脱盐后,利用液相Thermo EASY-nlc1000和质谱仪LTQ orbitrap Elite分析鉴定,利用Xcalibur软件和Thermo Proteome discoverer1,4进行数据处理,采用SIEVE v2.1×64进行无标定量分析寻找相关差异蛋白,筛选并鉴定差异表达蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果通过质谱鉴定分析,葛根芩连汤组与模型组差异表达蛋白76个,其中上调49个,下调27个。分析显示差异蛋白主要涉及细胞周期调控、炎症反应、信号通路调节等生物过程。其中上调蛋白磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)(Q63788)、胰岛素受体底物蛋白(IRS)(P35570)等以及下调蛋白载脂蛋白C-Ⅲ(APOC-Ⅲ)(P06759)、肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)(P02692)等差异蛋白可能参与了胰岛素信号转导等通路。结论通过有效的比较分析,得到了一些参与胰岛素信号转导等通路的差异表达蛋白,为研究葛根芩连汤防治胰岛素抵抗的分子机制提供了新靶点。
- 章常华涂秀英熊淑平盛军庆关志宇于梅魏学鑫
- 关键词：葛根芩连汤胰岛素抵抗蛋白质组学差异表达蛋白
- HPLC法测定“黄芩-黄连”药对提取物中黄芩4种成分含量被引量：9
- 2016年
- 目的采用高压液相色谱法(HPLC)测定"黄芩-黄连"药对中黄芩4种有效成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)。方法采用Hypersil ODS2-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%磷酸三乙胺,梯度洗脱,流速:1.0 m L·min^(-1),检测波长:280 nm,柱温:30℃。结果黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素分别在0.048~0.288 mg·m L^(-1)、0.056~0.336 mg·m L^(-1)、0.042~0.254 mg·m L^(-1)和0.047~0.280mg·m L^(-1)范围线性关系良好,平均回收率分别为100.01%、99.99%、99.64%、99.79%,RSD分别为1.20%、0.80%、1.04%、0.94%。结论该方法简便,结果准确可靠,可作为"黄芩-黄连"药对提取物的质量控制标准。
- 盛军庆章常华熊淑平于梅涂秀英陈银芳邓敏芝
- 关键词：黄芩苷汉黄芩苷黄芩素汉黄芩素
- 葛根芩连汤对KK-Ay糖尿病小鼠血浆中LPS、TNF-α、IL-6及肠道菌群的影响被引量：85
- 2017年
- 目的探讨葛根芩连汤(GGQLD)对KK-Ay糖尿病小鼠血浆中脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的量及肠道菌群的调节作用。方法以普通饲料喂养的C57BL/6J小鼠作为对照组,ig等量蒸馏水。将高脂饲料喂养的KK-Ay小鼠分为5组,吡格列酮组和模型组分别ig给予盐酸吡格列酮5 mg/kg和等量蒸馏水,GGQLD高、中、低剂量组ig分别给予GGQLD生药40、13.3、4.44 g/kg。各组均连续给药4周后,以鲎试剂显色基质法测定血浆中LPS的量,用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血浆中TNF-α及IL-6的水平,采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析小鼠肠道菌群的结构。结果与模型组相比,GGQLD高、中剂量组均能显著降低小鼠血浆内LPS的量(P<0.05),分别降低了15.61%、14.48%;GGQLD高、中、低剂量组IL-6的量与模型组比较分别下降了56.86%、37.12%、30.21%,具有一定的剂量依赖性,且有统计学意义(P<0.05);GGQLD高、中、低剂量组TNF-α的量均明显低于模型组(P<0.05),分别下降了28.32%、30.70%、23.42%。GGQLD高剂量组DGGE图谱条带数目明显增多,且经克隆、测序和Blast比对分析,约翰逊氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii为GGQLD高剂量组特有,说明GGQLD可明显调节肠道菌群结构。结论 GGQLD抗2型糖尿病胰岛素抵抗作用可能与其改善LPS、TNF-α、IL-6等炎症因子,及调节肠道菌群结构相关。
- 章常华马广强邓永兵王晓云陈颖翀涂秀英于梅盛军庆
- 关键词：葛根芩连汤肠道菌群变性梯度凝胶电泳白细胞介素-6
- 基于nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS筛选黄芩-黄连药对干预2型糖尿病KKAy小鼠的骨骼肌差异表达蛋白被引量：9
- 2018年
- 目的采用nano-LC-LTQ／Orbitrap．MS鉴定2型糖尿病KKAy小鼠模型组与给药组的骨骼肌差异表达蛋白，推测黄芩-黄连药对（sc）防治2型糖尿病的作用机制。方法：取20只8-10周龄的雄性KKAy小鼠，给予全价高脂饲料，随机等分为2组，分别为黄芩-黄连药对组（27 g·kg^-1）和模型组（灌胃等量水）。2组均连续灌胃8周，于最后1次给药后1 h处死小鼠，取骨骼肌在液氮中进行研磨，加裂解液及蛋白酶抑制剂提取蛋白，测定蛋白浓度，再进行蛋白变性、还原、烷基化、酶解及脱盐，利用nano-LC-LTQ／Orbitrap．MS检测，利用Xcalibur 2．2软件和Proteome Discoverer 1．4．0．288进行数据处理，采用Sievev2．1（×64）进行无标样定量分析寻找相关差异蛋白，筛选并鉴定差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果：黄芩．黄连药对组与模型组共鉴定出107个差异表达蛋白质，经生物学分析筛选出与糖尿病相关的差异蛋白共5个，其中上调4个（50磷酸腺苷激活的蛋白激酶、脂联素等），下调1个（脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4）。分析显示差异蛋白质主要涉及炎症反应、信号通路调节等生物过程。结论：通过有效的比较与分析，得到了一些参与胰岛素信号转导等通路的差异表达蛋白质，为研究黄芩一黄连药对防治胰岛素抵抗的分子机制提供了新靶点。
- 刘彤彤肖琴盛军庆涂秀英孙军魏学鑫于梅章常华
- 关键词：KKAY小鼠差异表达蛋白
- 葛根芩连汤改善KK-Ay糖尿病小鼠糖脂代谢作用的实验研究被引量：16
- 2016年
- 目的研究葛根芩连汤改善KK-Ay糖尿病小鼠糖脂代谢作用。方法将高脂饮食的KK-Ay小鼠分为5组,吡格列酮组,模型组,葛根芩连汤高、中、低剂量组。另以普通饮食的C57BL/6J小鼠作为正常对照组,6组均连续灌胃4周。实验前后,分别对实验小鼠的摄食量、体重、空腹血糖、胰岛素含量、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白以及低密度脂蛋白进行检测。结果葛根芩连汤可减少摄食量、可降低KK-Ay小鼠的体重、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇,以及降低胰岛素含量和升高高密度脂蛋白含量。结论葛根芩连汤可改善KK-Ay小鼠糖脂代谢,进而可改善2型糖尿病胰岛素抵抗。
- 熊淑平章常华邓永兵盛军庆涂秀英于梅魏学鑫
- 关键词：葛根芩连汤糖脂代谢
