范红伟
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人腹膜间皮细胞对卵巢癌SKOV3细胞黏附、迁移和侵袭力的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨人腹膜间皮细胞(HPMC)对卵巢癌SK-OV3细胞黏附、迁移、侵袭力的影响及可能机制.方法:建立HPMC原代培养的方法;采用免疫细胞组织化学法鉴定原代HPMC;验证HPMC中部分细胞因子的表达;采用黏附、迁移及侵袭实验观察HPMC与卵巢癌SKOV3细胞相互作用时对SKOV3细胞转移力的影响,及其作用机制是否与CXCL12-CXCR4轴有关.结果:成功培养出了HPMC.鉴定分离出的细胞符合间皮细胞的特征.HPMC中表达CXCL12、间皮素,不表达CXCR4.SKOV3与HPMC共同培养组的吸光度、迁移和侵袭细胞数显著高于单独SKOV3培养组,差异有统计学意义(P<0.05).稳定高表达CXCR4的SKOV3细胞(SKOV3-CX-CR4-cDNA)与HPMC共同培养组的吸光度、迁移和侵袭的细胞数目显著高于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:HPMC与SKOV3细胞相互作用时,增强了SKOV3细胞黏附、迁移和侵袭力,其作用机制与CXCL12-CXCR4轴有关.
- 郭清吴小华范红伟吉向丽
- 关键词：SKOV3原代培养腹膜间质细胞
- 稳定表达趋化因子受体CXCR4卵巢癌细胞株的建立与鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:构建人CXCR4真核表达重组质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,建立稳定转染细胞系并观察其表达效果.方法:从人卵巢癌组织中提取RNA,采用RT-PCR技术扩增CXCR4的基因编码序列,将序列定向克隆至真核表达载体pReceiver-M02,经酶切和测序鉴定后用脂质体介导的转染技术将质粒pReceiver-M02-CXCR4导入不表达CXCR4蛋白的SKOV3细胞,经G418抗性筛选得到阳性细胞克隆并扩大培养成系.分别采用RT-PCR,Westernblot和免疫细胞化学方法检测稳定转染细胞株CXCR4mRNA和蛋白的表达.结果:得到了抗G418阳性细胞克隆;RT-PCR的产物约为304bp;Westernblot可见一清晰的蛋白条带,与CXCR4的蛋白分子质量相符合.免疫细胞化学结果显示,转染质粒的SKOV3细胞质和细胞膜出现棕黄色颗粒.结论:成功建立稳定表达趋化因子受体CXCR4的卵巢癌细胞株,为CXCR4在卵巢癌中的研究工作提供依据及平台.
- 郭清吉向丽吴小华范红伟
- 关键词：CXCR4SKOV3卵巢肿瘤转染
