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2014—2016年广东省规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查被引量：6: 2018年; 【目的】研究广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行情况。【方法】2014—2016年共采集广东省各规模化猪场猪组织样品1 137份进行抗原检测,血清样品9 432份进行抗体检测。对不同年份、不同季度、不同区域的PRRSV抗原抗体检测情况进行比较分析,对分离的病毒进行遗传进化分析。【结果】2014、2015和2016年的PRRSV抗原阳性率分别为30.86%、34.35%、37.50%;抗体阳性率为82.86%、68.87%、74.56%。从季度分析来看,第1季度抗原阳性率最高,为40.27%;第2季度抗原阳性率最低,为28.66%;各季度抗体水平均在70%以上。不同区域间的PRRSV感染率差异明显,粤东粤西感染率显著低于珠三角和粤北;在抗体水平上,粤东地区较低,抗体阳性率为69.51%,其他3个区域均高于75%。抗原检测阳性的样品中共分离到69株PRRSV毒株,其中有39株位于Subgenotype I亚群。【结论】广东地区PRRSV抗原阳性率呈逐年上升趋势,抗体水平较高但并不稳定,从病毒分离结果看,Subgenotype Ⅰ亚群为省内主要流行亚群。; 冯松林邢秀琳陈耀汪志张桂红; 关键词：流行病学调查抗原检测抗体检测

猪流行性腹泻病毒COE蛋白原核表达及其反应原性的初步鉴定: 2016年; 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的优势抗原表位COE可溶性原核表达及其反应原性,试验采用RT-PCR方法扩增出COE基因,将其克隆至原核表达载体p MAL-C5X上,构建重组质粒p MAL-C5X-COE,经测序鉴定正确后转化Rosetta感受态细胞,并进行IPTG诱导表达和Westernblot验证。结果表明:重组菌p MAL-C5X-COE表达的融合蛋白MBP-COE的分子质量约为57 ku,优化的诱导条件为IPTG浓度0.8 mmol/L、诱导时间4 h,诱导温度30℃,重组蛋白以可溶性蛋白形式存在于菌体中,融合蛋白与兔抗PEDV多克隆抗血清发生特异的免疫印迹反应。说明原核表达的COE融合蛋白可溶且具有良好的反应原性。; 孙彦阔汪志冯嘉萍石庆伟罗勇峰秦锋白小磊张桂红; 关键词：S基因逆转录PCR

CVN重组蛋白体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究: 本研究以Genebank中蓝藻抗病毒蛋白N(CVN)基因序列(DQ668406.1)为基础,合成CVN基因,构建表达质粒pMAL-c5x-CVN,通过优化诱导条件,表达出可溶性CVN重组蛋白.利用cck8试剂盒检测CVN...; 韦应芳冀池海汪志孙彦阔刘乙兴李琪邢秀琳蔡孟楷冯松林韩晓亮朱棣华黄俊王衡张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征细胞毒性抗病毒作用

2011—2014年江西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学调查被引量：1: 2016年; 为了研究江西地区2011—2014年猪繁殖与呼吸综合征的流行情况,收集江西11个市的2475份猪血清样本,采用ELISA试剂盒检测血清中的PRRSV抗体水平。在2475份血清中选取8份(每年份2个)通过RT-PCR的方法扩增ORF5序列,克隆、测序后,用DNAstar和Mega5.0软件对所得序列进行遗传进化分析。结果表明,2011—2014年江西省11个市猪蓝耳病免疫抗体水平较高;所选取8份血清均为阳性,检测的PRRSV毒株均属于美洲型毒株,均为高致病性毒株,各毒株间核苷酸同源性为96.4%-99.3%,与PRRSV高致病性变异毒株的同源性最高,表明2011—2014年流行的PRRSV可能为猪高致病性蓝耳变异毒株。; 江松泽汪志师东方张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征遗传进化分析血清学调查 ORF5基因分子流行病学

葛根连芩提取液对猪繁殖与呼吸综合征病毒体外作用的研究被引量：5: 2017年; 为了探索葛根连芩提取液体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,在Marc-145细胞上进行相关抗病毒试验。在药物对Marc-145细胞的安全浓度范围内,通过细胞病变效应(CPE)来评价药物对PRRSV体外的抑制作用和阻断作用。结果显示,葛根连芩提取液对PRRSV有明显的体外阻断作用,而对PRRSV没有体外抑制作用。; 汪志孙彦阔孙彦阔冯松林陈耀刘乙兴冯松林王少君张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征细胞病变效应 MARC-145细胞

CVN重组蛋白体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究被引量：2: 2018年; 本研究以Gen Bank中蓝藻抗病毒蛋白N（CVN）基因序列（DQ668406.1）为基础,合成CVN基因,构建表达质粒pMAL-c5x-CVN,通过优化诱导条件,表达出可溶性CVN重组蛋白。利用cck8试剂盒检测CVN重组蛋白对Marc-145细胞的毒性,并在安全浓度范围内进行了抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）试验。在PRRSV感染Marc-145细胞的吸附、穿入和复制三个阶段进行检测,探究CVN体外抗PRRSV的作用效果。各阶段的病毒TCID50检测、间接免疫荧光试验以及qPCR测定结果表明,CVN在PRRSV感染宿主细胞过程中的入侵阶段发挥阻断作用,而在病毒吸附细胞和在细胞内复制的阶段没有抑制效果。本研究为新型抗PRRSV药物的研发奠定了试验基础。; 韦应芳冀池海汪志盛金良盛金良孙彦阔李琪蔡孟楷王衡张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒效应间接免疫荧光试验

2011-2015年华南地区规模化猪场3种病毒性传染病流行病学调查被引量：13: 2018年; 本试验对2011-2015年华南地区各规模化猪场进行了猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型等3种疾病的流行病学调查。利用RT—PCR方法分别华南地区猪场采集的3529份组织样品进行病原检测，利用ELISA方法对93667份血清样品进行抗体检测。检测结果表明，2011—2015年，CSFV抗体阳性率则出现上升的趋势，由2011年的68．22％上升至2015年的85．47％，病原阳性率在2013年处于较低水平，在2014年和2015年呈现较大幅度增长，分别为30．41％和42．63％；PRV抗体阳性率均保持90％以上，PRV-gI病原检测阳性率在2014年和2015年呈下降趋势，分别为23．53％和13．25％；PCV2抗体阳性率趋于平稳。; 汪志陈耀陈耀白小磊孙彦阔冯嘉萍白小磊张桂红; 关键词：猪瘟病毒圆环病毒2型

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汪志