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何建文

作品数：1 被引量：7H指数：1
供职机构：上海医科大学医学分子病毒学重点实验室更多>>
发文基金：美国中华医学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇真核
  • 1篇真核细胞
  • 1篇转染
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  • 1篇细胞
  • 1篇内参
  • 1篇基因
  • 1篇核细胞
  • 1篇肝炎
  • 1篇肝炎病毒
  • 1篇报告基因
  • 1篇SEAP
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇上海医科大学

作者

  • 1篇姚忻
  • 1篇何建文

传媒

  • 1篇上海医学

年份

  • 1篇1999
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP被引量：7
1999年
目的建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系（Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２）及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统，供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞，并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液，用ＥＬＩＳＡ法测定ＳＥＡＰ活性及ＨＢｓＡｇ。结果在三种细胞中ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ均可表达，以７２小时表达的酶活性测定最为适宜；而ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ表达仅处于低水平。以ＳＥＡＰ表达量作为内参对ＨＢｓＡｇ的表达量进行比较，发现Ｓ基因１２９Ｌ变异体表达ＨＢｓＡｇ量显著高于野毒株。结论ＳＥＡＰ作为内参具有快速简便，不需同位素及特殊仪器的优点，有较高的实用价值。
姚忻何建文袁正宏何丽芳
关键词：乙型肝炎病毒SEAP
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