丁伟
- 作品数:5 被引量:13H指数:2
- 供职机构:安徽农业大学园艺学院果树学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家梨产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 杜梨硝酸盐转运酶NRT2基因的克隆与生物信息学分析
- 2017年
- [目的]克隆杜梨硝酸盐高亲和性转运酶NRT2基因。[方法]以杜梨叶片为试验材料,采用CTAB法提取总RNA,反转录成c DNA,运用3'-RACE和5'-RACE技术,克隆获得杜梨硝酸盐转运酶NRT2基因的全长,并运用生物信息学技术对硝酸盐转运酶NRT2基因进行了分析。[结果]杜梨硝酸盐转运NRT2基因c DNA全长为1 422 bp,可编码473个氨基酸,分子式为C2346H3631N589O637S26,相对分子质量为51 112.7,等电点(p I)为7.03。[结论]该试验为进一步研究梨氮素代谢提供了基础资料。
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- 关键词:杜梨克隆
- 我国梨产区灌溉水pH及矿质营养元素分析被引量:1
- 2017年
- 为研究我国梨产区灌溉水矿质元素含量,以国家梨产业技术体系14个试验站78个灌溉水样品为试材,测定了pH、NH_4^+、NO_2^-、NO_3^-、PO_4^(3-)、K^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)、SO_4^(2-)、Fe、Mn、Cu、Zn和B的含量,并对其分布规律及相关性进行了分析。结果表明,灌溉水pH平均值为7.74,pH大于7.5以上碱性水占供试样品的75.64%。参照GB5084-2005对农田灌溉水质的规定,灌溉水pH有4个样品不符合要求;在选择性控制项目中,灌溉水B含量有5个样品不符合要求。灌溉水中pH值与Cu呈极显著负相关。NO_3^-与Ca^(2+);K^+与Ca^(2+)、Mg^(2+)、SO_4^(2-);Ca^(2+)与Mg^(2+)、SO_4^(2-);Mg^(2+)与SO_4^(2-)都呈极显著正相关。
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- 关键词:灌溉水PH矿质元素
- ‘砀山酥梨’叶片中Fer2基因的克隆与表达分析被引量:2
- 2013年
- 分别以轻度、中度和重度缺铁的‘砀山酥梨’叶片cDNA为模板,正常叶片为对照,运用RACE技术,克隆Fer2基因的cDNA全长为1 052 bp,编码区828 bp,编码276个氨基酸。采用Protparam、InterProScan和ProtFun 2.2 Server等生物学信息软件分析蛋白质理化性质和结构域特征,结果表明:Fer2与‘翠冠’梨叶片的Fer2蛋白和Fer4蛋白等具有较高的相似性,故命名该基因为PbFer2。推测蛋白质相对分子质量为3 054.3,理论等电点为5.80。通过Real-time PCR技术,分析PbFer2基因表达量,结果表明:轻度缺铁会提高PbFer2的表达量,随着缺铁程度的增加,PbFer2表达量显著下降。
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- 关键词:砀山酥梨缺铁克隆
- 砀山酥梨不同程度缺铁叶片生长素抑制蛋白基因表达分析被引量:7
- 2013年
- 以‘砀山酥梨’为材料,采用酶联免疫分析法(ELISA),测定叶片中内源IAA的含量。依据已构建的缺铁叶片SSH文库中生长素抑制蛋白(ARP)基因片段的序列信息,应用RACE技术克隆其cDNA全长,通过实时荧光定量(qRT-PCR)技术,分析ARP基因的相对表达量。结果表明:(1)ARP基因cDNA全长为707bp,其中开放阅读框为351bp,编码116个氨基酸,推测的蛋白质分子量为12.82kD;该蛋白可能定位于微体,属于非分泌型、非跨膜蛋白类,并具有ARP基因家族的保守结构域。(2)在不同程度缺铁叶片中ARP基因的表达量存在差异,随着缺铁程度的增加,表达量显著升高,同时叶片中内源IAA含量逐渐降低。据此推测,ARP基因可能负反馈调节缺铁黄化叶片中IAA的水平,从而调控叶片的生长发育。
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- 关键词:砀山酥梨IAA
- 缺铁胁迫对梨叶片中GA信号转导相关基因的影响被引量:4
- 2015年
- 以不同程度缺铁的‘砀山酥梨’组培苗为实验材料,应用ELISA法测定叶片中内源GA含量,并依据NCBI上GA氧化酶GA2ox同源基因的保守序列,采用RACE技术克隆其基因全长,从梨基因组数据库中比对获得GA受体GID1的4个等位基因和DELLA蛋白的4个等位基因,通过实时RT-PCR分析GA2ox基因和GID1的4个等位基因和DELLA蛋白的4个等位基因的相对表达量,以探讨缺铁对梨叶片GA含量及其信号转导相关基因表达的影响。结果表明:(1)梨叶片中GA含量随着其缺铁程度的加重而增加。(2)克隆出梨叶片中GA2ox基因,其cDNA全长为1 014bp(GenBank登录号为KJ008976)。(3)GA2ox基因的表达量并未随梨缺铁程度增加而上升;GA受体GID1的4个等位基因相对表达量均随梨缺铁程度的加重而增加,其相对表达量与GA含量呈正相关关系;在DELLA蛋白的4个等位基因中,仅DELLA1相对表达量随着梨缺铁程度的加重而逐渐增加,说明DELLA1对缺铁胁迫最敏感。推测梨缺铁诱导了GA合成,但并没有促进活性GA向无活性GA转化。
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- 关键词:赤霉素