杨小强
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
- 供职机构：南昌大学生命科学与食品工程学院更多>>
- 发文基金：江西省教育厅青年科学基金江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 腐食酪螨ISSR最佳反应体系的设计被引量：1
- 2011年
- 本文以腐食酪螨基因组DNA为模板,采用逐个参数优化法,探讨腐食酪螨ISSR实验的最佳反应体系。实验结果表明,腐食酪螨ISSR-PCR最佳反应体系:总体积25μL,其中Mg2+1.5 mM;10×Buffer 2.5 mM;dNTPs 0.2 mM;ISSR引物0.2μM;模板DNA 50 ng;Taq DNA聚合酶0.75 U。扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性1 min,(48℃、50℃、52℃)复性1 min,72℃延伸1.5 min,循环35次,结束后72℃延伸5 min,4℃保存。同时通过梯度退火实验,确定不同引物的最佳退火温度。
- 张素卿邹志文许睿杨小强夏斌
- 关键词：ISSR最佳反应体系
- 一种改进的Chelex-100法提取单头螨DNA被引量：11
- 2011年
- 提供了一种改进的Chelex-100法从单头螨中提取DNA,通过充分研磨以及反复冻融从单头螨得到的DNA可直接用于PCR。实验结果表明:与酚-氯仿法相比,此方法提取单头螨的DNA效果理想,操作简单,稳定性好;以3种不同类群螨为验证样,表明Chelex-100法可广泛用于各种螨的单头螨DNA提取;对于70%的酒精和奥氏螨保存液分别保存的个体,以及永久玻片标本,运用此方法均可提取出DNA,其中酒精保存标本提取效果最好;所提取的DNA在-20℃条件下可做长期保存。实验证明,改进的Chelex-100法是一种获取螨类等微小动物基因的较好方法。
- 邹志文张素卿辛天蓉杨小强杨登录夏斌
- 关键词：DNA提取PCR
