陈小美
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 刚地弓形虫硫氧还蛋白基因的克隆 表达及鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的克隆刚地弓形虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)基因,构建原核表达载体,通过诱导表达和纯化蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体。方法采用PCR技术扩增刚地弓形虫Trx基因,克隆至原核表达载体p ET-28a(+)中,转化大肠埃希菌(E.coli)Rosetta,用IPTG诱导目的蛋白表达,采用镍亲和层析法获得纯化蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体。利用Western blotting技术鉴定多克隆抗体的特异性。结果成功从刚地弓形虫c DNA中扩增出Trx目的基因,构建了Trx/p ET-28a(+)重组质粒,获得抗Trx重组蛋白的多克隆抗体。Western blotting技术检测出弓形虫Trx蛋白的特异性条带。结论用制备的兔抗Trx多克隆抗体能检测弓形虫Trx在速殖子内的表达,为进一步深入研究刚地弓形虫Trx功能奠定了基础。
- 张梓岗陈小美苏丹华刘原付涛端木家苗吴亮姜旭淦陈盛霞曹建平
- 关键词：刚地弓形虫硫氧还蛋白克隆原核表达多克隆抗体
