张明辉
- 作品数：10 被引量：44H指数：4
- 供职机构：上海市水产研究所(上海市水产技术推广站)更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鳜源致病性荧光假单胞菌的分离与鉴定被引量：12
- 2014年
- 为确定导致鳜(Siniperca chuatsi)细菌性感染死亡的病原,从患病濒死的鳜肝中分离出一株优势菌B01,经人工回感实验确定分离菌的致病性,并利用VITEK-2全自动微生物鉴定仪及16S rRNA序列分析对纯培养细菌进行鉴定。此外,对分离的菌株进行药敏实验。研究结果表明,菌株B01对鳜鱼具有致病性。经VITEK-2全自动微生物鉴定仪鉴定菌株B01为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),并在紫外光下可以产生荧光。进一步的16S rRNA基因序列和系统发育分析表明,该菌与荧光假单胞菌同源性达到了97%以上。药物敏感性实验结果显示,该分离株对恩诺沙星、诺氟沙星、链霉素和四环素等6种药物高度敏感。
- 安伟肖雨高晓华张明辉张崇文邵玲何正侃
- 关键词：荧光假单胞菌细菌性疾病
- 鱼类新型口服疫苗的研究概况被引量：5
- 2015年
- 水产养殖业的发展与水生病害的防治密切相关,传统鱼病的防治多使用抗生素及减毒灭活疫苗。随着新技术和新方法等交叉学科的应用,尤其是近年来分子免疫学和基因工程技术的发展,鱼类疫苗也得到了快速发展。口服免疫比传统注射和浸泡免疫快捷方便,为理想的免疫方式。文章主要围绕口服疫苗的来源不同,对鱼类口服疫苗的新技术及新方法的国内外研究进展作一综述。
- 安伟肖雨张明辉何正侃
- 关键词：口服疫苗免疫
- 13种中药对荧光假单胞菌的体外抑菌效果被引量：4
- 2016年
- 【目的】探讨13种中药对荧光假单胞菌（Pseudamonas fluoroscens）的体外抑菌效果,为其在鱼类赤皮病防治实践中的应用提供参考依据。【方法】采用平板打孔法检测荧光假单胞菌对13种中药提取液的敏感性,用二倍稀释法测定不同中药对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并选择抑菌效果最佳的中药为试验药物,进一步研究不同质量浓度和静置时间对中药杀灭荧光假单胞菌效果的影响。【结果】荧光假单胞菌对乌梅、大黄高度敏感,对芦根、黄柏、青皮、车前草、熟地黄、地榆等中度敏感,对柴胡、决明子、贯众、麦冬、青蒿等不敏感。不同中药提取液对荧光假单胞菌的体外抑菌效果排序为：乌梅〉大黄〉熟地黄=地榆〉车前草〉黄柏〉芦根=青皮,其中以乌梅的杀菌作用最强,MIC和MBC分别为7.813和15.625 mg/m L。随质量浓度的增加,乌梅提取液对荧光假单胞菌杀灭效果不断增强,14.00~18.00 mg/m L的乌梅提取液能迅速杀灭病原菌,且静置32 h后仍具有较强的药效作用。【结论】乌梅提取液对荧光假单胞菌的抑菌效果最佳,在14.00~18.00 mg/m L的条件下能够快速杀灭病原菌,在实际生产中可适当加大使用剂量,充分发挥其迅速有效的治疗效果。
- 高晓华肖雨张明辉安伟何正侃邵玲张海强
- 关键词：中药荧光假单胞菌抑菌效果
- 上海地区9株鱼源病原菌的耐药性监测与分析被引量：1
- 2016年
- 为了解上海地区鱼源病原菌对主要抗菌药物的耐药现状,合理、规范地使用抗菌药物治疗鱼类细菌性疾病,运用K-B纸片法研究了上海地区的9株鱼源病原菌对28种抗菌药物的耐药性,并用PCR法分析了病原菌携带喹诺酮类gyrA、qnrA、qnrS耐药基因情况。结果显示,9株病原菌对青霉素类、磺胺类、红霉素及链霉素高度耐药;对氯霉素、头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素的敏感率为100.0%;对氟苯尼考、头孢氨苄、卡那霉素、阿米卡星、阿奇霉素、四环素类、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、呋喃妥因的敏感率为88.9%;对新霉素、恩诺沙星、诺氟沙星的敏感率为77.8%。根据渔药使用标准,可将庆大霉素、氟苯尼考、多西环素、新霉素、诺氟沙星等作为治疗首选药物。9株病原菌中,gyrA基因检出率为66.7%,qnrS基因检出率为22.2%,未检测到qnrA基因,显示上海地区鱼源病原菌对喹诺酮类药物已在基因水平呈现出一定程度的耐药性。
- 张明辉肖雨张海强安伟高晓华
- 关键词：病原菌抗生素耐药性喹诺酮耐药基因
- 荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护效应
- 2016年
- 为探讨荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护作用,为其在赤皮病防治上的应用提供理论依据,以福尔马林灭活的荧光假单胞菌(Pseudamonas fluoroscens)全菌疫苗、菌体外膜蛋白(OMP)疫苗作为免疫原,以平均体重100.0g±15.0g的健康异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为试验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度分别为1.0×108/mL、0.2mg/mL)免疫,剂量为0.2mL/尾,对照组注射等量灭菌生理盐水。分别在免疫注射1、2、4、7、14、21、28、35d后对试验鱼尾静脉采血,进行外周血细胞计数、吞噬活性和抗体效价的测定。结果2种免疫原均可诱导异育银鲫外周血液红细胞、白细胞数量增加,吞噬细胞的吞噬活性和血清抗体效价均升高。免疫注射35d后活菌攻毒,福尔马林灭活荧光假单胞菌苗(F-PF)组的免疫保护率为61.1%,OMP组的免疫保护率为72.2%,OMP组的免疫保护效果优于F-PF组。证明2种免疫原均通过促进异育银鲫血细胞增殖,产生特异性抗体的方式提高机体的免疫保护力。
- 高晓华肖雨张明辉安伟邵玲何正侃
- 关键词：异育银鲫荧光假单胞菌外膜蛋白免疫保护
- 孔雀石绿浸泡几种鱼类受精卵及苗种后的降解规律研究被引量：2
- 2012年
- 为研究孔雀石绿在几种鱼类受精卵、苗种体内的降解规律,用孔雀石绿溶液对受精卵和苗种进行浸泡处理,然后检测显性孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿的残留量。试验结果:用10.0 mg.L-1的孔雀石绿浸泡异育银鲫、团头鲂的受精卵10 min,至仔鱼孵出后第31、45 d,在两者中均未检出显性孔雀石绿(检出限为O.5μg/kg);至第45 d,两者中均未检出隐性孔雀石绿。用10.0 mg/L的孔雀石绿分别浸泡异育银鲫的鱼苗、鱼种10、25 min,至浸泡后第10、11周,在两者中均未检出显性孔雀石绿;至第16、38周,两者中均未检出隐性孔雀石绿。用1.0 mg/L的孔雀石绿浸泡黄颡鱼鱼种30 min,至浸泡后第12周,未检出显性孔雀石绿;但至第52周,隐性孔雀石绿仍有5.34μg/kg的残留量。结果表明,在水产动物体内,隐性孔雀石绿的降解速度要明显慢于显性孔雀石绿。
- 张明辉肖雨何正侃黄德凤戚隽渊黄清发孙建华张崇文
- 关键词：孔雀石绿异育银鲫团头鲂黄颡鱼降解
- 一株鲤春病毒血症病毒的初步分离及鉴定被引量：2
- 2014年
- 为了检测上海市某鲤鱼养殖场的疑似患病鲤鱼是否携带鲤春病毒血症病毒(SVCV),采用鲤鱼表皮瘤细胞系(EPC)进行病毒分离和分子PCR方法对SVCV的糖蛋白基因保守区域进行扩增。试验结果:被病毒感染的EPC细胞呈现细胞圆缩、颗粒增多、大量脱落等病变特征,且该株病毒毒力较强,其病毒滴度TCID50/0.1 mL为105.76。分子方法扩增出714 bp和606 bp的SVCV的保守片段。试验采用细胞培养技术和分子PCR方法检测样品是否携带病毒性病原,建立了一种较为简捷高效的检测方法。该方法适合在短时间内完成大量样品的病原学诊断及检疫任务,具有良好的应用前景。
- 安伟肖雨张崇文张明辉何正侃
- 关键词：细胞分离PCR检测
- 鲤春病毒血症病毒SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：6
- 2015年
- 为建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的SVCV N蛋白基因的保守性序列设计并合成特异性引物,建立了该病毒的SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数为0.99,在102拷贝/μL^109拷贝/μL范围内具有良好的线性关系。该方法对传染性脾肾坏死病毒、草鱼呼肠孤病毒、传染性皮下及组织坏死病毒和白斑综合征病毒其他水生动物病毒核酸扩增结果均为阴性,特异性强;该方法对SVCV检测下限为100.76 TCID50/m L,比常规PCR灵敏100倍;批内和批间的变异系数均小于7.6%,重复性好。本研究建立的荧光定量RT-PCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好,对SVCV的快速检测及定量检测具有重要意义。
- 安伟肖雨张明辉高晓华何正侃
- 关键词：鲤春病毒血症病毒SYBR荧光定量RT-PCRN基因
- 海洋生物活性物质的研究进展被引量：10
- 2007年
- 主要从海洋生物毒素、生理活性物质、生物功能材料等三个方面综述了海洋生物活性物质在工业、农业、医药、食品、环保等众多领域的研究进展,展望了今后海洋生物活性物质的研究方向及前景。
- 张明辉
- 关键词：生物毒素生理活性物质生物功能材料
- 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2014年
- 为了建立检测鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的方法,本研究根据GenBank中ISKNV MCP基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,建立了该病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果表明,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数为0.994,具有良好的线性关系,检测下限为20拷贝/μL,是常规PCR的1 000倍;特异性强,只有ISKNV呈阳性,而与流行性造血器官坏死病毒、鲤春病毒血症病毒和草鱼呼肠孤病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间的变异系数均小于0.7%。本研究建立的ISKNV TaqMan荧光定量PCR方法对ISKNV的快速检测及定量检测具有重要意义。
- 安伟肖雨张崇文张明辉何正侃
- 关键词：鳜鱼传染性脾肾坏死病毒
