朱枫
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：重庆工学院化学与生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠p75NTR荧光真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的:构建大鼠p75神经营养素受体(p75neurotrophin receptor,p75NTR)cDNA序列的绿色荧光真核表达载体并鉴定其在人胚肾293(human embryo kidney 293,HEK293)细胞中的表达。方法:采用PCR方法从含野生型大鼠p75NTR的pDC316-RP75质粒中扩增目的片段,经EcoRI和SalI双酶切,定向克隆于pEGFP-N1质粒中,构建绿色荧光真核表达载体pEGFP-N1-RP75,经酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,激光共聚焦及免疫组织化学法鉴定大鼠p75NTR的表达。结果:重组质粒经酶切鉴定和序列分析证实含有大鼠p75NTR的编码序列,转染后经激光共聚焦显微镜及免疫组织化学染色观察表明重组质粒能够在HEK293细胞中表达出具有活性的大鼠p75NTR片段。结论:大鼠p75NTR绿色荧光真核表达载体构建成功并可在HEK293细胞中表达,为进一步研究奠定了基础。
- 王永堂鲁秀敏朱枫曾琳龙在云伍亚民
- 关键词：荧光HEK293细胞
- 人p75NTR荧光真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
- 2008年
- 构建了人p75神经营养素受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)cDNA序列的绿色荧光真核表达载体,并鉴定其在人胚肾293(human embryo kidney 293,HEK293)细胞中的表达.采用PCR方法从含人p75NTR的pDC316-HP75质粒中扩增目的片段,经EcoRI和SalI双酶切,定向克隆于pEGFP-N1质粒中,构建绿色荧光真核表达载体pEGFP-N1-HP75,经酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,激光共聚焦及Western blot法鉴定人p75NTR的表达.结果表明,酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有人p75NTR编码序列,转染实验表明,重组质粒能够在HEK293细胞中表达出具有活性的人p75NTR片段.
- 鲁秀敏朱枫黄鹏余瑛王永堂
- 关键词：荧光HEK293细胞
- 中枢神经再生抑制因子及免疫治疗研究被引量：5
- 2008年
- 成体哺乳动物中枢神经损伤后早期轴突再生失败的一个主要原因是由于髓磷脂抑制分子的存在。Nogo、髓磷脂相关糖蛋白以及少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白等神经再生抑制因子的发现,大大促进了中枢神经再生分子机制的研究。它们均能独立通过Nogo-66受体产生对轴突再生的抑制效应,髓磷脂抑制分子及其信号转导机制的研究日益成为中枢神经再生的研究热点,髓磷脂及其信号转导分子特别是Nogo-66受体、p75神经营养素受体成为损伤后促进轴突再生、抑制生长锥塌陷的主要治疗靶点。抑制上述抑制因子及相关受体NgR或p75NTR可能有助于中枢神经损伤的修复,围绕这些抑制因子及其相关受体介导的信号转导途径,人们提出了多种治疗中枢神经损伤的新思路,其中免疫学方法尤其受到关注。
- 朱枫鲁秀敏王永堂
- 关键词：中枢神经脊髓损伤免疫治疗
