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郭兴东
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1
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供职机构:
华中科技大学生命科学与技术学院资源生物学与生物技术研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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合作作者
邝美华
华中科技大学生命科学与技术学院...
王志伟
华中科技大学生命科学与技术学院...
付春华
华中科技大学生命科学与技术学院...
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华中科技大学生命科学与技术学院...
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华中科技大学生命科学与技术学院...
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1篇
2010
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DNA甲基转移酶RNAi干涉载体的构建及其鉴定
2010年
DNA甲基化(DNA Methylation)是真核生物基因组最常见的DNA共价修饰形式,影响蛋白质-DNA的相互作用,在基因表达的调控上起着重要作用。RNAi(RNA interference)干涉是关闭特定基因功能的新技术,在植物功能基因组、植物发育及生理代谢途径调控等方面有着广泛应用。本文根据植物DNA甲基转移酶(DNMTs)的保守序列设计引物,首先从拟南芥总基因组DNA中克隆出DNA甲基转移酶基因保守片段,然后以此保守片段为模板扩增长度约570bp的靶序列用于构建RNAi载体。根据RNAi作用机制,将570bp靶序列正向、反向连接到pHANNIBAL载体上,然后将带有此反向重复结构的完整ORF框连接到植物表达载体pGreeII上,经过酶切鉴定和测序分析证实DNA甲基转移酶RNAi重组表达载体构建成功。转化红豆杉细胞表明该干涉载体具有生物学功能,为研究受DNA甲基化调控的性状改良打下基础。
王志伟
于小青
郭兴东
邝美华
余龙江
栗茂腾
付春华
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RNAI
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