陆晓敏
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 吞噬细胞的磷脂酰丝氨酸外翻与其血清依赖的调理作用的关系
- 2015年
- 目的:探讨外周血中单核吞噬细胞的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻与其血清依赖的调理作用之间的关系,为探索生理微环境对于吞噬细胞功能的影响奠定基础.方法:基于Ficoll-paque密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经过PBS充分洗涤之后利用含有和不含血清的RPMI 1640培养基处理细胞,一定时间之后利用Annexin V染色检测血清处理前后PS外翻的情况;通过比色法检测胞膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,以考察脂质过氧化产物对Annexin V检测结果的影响;通过anti-CD3、anti-CD56、antiHLA-DR等不同的表面分子抗体染色,利用流式分析PBMC中不同细胞群的PS外翻情况;利用表达绿色荧光蛋白的细菌与PBMC共孵育,通过流式细胞术检测细胞的吞噬能力.结果:流式分析表明PBMC经血清处理后PS+细胞比例明显升高,并且这种升高发生在血清短暂的处理之后;血清处理对于细胞膜MDA的含量没有显著影响,排除了脂质过氧化对PS检测的影响;针对PBMC的细胞表型分析表明HLA-DR+单核吞噬细胞是PBMC中对血清处理敏感的主要细胞亚群,其在血清处理后Annexin V+细胞中的比例有显著的增加(P<0.05);细菌吞噬实验表明外翻的PS参与了血清诱导的调理作用.结论:吞噬细胞PS外翻是血清依赖的,并且这种外翻的PS参与了对细菌的调理作用.
- 陈辉邵红伟陆晓敏何免沈晗吴凤麟王辉黄树林
- 关键词：吞噬细胞磷脂酰丝氨酸外翻
- 不同培养环境对PMBC中Treg和Th17细胞分化的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:研究不同培养环境对调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)和Th17细胞分化的影响,探索能够逆转肿瘤微环境诱导的免疫耐受的手段。方法:克隆人白介素-6(IL-6)的基因,将其转入表达TGF-β的肿瘤细胞株中,并筛选稳转系;分别收集含或不含IL-6的肿瘤细胞培养上清,制备成条件培养基(Conditioned medium,CM),用于体外培养人外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),流式检测PBMC在不同培养环境中Treg和Th17细胞的变化情况。结果:RTPCR分析表明BEL-7402表达TGF-β的水平明显高于Hep G2,因此选择BEL-7402用于制备IL-6的稳转系;ELISA检测结果表明所制备的稳转系能够有效地表达IL-6;流式结果表明,由肿瘤细胞培养上清制备的CM能明显诱导T细胞分化为Treg,而在IL-6存在的情况下则能明显抑制Treg细胞的形成,并促进T细胞分化为Th17细胞。结论:肿瘤细胞培养上清促使PBMC中Treg比例增加;而在其中添加IL-6则能够降低Treg细胞比例,并增加Th17细胞的比例。
- 邵红伟杨海林梁春梅陆晓敏刘婷沈晗吴凤麟黄树林
- 关键词：TH17白介素-6条件培养基
