周家伟
- 作品数：29 被引量：16H指数：3
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- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 雷公藤焦磷酸合酶TwCPS4及其制备松香烷型二萜化合物的应用
- 一种新的雷公藤柯巴基焦磷酸合酶TwCPS4及其编码基因，TwCPS4在诱导初期雷公藤二萜化合物的合成过程中起重要作用。催化实验表明TwCPS4与丹参SmKSL1联合使用，能够以GGPP为底物合成松香烷型二萜前体，证实了T...
- 高伟黄璐琦苏平周家伟
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- 雷公藤三萜合酶TwOSC1及其编码基因与应用
- 本发明涉及一种雷公藤三萜合酶TwOSC1蛋白及其编码基因，将Twosc1基因的cDNA克隆到真核表达载体pYES2，构建带有Twosc1基因的重组表达载体，转入酵母表达宿主菌，可生产得到一些三萜类化合物，如木栓酮、香树素...
- 高伟周家伟胡添源
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- TwHMGR过表达对雷公藤甲素和雷公藤红素生物合成的影响被引量：7
- 2018年
- 雷公藤3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(Tripterygium wilfordii 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase,Tw HMGR,Gen Bank:ALU11310.1 3)是MVA途径中的第一个限速酶,是细胞质中萜类代谢途径中的重要调控位点。为探讨Tw HMGR对雷公藤甲素和雷公藤红素生物合成的影响,对其进行了过表达研究。利用Gateway技术将Tw HMGR的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)构建到过表达载体中,通过基因枪介导过表达载体转入雷公藤悬浮细胞。q RT-PCR结果显示Tw HMGR的基因相对表达量在过表达组显著提高,是空载体组基因相对表达量的1.75倍;UPLC结果显示雷公藤甲素及雷公藤红素含量在过表达组中分别提高为空载组的163.93%和190.04%。本实验中Tw HMGR在雷公藤悬浮细胞中成功过表达,表现为基因相对表达量的上升和雷公藤甲素及雷公藤红素含量的上调,证明了Tw HMGR在雷公藤萜类成分生物合成途径上的正向调节作用,为雷公藤重要活性萜类成分的合成生物学研究奠定了基础。
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- 关键词：过表达雷公藤甲素雷公藤红素基因枪
- 雷公藤TwKS与TwCPS3在制备贝壳杉烷型二萜化合物中的应用
- 本发明涉及雷公藤柯巴基焦磷酸合酶TwCPS3和雷公藤贝壳杉烯合酶TwKS在制备贝壳杉烷型二萜中的应用。通过对雷公藤柯巴基焦磷酸合酶基因TwCPS3和雷公藤贝壳杉烯合酶基因TwKS进行重组表达，在重组蛋白的催化下，成功的以...
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- 雷公藤倍半萜合酶TwNES及其编码基因与应用
- 本发明公开了雷公藤倍半萜合酶TwNES及其编码基因与应用。本发明从雷公藤悬浮细胞中克隆得到Twnes基因。该基因是首次从雷公藤中得到的倍半萜类成分合成的关键酶基因。通过实验证明：本发明的TwNES蛋白既能够催化FPP形成...
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- 一种雷公藤原生质体的分离及瞬时转化方法
- 本发明公开了一种雷公藤原生质体的分离及瞬时转化方法。通过实验证明：利用本发明的分离方法得到的原生质体的产量为4.24×10<Sup>5</Sup>/g FW，活力为94.5％，通过PEG4000介导转化的方法成功将外源质...
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- 雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析被引量：2
- 2017年
- 贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程。该文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长c DNA序列,并进行生物信息学分析;使用实时定量PCR(qRT-PCR)研究基因的诱导表达水平。克隆得到Tw KAO长度为1 874 bp,编码487个氨基酸,蛋白相对分子质量56.02 k Da,理论等电点8.89;经茉莉酸甲酯(Me JA)诱导后,Tw KAO基因相对表达量在12 h达到峰值;经植株组织表达分析证实,Tw KAO基因在雷公藤的叶中表达量最高,根中最低。该研究首次克隆得到雷公藤KAO基因,并分析其mRNA表达特征,为深入研究雷公藤生长发育以及萜类活性成分次生代谢研究奠定基础。
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- 关键词：雷公藤克隆生物信息学分析
- 雷公藤二萜合酶TwCPS1在制备松香烷型二萜化合物中的应用
- 一种雷公藤二萜合酶基因Twcps1在催化合成二萜化合物中的应用，通过原核表达的雷公藤二萜合酶TwCPS1与丹参SmKSL1联合使用，以GGPP为底物合成松香烷型二萜前体，证实了TwCPS1为雷公藤二萜类次生代谢途径中一个...
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- 雷公藤磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶基因全长克隆及表达分析
- 根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计引物,对雷公藤悬浮细胞磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase,PTEN)...
- 周家伟刘雨佳胡添源高伟黄璐琦
- 关键词：雷公藤克隆生物信息学分析
- 雷公藤焦磷酸合酶TwCPS4及其制备松香烷型二萜化合物的应用
- 一种新的雷公藤柯巴基焦磷酸合酶TwCPS4及其编码基因，TwCPS4在诱导初期雷公藤二萜化合物的合成过程中起重要作用。催化实验表明TwCPS4与丹参SmKSL1联合使用，能够以GGPP为底物合成松香烷型二萜前体，证实了T...
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