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流式细胞术检测肿瘤耐药细胞中P-糖蛋白细胞前处理方法的优化: 2009年; 目的:优化流式细胞术(FCM)检测肿瘤耐药细胞中P-糖蛋白(P-gp)的细胞前处理方法,提高细胞中P-gp的检出率。方法:采用抗原决定簇在细胞膜内的单抗JSB-1,以阳性百分比为优化指标,耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/A为模型细胞,对FACSTM透化溶液的有无、FACSTM透化溶液的浓度、FACSTM透化溶液处理细胞的时间、鼠抗JSB-1抗体的孵育时间、羊抗鼠IgG-FITC(GAMIF)抗体的孵育时间、JSB-1抗体工作液的保存条件、以及细胞数量进行优化。结果:上述细胞处理方法对MCF-7/A的阳性百分比均有不同程度的影响;相对最佳的细胞处理方法为:5×105-20×105个细胞用FACSTM透化溶液的6倍稀释液处理10min,37℃下与JSB-1抗体孵育75min、与GAMIF抗体孵育30min,JSB-1抗体工作液于4℃保存或新鲜配制。结论:对FCM检测前的细胞处理方法进行优化,能显著提高肿瘤耐药细胞中P-gp的检出率,因而更能真实、客观地反映肿瘤耐药细胞的P-gp表达水平及耐药程度。; 陈家宽肖玉秀汪明; 关键词：流式细胞术

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汪明