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王佳: 作品数：16 被引量：49H指数：4; 供职机构：华中农业大学食品科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学文化科学更多>>

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以食品安全与监测课程为例构建线上教学体系: 2021年; 2020年春季学期为了保障师生的生命安全,教育部提出“停课不停教、停课不停学”。保证教学质量,稳步推进线上教学成了这学期的重要任务。文章结合食品安全与监测课程的特点,采取以学生为主体的教学理念,构建了该门课程的线上教学体系,包括教学过程、教学方式以及考核评价指标。; 王佳王小红; 关键词：线上教学课程体系教学过程

沙门菌噬菌体T139基因组分析及其裂解酶LysT40的异源表达和活性鉴定被引量：2: 2021年; 为开发噬菌体裂解酶作为一种新型的抗菌剂,用于沙门菌的防控,采用生物信息学及异源表达蛋白的方法,获得鼠伤寒沙门菌噬菌体T139的裂解酶,并验证裂解酶对鼠伤寒沙门菌的裂解活性。通过对鼠伤寒沙门菌噬菌体T139基因组进行分析,发现该基因组全长38854 bp,平均GC含量为49.10%,不包含tRNA基因。进化树分析表明噬菌体T139属于T7噬菌体属,共预测出43个ORFs,有23个被赋予已知功能。多序列比对及保守结构域分析表明,orf 40基因编码的蛋白(LysT40)包含126个氨基酸残基,具有内肽酶保守结构域,为可能的噬菌体裂解酶。LysT40二级结构中存在大量的螺旋结构(70.63%),使得该蛋白能够保持结构稳定。将orf 40进行异源表达、纯化,经过SDS-PAGE和Western blot分析,在10~15 ku处获得单一目标蛋白条带,纯化的蛋白质量浓度为280μg/mL。LysT40在30 min内对氯仿或EDTA预处理的鼠伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,吸光值OD600相比于对照组分别下降0.18和0.31。; 丁一峰聂若男朱文娟王吉王佳王小红; 关键词：鼠伤寒沙门菌基因组分析表达纯化食源性致病菌

抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析: 2017年; 【目的】克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据。【方法】以抗AFB1单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以(Gly4Ser)3为柔性接头(Linker)拼接构建抗AFB1 scFv基因,并采用在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列、理化性质及蛋白结构进行分析预测。【结果】抗AFB1 scFv基因全长744 bp,编码248个氨基酸,分子量为26312.05 Da,理论等电点(pI)5.70,其二级结构中含有35个α-螺旋(占14.11%)、28个β-折叠(占11.29%)、85个延伸链(占34.28%)和100个随机卷曲(占40.32%),在三级结构中连接肽卷曲将VH和VL区域牵拉而相互靠近,形成典型的抗体结构——沟槽结构,是scFv的抗原结合区域。【结论】构建的抗AFB1 scFv其VH含有117个氨基酸、VL含有116个氨基酸,具备典型抗体结构——沟槽结构,能与抗原特异性结合。; 马兰刘爱平王佳王小红

沙门氏菌噬菌体LPST144尾纤维gp38的序列分析及其结合活性被引量：1: 2021年; 对1株沙门氏菌短尾噬菌体LPST144的尾纤维进行序列结构分析和表达纯化,成功验证其尾纤维基因orf38表达产物gp38的特异性受体结合活性,从而得到一个潜在的沙门氏菌检测探针。首先采用生物信息学的方法分析LPST144噬菌体尾纤维gp38的氨基酸序列、理化性质、遗传进化关系和C末端二级结构,结果表明:LPST144的尾纤维包含646个氨基酸残基,N端具有2个保守结构域,且与T7噬菌体相似度较高;而C末端序列差异极大,存在大量的β-折叠结构,与T7噬菌体尾纤维C末端二级结构类似。gp38具有噬菌体受体结合蛋白的多个特点:具有模块化的性质、序列相似性低且C末端富含β-折叠结构。进一步将尾纤维基因orf38进行异源表达、纯化,采用全菌包被的酶联免疫吸附法检测其特异性结合宿主鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311的能力,结果表明实验组的吸光度为0.94±0.02,阴性对照组吸光度为0.17±0.01,对宿主菌具有较强的结合能力;且gp38重组蛋白与实验中受试的其他6株不同血清型的沙门氏菌均能结合;采用大肠杆菌T10、沙门氏菌外膜蛋白、金黄色葡萄球菌6538及磷酸盐缓冲液代替宿主菌作为对照,吸光度分别为0.58±0.03、0.56±0.01、0.59±0.03和0.53±0.005,实验组与对照组结果具有显著差异,表明尾纤维gp38具有特异性结合宿主鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311以及实验中其他受试沙门氏菌的能力。本研究可为开发基于噬菌体受体结合蛋白为分子探针建立沙门氏菌检测方法奠定实验基础。; 杨其乐丁一峰张宇聂若男李亚萌王佳王小红; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌表达纯化

生菜表面肠炎沙门氏菌(ATCC13076)的吸附及其清除被引量：1: 2019年; 为了控制生鲜蔬菜上沙门氏菌的污染,本研究以肠炎沙门氏菌(ATCC13076)为研究对象,探索了其在生菜表面吸附的影响因素,同时比对了含氯消毒剂和裂解噬菌体对生菜上粘附沙门氏菌的清除效果。结果表明:随着温度的升高(4~32℃)和作用时间的延长(5~60 min),肠炎沙门氏菌在生菜表面的吸附量呈增加趋势(3.59~5.20 log cfu/cm^2)。用10 mg/mL次氯酸钠处理受污染的生菜,在作用2 h时达到最大清除量(3.83 log cfu/cm^2),随着作用时间的延长(0~48 h)清除量呈不断下降的趋势;而噬菌体随着感染复数MOI值的增加(0.1、1、10)与作用时间的延长(0~48 h),对肠炎沙门氏菌的清除量逐渐增加,在4℃和24℃时,对肠炎沙门氏菌的最高清除量分别为1.75 log cfu/cm^2和1.80 log cfu/cm^2。因此,肠炎沙门氏菌在生菜上的吸附量受到温度、作用时间和pH的影响,与含氯消毒剂相比,噬菌体可以安全有效的清除生菜上沙门氏菌。本研究可以为食源性病原微生物在生鲜蔬菜中的清除提供理论支撑与技术指导。; 姚蓝马文娟李晚宁王佳王小红; 关键词：肠炎沙门氏菌生菜噬菌体次氯酸钠

1株裂解性短尾沙门氏菌噬菌体T139的生物学特性及其对牛奶和牛肉的抑菌作用被引量：14: 2019年; 采用双层平板的方法以鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 13311)为宿主菌,从污水中分离得到1株裂解性噬菌体,命名为T139,研究其生物学特性及其在牛奶和牛肉样品中的抑菌作用。结果表明:噬菌体T139的噬菌斑透亮清晰;能裂解宿主菌及其他沙门氏菌,为宽宿主谱;电镜观察噬菌体T139属于短尾噬菌体科,头部直径为(43±1)nm,尾部长(11±0.6)nm;最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.001;最佳吸附速率为66%;一步生长曲线结果显示潜伏期为5 min,爆发期为60 min,平均裂解量为54.54 PFU/cell;在30~50℃和pH 4~12条件下稳定且对体外培养的鼠伤寒沙门氏菌有良好的裂解效果。噬菌体T139对牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的抑菌效果为:在4℃无显著效果,在25℃条件下MOI=10和MOI=100时抑菌效果极其显著,宿主菌数量分别下降4.32(lg(CFU/mL))和4.27(lg(CFU/mL));噬菌体T139对牛肉中鼠伤寒沙门氏菌的抑菌效果为:在4℃条件下,MOI=10时无显著效果,在MOI=100时宿主菌数量下降0.66(lg(CFU/mL)),在25℃条件下MOI=10和MOI=100时宿主菌数量分别下降了0.77(lg(CFU/mL))和1.16(lg(CFU/mL)),表明噬菌体T139对牛奶和牛肉中鼠伤寒沙门氏菌有良好抑制作用。; 聂若男李晚宁杨其乐王小红王佳; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌生物学特性抑菌效果

羟丙基-β-环糊精-姜黄素包合物的制备及其光动力杀灭沙门氏菌的机制被引量：1: 2024年; 沙门氏菌是国内外引起人类食源性疾病最主要的食源性致病菌之一,开发新型有效的抗菌技术对保障食品安全至关重要。本研究利用羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的包合作用,包合姜黄素(Curcumin,CUR)作为光敏剂,研究其介导光动力技术(Photodynamic Inactivation Technology,PDI)对食品样品中鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028的杀菌效果及作用机制。设置乙醇浓度为40%、HP-β-CD与CUR摩尔比为2:1,在45℃条件下包合4 h时,所形成的CUR包合率最大,为60.08%,该包合物经结构表征后测定其水溶性显著(P<0.05)提高,达到3.98×10^(3)μg/mL。结果表明,当包合物质量浓度(以CUR浓度计)为20µg/mL,初始鼠伤寒沙门氏菌菌落数量级为106 CFU/mL时,LED蓝光(450 nm)照射40 min可使菌落数减少3.73 lg(CFU/mL),可杀灭47.92%~64.40%的耐药沙门氏菌,并且对即食生菜中的沙门氏菌也有一定的控制作用。在光动力技术处理后,沙门氏菌胞内产生了较高水平的活性氧,胞内容物明显减少,推测CUR-HP-β-CD介导的PDI可能通过破坏细胞膜结构达到杀菌抑菌的目的。本研究将光动力杀菌技术应用于食品安全领域,这为食品工业中防治沙门氏菌等食源性致病菌的污染提供了重要的理论基础和技术支撑。; 鲍悦忻陈艳红马钰黄晶晶王佳; 关键词：姜黄素羟丙基-Β-环糊精沙门氏菌杀菌机理

具有α-淀粉酶分泌活性而低产氨基甲酸乙酯的酵母菌构建: 2018年; 为了构建可利用淀粉而低产氨基甲酸乙酯的酵母菌株,通过构建分别含ADH1和ADH2启动子的α-淀粉酶表达载体p ADH1/alp1和p ADH2/alp1,并将其分别转入精氨酸酶基因缺失的酵母菌株SΔcar1中。在此基础上,分析比较其在固态和液态条件下产α-淀粉酶的能力以及葡萄糖对α-淀粉酶表达的影响。结果表明:可利用淀粉而低产氨基甲酸乙酯的黄酒酵母SΔcar1/A1和SΔcar1/A2已成功构建。SΔcar1/A1在固体和液体培养基中产生淀粉酶时,都需要葡萄糖的诱导,且随着培养基中葡萄糖浓度的增加,酶的表达量增加。SΔcar1/A2在两种培养基中产生淀粉酶时,不需葡萄糖诱导,但SΔcar1/A2α-淀粉酶表达受葡萄糖的反馈抑制,低浓度的葡萄糖会促进α-淀粉酶的产生,过高的葡萄糖浓度使其α-淀粉酶的表达量减少,但是在含葡萄糖的培养基中的产酶量要比在不含葡萄糖的培养基上的高。总体而言,SΔcar1/A2产α-淀粉酶和水解淀粉的能力比SΔcar1/A1的强。因此,SΔcar1/A2可被用于生料发酵,但对其在实际生产中的产酶、催化和发酵条件等则有待进一步研究。; 王佳王佳陈福生陈福生; 关键词：Α-淀粉酶酿酒酵母氨基甲酸乙酯

噬菌体对鸡肉表面耐药沙门氏菌的抑制作用被引量：5: 2021年; 目的探究裂解性噬菌体对鸡肉表面耐药沙门氏菌的抑制效果。方法以实验室前期筛选得到的沙门氏菌噬菌体D1-2和Pu20为研究材料,采用单独使用和1:1混合的方式对生鸡胸肉表面多重耐药沙门氏菌的抑制效果进行研究。结果与单一噬菌体相比,噬菌体混合制剂对生鸡胸肉表面多重耐药沙门氏菌抑菌效果更显著。在4℃时,采用感染复数(multiplicity of infection MOI)值为10000的噬菌体混合制剂,其对肠炎沙门氏菌11561的抑菌效率达到98%,且可以完全抑制鼠伤寒沙门氏菌SJTUF13277。结论该方法对鸡肉表面沙门氏菌的抑制作用显著,可为噬菌体控制耐药沙门氏菌提供实验数据与理论基础。; 丁一峰李昀怡毕一兵周婉晨王小红王佳; 关键词：沙门氏菌噬菌体抑菌效果

以科学研究促进本科教学的探索与研究——以食品科学与工程专业为例被引量：4: 2018年; 以食品科学与工程专业为例,介绍了几种科研活动与课堂教学相结合的讲授方式,包括开设相关专业课程、科研进展与成果讲述、以学生为主体、开放实验室、开设学术沙龙等,提高科研在本科教育教学中的比重,提高本科生培养质量。; 王佳王小红张秀艳; 关键词：本科教学课堂教学食品科学与工程

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