张永亮 作品数:3 被引量:9 H指数:2 供职机构: 山西医科大学 更多>> 发文基金: 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
早发冠心病患者高密度脂蛋白抗HUVEC凋亡的作用机制 被引量:3 2017年 目的通过细胞实验探究早发冠心病(PCHD)患者高密度脂蛋白(HDLPCHD)与健康人群HDL(HDLhealth)抗人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡作用是否有区别及其可能机制。方法采集PCHD患者和与之相匹配的健康人血样,并提取HDL;不同浓度氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理HUVEC 24 h,MTT检测细胞存活率,明确ox-LDL引起HUVEC凋亡的合适浓度;不同浓度、不同时间的HDLhealth预处理HUVEC后,再用合适浓度的oxLDL处理HUVEC 24 h,MTT检测细胞存活率,明确HDLhealth预处理HUVEC的最适浓度与最适作用时间;用最适浓度HDLhealth、HDLPCHD对HUVEC进行最适作用时间的预处理,再用合适浓度的ox-LDL处理HUVEC 24 h,MTT检测细胞存活率。Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒进行流式细胞检测,Western blot检测Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达,用试剂盒测定活性氧(ROS)活性,使用Lipoprint脂蛋白分析仪分析HDLhealth和HDLPCHD亚组分(HDL1-HDL10)分布情况。结果 100 mg/L ox-LDL处理HUVEC 24 h后细胞存活率为60.34%,较空白处理组明显降低(P<0.05);200 mg/L HDLhealth预处理HUVEC 18 h后,细胞存活率为82.01%,可以明显减弱ox-LDL对细胞的损伤;200 mg/L HDLhealth显著抑制100 mg/L ox-LDL诱导的HUVEC凋亡及Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达和ROS产生;200 mg/L HDLPCHD预处理HUVEC 18 h后,细胞存活率为65.5%,其作用较HDLhealth减弱;200 mg/L HDLPCHD可抑制100 mg/L ox-LDL诱导的HUVEC凋亡及Caspase 3、Caspase 9的蛋白表达和ROS产生,但作用较HDLhealth减弱;HDLPCHD亚组分大颗粒(HDL1-HDL3)含量较HDLhealth低(28.5%±5.7%比46.8%±15.2%),而小颗粒(HDL8-HDL10)含量较HDLhealth高(21.4%±7.8%比10.9%±5.4%)。结论 HDLPCHD与HDLhealth比较,可能由于其亚组分大颗粒(HDL1-HDL3)含量较HDLhealth低,而小颗粒(HDL8-HDL10)含量较HDLhealth高,导致其抗氧化功能减弱,抑制ox-LDL诱导内皮细胞凋亡的功能亦减弱,从而减弱或丧失抗动脉粥样硬化的作用。 侯曜曜 尔璐 张永亮 宋晓苏 白瑞 梁斌 边云飞 肖传实关键词:早发冠心病 高密度脂蛋白 氧化型低密度脂蛋白 细胞凋亡 动脉粥样硬化 绝经前后女性冠心病患者HDL及LDL颗粒与冠状动脉病变程度的相关性研究 被引量:5 2017年 目的探讨绝经前后女性冠心病患者高密度脂蛋白(HDL)颗粒及低密度脂蛋白(LDL)颗粒与冠状动脉病变程度的关系。方法收集经冠状动脉造影确诊的女性冠心病患者79例,根据是否绝经分为绝经前组(n=37)和绝经后组(n=42)。Lipoprint脂蛋白分析仪对HDL颗粒及LDL颗粒进行检测分析,探讨两种脂蛋白颗粒与冠状动脉病变程度的关系。结果与绝经前组比较,绝经后组大颗粒HDL浓度(102.6±45.2 mg/L比143.8±49.7 mg/L,P<0.05)及所占比例(23.34%±8.26%比31.15%±7.98%,P<0.05)、LDL颗粒平均直径(259.5±8.1比265.7±3.7,P<0.05)均降低,小颗粒HDL浓度(124.0±76.8 mg/L比87.0±34.9 mg/L,P<0.05)及所占比例(27.26%±12.34%比18.62%±6.53%,P<0.05)、LDL B型比例(73.8%比48.6%,P<0.05)、Gensini积分(50.88±26.46比30.43±18.54,P<0.05)均增高。绝经前组及绝经后组多支病变患者大颗粒HDL浓度、LDL颗粒平均直径均低于单支病变患者,Gensini积分高于单支病变患者;绝经后组大颗粒HDL浓度、LDL颗粒平均直径均低于绝经前组,小颗粒HDL所占比例及Gensini积分高于绝经前组。绝经前组和绝经后组LDL颗粒大小及大颗粒HDL浓度均与Gensini积分呈负相关。结论与绝经前组相比,绝经后组大颗粒HDL浓度较低,小颗粒HDL浓度较高,LDL颗粒平均直径较小,冠状动脉病变程度较严重;大颗粒HDL浓度及LDL平均直径与冠状动脉病变严重程度明显相关。 尔璐 侯曜曜 张永亮 宋晓苏 白瑞 张娜娜 梁斌 边云飞 肖传实关键词:绝经前 绝经后 冠状动脉病变程度 NgBR对巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运的影响 被引量:1 2016年 目的通过转染小干扰RNA(siRNA)沉默RAW264.7细胞源性泡沫细胞神经轴突生长抑制因子B受体(Ng BR)表达,研究Ng BR对泡沫细胞胆固醇逆转运(RCT)的影响,探索从RCT途径抗动脉粥样硬化(As)的新方法,为冠心病的临床防治提供新思路。方法利用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,油红O染色进行鉴定。将泡沫细胞分为四组:空白对照组、siRNA阴性对照组、Ng BR-siRNA1转染组(si Ng BR-1组)、Ng BR-siRNA2转染组(si Ng BR-2组)。利用siRNA沉默泡沫细胞Ng BR基因表达,并利用real-time PCR和Western blot对其进行干扰效率鉴定。随后采用real-time PCR检测各组细胞肝X受体α(LXRα)、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)及三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)mRNA表达,Western blot检测各组细胞相应蛋白含量,液闪计数仪检测胆固醇流出率。结果 ox-LDL成功诱导泡沫细胞形成;si Ng BR-1组和si Ng BR-2组Ng BR mRNA及其蛋白明显下调(P<0.05);si Ng BR-1组和si Ng BR-2组LXRα、ABCA1和ABCG1的mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05),胆固醇流出显著减少(P<0.05)。结论 Ng BR可以增加巨噬细胞源性泡沫细胞RCT的调控基因LXRα及其下游基因ABCA1、ABCG1的表达,从而减弱或者避免As的发生和发展,为冠心病的临床防治提供理论依据。 王玉凡 宋晓苏 白瑞 梁斌 刘改珍 娄秀萍 尔璐 侯曜曜 张永亮 边云飞 肖传实关键词:胆固醇逆转运 巨噬细胞源性泡沫细胞