马艺飞
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2基因片段的克隆与原核表达被引量：1
- 2017年
- 为了研究毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2(SNF2)基因的功能,以提取的毒害艾美耳球虫子孢子总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增SNF2基因片段,克隆至pGEM-T-Easy载体,测序后构建pET30a-EnSNF2表达载体,转化大肠杆菌BL21,重组菌经测序鉴定后诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果显示:克隆的片段长822 bp,编码274个氨基酸;重组蛋白大小为36 ku左右,以包涵体形式为多,能被组氨酸(HIS)单抗特异性识别,表明该基因片段获得成功表达。研究结果为制备针对毒害艾美耳球虫SNF2的多抗和进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 马艺飞杜彩娟王乐乐刘丹丹许金俊陶建平
- 关键词：毒害艾美耳球虫
- 3株不同宿主源弓形虫分离株GRA7基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2017年
- 对分离于江苏地域的3株不同宿主源弓形虫YZ-1(ChineseⅠ基因型)、YZ-2(ChineseⅠ基因型)和KS(基因型Ⅰ型)分离株的GRA7基因的全长序列进行克隆与序列分析,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明:KS株的GRA7基因完整开放阅读框长711 bp,与RH参考株完全一致;YZ-1和YZ-2株GRA7基因序列均为708 bp,与KS株相比在290-292位点缺失3个碱基;氨基酸序列和抗原表位分析显示,YZ-1和YZ-2株的GRA7蛋白在97位缺失1个谷氨酸,但比KS和RH株多1个抗原表位。结果表明,GRA7基因可区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型虫株,ChineseⅠ型与Ⅱ型虫株的亲缘关系最近;ChineseⅠ型GRA7基因在290-292位点缺少3个碱基,其GRA7蛋白多1个抗原表位。
- 赵振兴侯照峰乐建铭刘丹丹黄杰宿世杰马艺飞李巧巧许金俊陶建平周永华
- 关键词：刚地弓形虫克隆
