张洁
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 3种氨肽酶基因在大肠杆菌中的重组表达与比较研究被引量：4
- 2013年
- PCR扩增Bacillus licheniformis14580、Bacillus subtilis168、Geobacillus stearothermophilusIFO12589氨肽酶基因,分别酶切连接表达质粒pET-28a,构建重组表达载体pET28a-BLAP、pET28a-BSAP、pET28a-GSAP,酶活力检测表明3个氨肽酶基因均在大肠杆菌宿主BL21（DE3）中获得重组表达。进一步对3株重组菌的氨肽酶粗酶液反应条件进行比较研究,结果表明：重组氨肽酶BSAP与GSAP的粗酶活较高,达到1500U/L以上;BLAP、BSAP、GSAP粗酶的最适酶反应温度分别为50、75、60℃,BSAP温度稳定性最好,在30-70℃时比较稳定;3种重组氨肽酶的最适pH值都是9.0,pH值在8.5-9.0时比较稳定;0.lmmol/L Co2＋对酶活有较强的激活作用,BSAP的相对酶活力最高达到195.6%,其他二价金属离子对酶活均有不同程度的抑制,其中Zn2＋抑制作用最大;重组质粒pET28a-BSAP、pET28a-GSAP在大肠杆菌中较pET28a-BLAP稳定。
- 张洁张梁黄武宁石贵阳
- 关键词：氨肽酶酶反应
