张冬艳 作品数:8 被引量:17 H指数:2 供职机构: 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控RND3促进肝癌细胞增殖 被引量:7 2014年 目的检测MicroRNA-128a(miR-128a)在肝细胞癌中的表达情况并探讨其在肝癌细胞中的生物学功能及机制。方法收集19例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-128a在肝细胞癌和对应癌旁组织及肝癌细胞株中的表达;应用miR-128a mimics或inhibitor转染人肝癌细胞,MTT检测转染后细胞增殖活力变化;软件预测miR-128a的潜在靶点RND3,并用双荧光素酶报告实验证实miR-128a与RND3 3'UTR结合,qRT-PCR和Western blot检测miR-128a潜在靶点RND3的表达变化;Western blot检测细胞周期蛋白变化。结果在肝细胞癌组织中miR-128a的表达显著高于对应的癌旁组织(P<0.05);miR-128a促进肝癌细胞增殖(P<0.05);在肝癌细胞中miR-128a通过与RND3 3'URT结合下调RND3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05);抑制miR-128a的表达可以导致cyclin B1、cyclin D1和CDK4表达下调。结论 miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控RND3促进肝癌细胞增殖。 郭学军 曹传辉 孙景苑 张冬艳 刘莉 吴德华关键词:肝细胞癌 细胞增殖 泛癌分析长链非编码RNAMIR22HG的表达特征 被引量:1 2022年 目的泛癌分析长链非编码RNA(lncRNA)MIR22HG的表达及其与临床特征的关系。方法R语言分析癌症基因组图谱(TCGA)中MIR22HG在不同肿瘤组织中的表达及其与临床分期、淋巴结转移、肿瘤突变负荷(TMB)及微卫星不稳定(MSI)的关系;应用TIMER比较MIR22HG表达与免疫浸润的关系;使用cBioPortal分析MIR22HG的突变频率及其与预后的关系;使用GDSC在线数据库分析MIR22HG与化疗药物敏感性的关系。利用GEO数据库肝癌数据集和12对肝癌标本验证MIR22HG在肝癌中的表达及其与索拉非尼治疗反应的关系;分析MIR22HG表达与索拉非尼治疗预后的关系;在肝癌细胞株HCC-LM3中过表达MIR22HG(NC组,MIR22HG过表达组),在肝癌细胞株MHCC-97H中敲除MIR22HG(NC组,sh-MIR22HG组),采用CCK-8检测肝癌细胞中MIR22HG对索拉非尼IC_(50)的影响。结果MIR22HG在大多数肿瘤中低表达(P<0.05),且多数肿瘤中MIR22HG基因存在缺失突变,其突变与肿瘤不良预后相关(P<0.05)。MIR22HG的表达水平与多种肿瘤的临床分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。在多种肿瘤中MIR22HG的表达水平与TBM、MSI、免疫评分、免疫检查点相关基因表达及化疗药的药物敏感性显著相关(P<0.05)。6种常见免疫细胞中,中性粒细胞浸润水平与MIR22HG的表达水平相关性最强,尤其在乳腺癌、直肠癌及肾乳头状细胞癌中明显。多个数据集的分析结果验证MIR22HG在肝癌中低表达,且其低表达与肝癌进展相关(P<0.05)。MIR22HG低表达的患者经索拉非尼治疗后预后较好(HR=2.94,P=0.075),其低表达能有效预测肝癌患者索拉非尼治疗效果(AUC=0.8095)。过表达MIR22HG能降低肝癌细胞对索拉非尼的敏感性(IC_(50 NC) vs IC_(50 MIR22HG)=7.731 vs 15.61);而敲除MIR22HG的表达则能增加肝癌细胞对索拉非尼的敏感性(IC_(50 NC) vs IC50sh-MIR22HG=7.986 vs 5.085)。结论MIR22HG的表达与多种肿瘤的分期、有否淋巴结转移、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定、� 王惠 黎雯雯 张冬艳关键词:长链非编码RNA 肝癌 索拉非尼 SLC1A5通过促进M2型巨噬细胞极化促进肝癌进展 2025年 目的探讨SLC1A5高表达在泛癌种的临床意义及其促进肝癌进展的机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)、国际肿瘤基因组协会(ICGC)等数据库探讨SLC1A5在泛癌种的表达水平及其与临床分期、淋巴结转移及生存预后的关系;利用EPIC、CIBERSORT、TIMER算法分析SLC1A5与免疫细胞浸润的关系,分析SLC1A5联合M2型巨噬细胞浸润水平与肿瘤预后的关系。利用慢病毒过表达系统构建过表达SLC1A5肝癌细胞株;利用小干扰RNA(siRNA)构建沉默SLC1A5(NC组、si-SLC1A5-1组、si-SLC1A5-2组)的肝癌细胞株;CCK-8增殖实验检测SLC1A5对肝癌细胞增殖的影响;利用过表达SLCA5稳转株(NC组,SLC1A5过表达组)构建肝癌皮下瘤模型,体内水平探讨SLC1A5对肝癌增殖的影响;利用共培养体系验证干扰和过表达SLC1A5肝癌细胞对巨噬细胞极化的影响。结果SLC1A5主要定位于细胞膜上,SLC1A5在大多数肿瘤中均显著高表达(P<0.05),其表达水平与临床分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05);SLC1A5高表达与多癌种不良预后相关(P<0.05)。在13个癌种中显示SLC1A5与免疫评分呈正相关,二者相关性在低级别胶质瘤(LGG)、肝癌(LIHC)及甲状腺癌(THCA)中最显著(P<0.05)。多癌种显示SLC1A5与巨噬细胞浸润水平呈正相关(P<0.05),该相关性在LGG及LIHC中最显著;而在包括肺鳞癌、胰腺癌、胃癌在内的5种肿瘤中,二者呈负相关(P<0.05)。生存分析发现SLC1A5高表达且M2型巨噬细胞高浸润水平的患者生存预后最差(P<0.05);SLC1A5与免疫抑制相关基因、细胞因子及细胞因子受体表达呈正相关,该相关性在LGG、LIHC中最显著(P<0.05)。不同肝癌细胞株均高表达SLC1A5,过表达SLC1A5促进肝癌细胞增殖,干扰SLC1A5则抑制肝癌细胞增殖;体内实验验证过表达SLC1A5促进肝癌增殖。SLC1A5与M2型巨噬细胞极化分子标志物表达呈正相关,过表达SLC1A5促进M2型巨噬细胞极化并抑制T细胞分泌IFN-γ。结论SLC1A5与多种肿� 邹金华 王惠 张冬艳关键词:M2型巨噬细胞 肝癌 增殖 长链非编码RNA UPK1A-AS1通过稳定HIF-1α的表达促进肝癌细胞的糖酵解 被引量:9 2021年 目的探讨长链非编码RNA UPK1A-AS1对肝癌细胞糖酵解的影响及其分子机制。方法通过慢病毒过表达系统构建UPK1A-AS1稳定过表达组(UPK1A-AS1)和慢病毒阴性对照组肝癌细胞株,两组细胞均分别置于常氧(21%O2)及乏氧(1%O2)条件下培养24 h,获得不同氧气条件下的UPK1A-AS1过表达组和阴性对照组肝癌细胞,利用葡萄糖及乳酸试剂盒检测过表达UPK1A-AS1对肝癌细胞糖酵解的影响。利用qRT-PCR法检测糖酵解相关基因HIF1A、GLUT1、HK1、HK2及PGK1的表达,采用双荧光素酶报告实验检测过表达UPK1A-AS1对HRE活性的影响。用放线菌酮处理肝癌细胞,检测过表达UPK1A-AS1对HIF-1α蛋白质稳定性的影响。利用泛素化蛋白质免疫共沉淀法明确UPK1A-AS1对HIF-1α蛋白泛素化修饰的影响。将肝癌细胞分为对照组、UPK1A-AS1稳定过表达组(UPK1A-AS1)、HIF-1α敲除组(si-HIF-1α)、UPK1A-AS1稳定过表达联合HIF-1α敲除组(UPK1A-AS1+si-HIF-1α),检测在过表达UPK1A-AS1的基础上干扰HIF-1α的表达后,肝癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成,HRE活性和糖酵解相关基因HK1、HK2及PGK1的表达情况,明确UPK1A-AS1是否通过上调HIF-1α的表达促进肝癌细胞的糖酵解水平。结果与对照组相比,不论在常氧还是乏氧的条件下,过表达UPK1A-AS1均能促进肝癌细胞葡萄糖的消耗水平,并促进肝癌细胞生成乳酸,差异具有统计学意义(P<0.05);过表达UPK1A-AS1能明显上调糖酵解相关基因HIF1A、GLUT1、HK1、HK2及PGK1的表达,且过表达UPK1A-AS1能促进HRE的转录活性(P<0.05);Western blot显示,过表达UPK1A-AS1能增加HIF-1α蛋白的稳定性,并显著减少HIF-1α的泛素化修饰。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,敲除HIF-1α能逆转过表达UPK1A-AS1对葡萄糖消耗及乳酸生成的促进作用(P<0.05);干扰HIF-1α能恢复过表达UPK1A-AS1对HRE活性的上调作用。结论长链非编码RNA UPK1A-AS1通过稳定HIF-1α的表达上调糖酵解相关基因的表达,进 张冬艳 邹雪晶 宋旸 吴德华关键词:肝癌 糖酵解 HIF-1Α 一种lncRNA UPK1A-AS1的抗体及其制备方法与应用 本发明公开了一种lncRNAUPK1A‑AS1的抗体及其制备方法与应用,涉及基因工程技术领域。该免疫原包括:氨基酸序列如SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.2所示的多肽。该免疫原用于免疫动物制备得到的抗体,能... 张冬艳 吴德华 邹雪晶 宋旸 张雅璇双氢麦角胺在制备抗肿瘤药物中的应用 本发明属于药物技术领域,公开了双氢麦角胺在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明首次公开了双氢麦角胺和/或其衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用,双氢麦角胺和/或其衍生物可以显著抑制肿瘤组织的增殖,并且对给药动物的体重无显著影响,同时... 邹雪晶 刘莉 宋旸 张冬艳 刘珊珊 段志娇 黎雯雯UPK1A-AS1抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用 本发明属于药物技术领域,公开了UPK1A‑AS1抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明首次公开了UPK1A‑AS1抑制剂或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用,这是基于发明人发现抑制UPK1A‑AS1表达和/或活性... 张冬艳 吴德华 刘莉 邹雪晶 宋旸 张雅璇UPK1A-AS1抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用 本发明属于药物技术领域,公开了UPK1A‑AS1抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明首次公开了UPK1A‑AS1抑制剂或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用,这是基于发明人发现抑制UPK1A‑AS1表达和/或活性... 张冬艳 吴德华 刘莉 邹雪晶 宋旸 张雅璇