秦涛 作品数:45 被引量:99 H指数:6 供职机构: 扬州大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏高校优势学科建设工程项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
1株鹌鹑源鸡白痢沙门菌的分离鉴定及致病性初探 被引量:1 2021年 为查明某养殖场鹌鹑大量死亡的原因,采集病死鹌鹑的脏器进行病原的分离鉴定,测定疑似细菌的耐药情况,并进行动物回归试验。结果表明:病死鹌鹑剖检病变主要表现为肝脏肿大呈土黄色,肾脏肿大;分离菌株在麦康凯培养基上呈无色、半透明菌落;能发酵赖氨酸和β-半乳糖苷;采用选择性培养基培养和多重PCR (mPCR)试验确定其为鸡白痢沙门菌;该菌对苯唑西林等6种抗菌药耐药,呈现多重耐药性;气囊接种鹌鹑的半数致死量(LD50)为9.5×10^(5) cfu。这一研究说明鹌鹑的死亡是由鸡白痢沙门菌引起的,为鹌鹑的种群防控净化提供了理论依据。 李超 冯政 张若楠 王楠 王希玉 秦涛 秦涛 彭大新关键词:鹌鹑 鸡白痢沙门菌 沙门菌逃逸宿主天然免疫应答机制的研究进展 被引量:4 2020年 沙门菌是重要的食源性病原菌,其流行严重威胁着全球公共卫生安全。天然免疫应答对于宿主抵御沙门菌的感染具有重要的作用,但是沙门菌已演化出一系列逃逸宿主天然免疫应答的策略,使其在宿主体内定植,并得以持续性感染。本文对由受体(TLRs、NLRs和RIPs)、细胞因子(IL-22和IL-4)和哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路介导的沙门菌逃逸天然免疫应答的机制研究进展进行阐述,期望为沙门菌的预防与治疗提供新的研究思路。 徐诺 周帮月 史艺 潘兴元 秦涛 徐正中 阴银燕关键词:沙门菌 免疫逃逸 TOLL样受体 基于虚拟仿真的新城疫实验室诊断实验设计与应用 2019年 动物传染病学是高等学校兽医学相关专业的主干课程之一,病原学诊断实验与虚拟现实技术相结合,是实验室建设的重要研究方向。针对传统的鸡新城疫实验室诊断实验教学的问题,利用虚拟仿真技术构建模拟实验场景和实验系统,对鸡新城疫实验室诊断虚拟实验教学的设计进行了初步探索。通过自主学习,提高了学生的学习兴趣,教学效果良好,可进行进一步的推广和示范。 陈素娟 秦涛 王晓泉 彭大新关键词:新城疫 一株H1N1亚型猪流感病毒的分离鉴定及小鼠致病性的研究 2023年 为了初步了解从江苏某屠宰场分离鉴定出的一株猪源H1N1亚型猪流感病毒(SIV)A/Swine/Jiangsu/1070/2019(H1N1)的6致病性,对该分离株纯化后进行全基因序列分析,测定其生物学特性,并以10 EID50病毒感染BALB/c小鼠。序列分析结果显示,该病毒HA基因的裂解位点为339PSIQSR↓G347,符合低致病性SIV的分子特征,与A/Swine/Jiangsu/J006/2018(H1N1)同源性最高达到98.94%,NA基因与A/Swine/Shandong/LY142/2017(H1N1)同源性最高达到98.79%,内部基因PB2、PB1、PA、M、NP和NS分别与2018年出现的不同猪源H1N1亚型具有高同源性,因此该病毒是一株在猪体内重组的病毒;病毒在鸡胚上的半数感染量(EID50)为10-8.5/0.1 mL,在MDCK细胞上的半数感染量(TCID50)为10-5.22/0.1 mL;小鼠致病性结果显示,该病毒除可导致小鼠体重下降外,还具有致死小鼠的能力,小鼠的致死率约为33.3%,其能够在小鼠的肺脏和心脏中复制,滴度分布达到2.91±0.19 lg EID50/mL和2.37±0.29 lg EID50/mL,感染后可造成小鼠肺部组织发生严重炎性反应,并导致炎性相关细胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的表达水平明显上调(P<0.01)。综上表明该毒株为新型重组病毒,对小鼠具有一定致病性,为H1N1亚型猪流感的预警和防控提供一定的参考依据。 张金燕 李刚 王泽源 衡武昌 王金源 朱欧文 秦涛 陈素娟 彭大新 刘秀梵关键词:猪流感病毒 H1N1 系统发育分析 四种常用消毒剂对H5N6亚型禽流感病毒灭活效果的研究 被引量:6 2018年 为了比较常用消毒剂对HSN6亚型禽流感病毒(avian influenzavirus,AIV)的杀灭效果,依照《消毒技术规范》,评估聚维酮碘溶液、过硫酸氢钾复合物粉、戊二醛癸甲溴铵溶液、稀戊二醛溶液这4种消毒剂在不同浓度下分别与H5N6亚型AIV作用10、30和60min的灭活效果。结果显示,0.5%(m/V)聚维酮碘溶液作用10min,0.2%(m/V)过硫酸氢钾复合物粉溶液作用10min,0.2%(V/V)戊二醛癸甲溴铵溶液作用30min或0.5%(WV)稀戊二醛溶液作用10min,均可将H5N6亚型AIV完全灭活。与推荐使用浓度相比.稀戊二醛溶液、聚维酮碘、戊二醛癸甲溴铵溶液均可以有效灭活H5N6亚型AIV。而过硫酸氢钾复合物粉不能有效灭活H5N6亚型AIV。本研究为H5N6亚型AIV消毒标准的建立提供了参考。 秦涛 汪川韦 石宝兰 王辉 孙志豪 马若楠 陈素娟 彭大新关键词:消毒剂 灭活作用 H5N1亚型禽流感病毒NA和NS1蛋白原核表达及多克隆抗体制备 被引量:3 2017年 为了获得检测禽流感病毒神经氨酸酶(NA)蛋白和非结构蛋白(NS1)的抗体,试验采用扩增NA、NA+、NS1和NS1+基因,连接原核表达载体p ET-32a进行原核表达,蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,获得NA、NA+、NS1和NS1+的多克隆抗体血清。结果表明:NA、NA+、NS1和NS1+多克隆抗体血清反应性良好,可以检测NA和NS1自身蛋白,且NA和NA+及NS1和NS1+多克隆抗体血清之间均具有良好的交叉反应。说明基因部分缺失对整个NA蛋白和NS1蛋白的抗原性影响不大。 吴艳菊 张治业 倪小舒 孟菲菲 秦涛 陈素娟 彭大新关键词:H5N1亚型 禽流感病毒 NA基因 NS1基因 原核表达 猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)的制备及对仔猪免疫效力的评价 被引量:3 2017年 运用不同佐剂,并配合不同剂型,制备猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗(YZ株),然后评价各疫苗对仔猪的免疫效力。制备的灭活疫苗包括:用10号白油制备油包水(W/O)剂型疫苗;用Montanide^(TM)ISA 206 VG佐剂制备水包油包水(W/O/W)剂型疫苗;分别用Montanide^(TM) ISA 15A VG和ISA 35 VG佐剂,制备水包油剂型(O/W)剂型疫苗;用Montanide^(TM) IMS 251C VG佐剂,制备水(W)剂型疫苗。除白油组外,其余4组疫苗安全性较好。5组疫苗免疫效力试验表明,ISA 206 VG(W/O/W)疫苗组首免后2周和3周PCV-2荧光抗体水平显著高于白油(W/O)和IMS 251C VG(W)疫苗组(P<0.05);攻毒后猪血清中病毒PCR检测,ISA 206 VG(W/O/W)疫苗组14 d均为阴性,其他免疫组21~28 d转为阴性;猪淋巴结免疫组化检测,ISA 206 VG(W/O/W)、ISA 15A VG(O/W)疫苗组均未出现PCV-2阳性,且该两组中仔猪均未出现连续2 d以上的高热症状。以上结果表明,ISA 206 VG(W/O/W)PCV2灭活疫苗(YZ株)对仔猪具有较好的免疫保护效力,可进行后续的临床扩大试验。 潘杰 范娟 刘俊斌 秦涛 陈素娟 彭大新关键词:猪圆环病毒2型 佐剂 灭活疫苗 免疫效力 生物被膜形成关键基因csgD对鼠伤寒沙门菌黏附侵袭上皮细胞能力的影响 2022年 为了探究生物被膜形成关键基因csgD与鼠伤寒沙门菌黏附侵袭上皮细胞能力的关系,本研究利用Red同源重组系统构建鼠伤寒沙门菌S025株csgD基因缺失株(S025ΔcsgD),利用原核表达载体构建回复株(S025ΔcsgDR);运用结晶紫染色定量、共聚焦显微镜和扫描电镜观察、平板表型鉴定等方法检测鼠伤寒沙门菌生物被膜形成能力,并比较野生株、缺失株和回复株黏附侵袭Caco-2细胞和HeLa细胞的差异。结晶紫染色定量、共聚焦显微镜和扫描电镜观察结果显示,与野生株S025和回复株S025ΔcsgDR相比,S025ΔcsgD生物被膜形成能力显著降低;生物被膜成分分析发现,野生株呈红色干燥粗糙型菌落,而S025ΔcsgD呈白色光滑型菌落,表明其卷曲菌毛和纤维素成分减少,回复株的菌落与野生株相似。黏附与侵袭试验结果显示,与野生株与回复株相比,S025ΔcsgD的黏附率和侵袭率显著降低。结果表明,生物被膜形成关键基因csgD在鼠伤寒沙门菌黏附和侵袭宿主上皮细胞方面发挥关键作用,这为进一步阐明生物被膜状态下的鼠伤寒沙门菌的致病机理奠定了理论基础。 张若楠 徐诺 陆游 冯政 陈素娟 秦涛 阴银燕 彭大新关键词:鼠伤寒沙门菌 生物被膜 2016 年~2018年华东地区家禽沙门菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:12 2020年 为了解华东地区家禽中沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2016年~2018年分别采集患病鸡、鸭、鹅和鸽的肝脏样品195份、67份、138份和37份,进行沙门菌的分离,结合多重PCR(mPCR)和血清凝集试验确定其血清型,利用药敏纸片法测定沙门菌分离株对21种常用抗生素的耐药性。结果显示,2016年、2017年和2018年沙门菌分离株的数量分别为78株、71株和84株,共233株,其中鼠伤寒沙门菌110株(47.21%),鸡白痢沙门菌82株(35.19%),肠炎沙门菌25株(10.73%),德尔卑沙门菌5株(2.14%),纽波特沙门菌3株(1.29%),都柏林沙门菌2株(0.86%),波斯坦沙门菌2株(0.86%),猪霍乱沙门菌孔成道夫生物型2株(0.86%),邦戈尔沙门菌1株(0.43%)和斯坦利沙门菌1株(0.43%)。来源分布显示,鸡源分离株以鸡白痢沙门菌为主,鸭源、鹅源和鸽源分离株均以鼠伤寒沙门菌为主。季度分布统计结果显示,每年第二季度和第三季度沙门菌的分离率较高,第一季度和第四季度沙门菌的分离率相对较低。药敏试验结果显示,对青霉素、苯唑西林、利福平和红霉素等耐药菌株占比均在85%以上;2018年的分离株对头孢西丁、四环素和复方新诺明耐药性显著增加;多重耐药菌株占比达91.42%。以上结果表明,华东地区家禽源沙门菌主要为鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌,多重耐药性严重,且对某些抗生素的耐药性显著增加,应予以持续监测。本研究为预防和控制沙门菌病的流行及传播提供参考依据。 仲艳 王希玉 李海宾 冯政 胡建乐 费中杰 杨铜 钱程 张凯云 刘岳龙 秦涛 陈素娟 陈素娟关键词:沙门菌 家禽 血清型 耐药性 16株新型H3N3亚型禽流感病毒的遗传变异分析 2024年 为了解新出现的H3N3亚型禽流感病毒(AIV)的遗传变异特征,对2022—2023年分离鉴定的H3亚型AIV进行了全基因组测序分析,并对代表株进行了抗原差异分析。结果共分离鉴定出15株家禽源和1株野鸟源H3N3亚型AIV。全基因遗传演化分析结果显示,16株分离株均属于欧亚分支,其HA基因均源自H3N8亚型AIV,与人源H3N8亚型AIV的核苷酸相似性为97.3%~99.2%;NA基因均源自H10N3亚型AIV,与人源H10N3亚型毒株的核苷酸相似性为98.1%~98.4%;内部基因片段均来自H9N2亚型AIV。分离株HA基因裂解位点均符合低致病性AIV的分子特征。分离毒株存在多个能增强病毒对哺乳动物适应性及致病性的突变位点,如PB2蛋白的A588V和E627V突变、PB1蛋白的I368V和S375N突变等。抗原差异性分析结果表明,分离株与华东地区早期流行株的HI抗体滴度相差1 log2~3 log2。因此,本研究分离的16株H3N3亚型AIV均为三源重组病毒,由H9N2亚型AIV提供全部内部基因,毒株存在多个哺乳动物适应性及致病性增强的突变,并已传播给野禽。本研究揭示了新型H3N3亚型AIV的遗传特征、变异和多宿主分布情况,为禽流感的防控提供理论支持。 赵康宁 杨忠龙 陈怡 朱春成 郭云飞 印云聪 秦涛 陈素娟 陈素娟关键词:禽流感病毒 基因变异 抗原变异