王飞
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 降钙素基因相关肽通过Hippo通路调控小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究被引量：9
- 2016年
- 目的前期研究发现降钙素基因相关肽(CGRP)能够促进成骨细胞的生物学活性,为了进一步揭示CGRP在骨修复中的作用,检测CGRP对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响,并对Hippo通路在这个过程中的作用进行了初步探讨。方法在体外诱导培养的BMSCs中加入不同浓度的CGRP,处理48 h后测试碱性磷酸酶(ALP)活性,以筛选的优势浓度;处理7 d后进行茜素红染色,分别检测细胞的分化情况。应用Western blot检测CGRP作用于BMSCs后,Hippo通路核心分子Mst1/2蛋白磷酸化的表达水平;利用Hippo通路抑制剂维替泊芬(Verteporfin)阻断下游Yap信号,逆转录聚合酶链反应检测其对成骨相关因子Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达影响。结果 ALP活性检测结果显示,与空白对照组相比,10^(-9)、10^(-8)、10^(-7) mol·L^(-1)浓度范围的CGRP都能显著促进小鼠ALP活性的增加(P<0.05),以10^(-8) mol·L^(-1)浓度的CGRP为最佳刺激浓度。用10^(-8) mol·L^(-1)浓度的CGRP处理后,茜素红染色显示钙化结节明显增多。CGRP能够显著上调p-Mst1/2蛋白的表达(P<0.05);当运用了抑制剂Verteporfin时,显著降低了CGRP诱导的Runx2、ColⅠmRNA的表达(P<0.05)。结论 CGRP能够促进小鼠BMSCs的成骨分化,且Hippo信号通路介导了CGRP作用于小鼠BMSCs成骨分化的过程。
- 王飞张慧宇窦予昕李适廷张纲谭颖徽
- 关键词：降钙素基因相关肽骨髓间充质干细胞
- Runx2和Osx在修复性牙本质形成过程中的表达模式被引量：3
- 2016年
- 目的:观察Runx2和Osx在牙髓损伤后表达模式的变化。方法:取雄性SD大鼠24只随机抽取4只不作任何处理,用于正常对照;其余20只分别以双侧下颌第一磨牙为对象建立牙髓损伤模型。分别于建模后0、3、12 h和3、7 d各时间点从牙髓损伤组中各随机抽取4只大鼠,并取其双侧下颌第一磨牙标本制作组织切片;然后采用HE染色法观察各组修复性牙本质的形成情况,并采用免疫荧光染色法检测Runx2、Osx、DSPP的表达模式。结果:HE染色显示,损伤后7 d,在损伤下方可见明显的修复性牙本质形成。免疫荧光染色显示,Runx2、Osx和DSPP主要表达于损伤下方,其中Runx2的表达呈"抛物线"趋势,即损伤后3 d时表达最为强烈(P<0.05),此后逐渐下降;Osx和DSPP的表达均呈逐渐上调的趋势,Osx的表达在损伤后7 d时上调最为明显(P<0.05),而DSPP的表达则在损伤后3 d时即显著增强并持续至损伤后7 d(P<0.05)。结论:Runx2、Osx和DSPP在牙髓损伤后的不同时期具有不同的表达模式。
- 窦予昕王飞孔涛冯玉玲李适廷谭颖徽
- 关键词：RUNX2OSXDSPP牙髓细胞修复性牙本质
- 降钙素基因相关肽对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用研究
- 2016年
- 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤的保护作用及其潜在机制。方法 1)构建细胞氧化损伤模型,将实验分为4组,H_2O_2组使用含不同浓度(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 mol·L^(-1))H_2O_2的培养液,CGRP+H_2O_2组使用含不同浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol·L^(-1))CGRP的培养液预处理后再加入含10-4 mol·L^(-1) H_2O_2的培养液,对照组为常规培养液,空白组不接种细胞。培养12、24、36、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖活性,筛选最佳建模浓度和CGRP对成骨细胞氧化损伤的最佳保护浓度。2)采用含10-4 mol·L^(-1) H_2O_2(H_2O_2组)、10-8 mol·L^(-1) CGRP(CGRP组)的培养液和10-8 mol·L^(-1) CGRP+10-4 mol·L^(-1) H_2O_2培养液(CGRP+H_2O_2组)、常规培养液(对照组)培养成骨细胞,测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性、活性氧(ROS)的含量以及炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的水平。结果 1)在10-4 mol·L^(-1) H_2O_2时细胞增殖开始出现抑制(P<0.01),并呈浓度和时间依赖性;10-8 mol·L^(-1) CGRP预处理后细胞增殖活性最高,与只加入10-4 mol·L^(-1) H_2O_2有统计学差异(P<0.01)。2)与H_2O_2组相比,CGRP+H_2O_2组SOD活性升高(P<0.01),TNF-α、IL^(-1)β、IL-6水平降低(P<0.05),ROS含量降低(P<0.01)。结论 H_2O_2会对MC3T3-E1成骨细胞造成氧化损伤,CGRP对MC3T3-E1成骨细胞氧化损伤具有保护作用。
- 郭俊峰张慧宇张纲安洋杨阳王飞谭颖徽
- 关键词：降钙素基因相关肽成骨细胞超氧化物歧化酶活性氧
