李元
- 作品数：15 被引量：42H指数：4
- 供职机构：陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 三聚氰胺偶联抗原制备及其免疫原性分析被引量：1
- 2015年
- 探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗原特性分析,证明半抗原Mel-ACS的转化效率达到了85.9%,且针对Mel特异性单抗获得率达到了42.9%,抗原BSA-ACS-Mel免疫原性较好,完全可以适用于三聚氰胺分子的特异性检测需要。这对其余小分子抗原的合成也起到一定的指导作用。
- 赵彭花张海祥李涛王鑫宋卫刘海静谢毅霍雪萍赵向绒梁导艳李元胡军
- 关键词：三聚氰胺抗原免疫原性
- Toll样受体4的活化抑制人表皮原代黑素细胞的黑素合成被引量：2
- 2016年
- 目的探讨黑素细胞Toll样受体4(TLR4)的活化对黑素细胞黑素合成的影响。方法以原代培养的黑素细胞为研究对象,采用TLR4的激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,首先检测黑素含量的变化,其次用实时定量PCR和Western blot法检测前黑素体蛋白(Pmel17)、酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)的表达变化;最后用电镜观察黑素小体的变化。结果 LPS刺激细胞后,黑素含量明显减少,黑素合成相关蛋白Pmel17和TYR的表达降低,且这种变化依赖于MITF转录因子的调控,同时电镜结果显示黑素小体合成被抑制。结论 TLR4的活化降低黑素细胞的黑素合成,提示细菌的产物可以通过天然免疫影响黑素合成。
- 孙丽君孙晶莹霍雪萍李亚萍李元谢鑫胡军
- 关键词：TOLL样受体4黑素细胞黑素合成
- 胰高血糖素样肽-1与受体相互作用研究进展被引量：4
- 2010年
- 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)具有促胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、刺激胰岛β细胞的增殖和分化、抑制β细胞凋亡、抑制胃排空等作用,近年来成为治疗糖尿病药物研究中的热点。GLP-1与受体的相互作用一直备受关注,我们从4个方面对GLP-1与受体相互作用的研究进行了综述:GLP-1的二级结构、GLP-1单个残基改变及残基间的相互作用、GLP-1不同残基片段对GLP-1结合并激活受体的影响和GLP-1受体的相互作用模式。
- 聂新华张涛郑学仿李元曹洪玉唐乾
- 关键词：胰高血糖素样肽-1受体相互作用
- 运用单克隆抗体分析流感病毒H1亚型HA蛋白的抗原表位被引量：6
- 2012年
- 目的对甲型流感病毒H1亚型血凝素蛋白的抗原表位进行分析。方法以前期获得的97株抗H1亚型HA抗原的单克隆抗体为研究工具,用间接ELISA方法对不同亚型的血凝素抗原进行反应,将H1亚型HA蛋白的抗原表位进行粗分类,用ELISA阻断试验对抗原表位进行细分类。选取两类抗原表位的抗体,通过计算机模拟分析抗体与抗原结合的结构域,推测抗体结合的具体氨基酸位点。结果根据抗体的交叉反应性不同,将流感病毒H1亚型的HA的抗原表位分为8类;根据ELISA阻断试验的初步结果,H1亚型HA抗原的抗原表位又被细分为15类,通过计算机模拟分析预测的抗体与流感病毒HA抗原结合的氨基酸位点结果与ELISA阻断试验结果相吻合。结论证明流感病毒H1N1亚型HA抗原上至少含有15个抗原表位,且通过ELISA阻断试验和计算机模拟分析得到了相互印证,为流感病毒血凝素HA抗原表位预测方法的完善及通用疫苗的研制提供了实验数据。
- 李慧瑾郭春艳赵彭花赵彭花李研李研李元高锦伟
- 关键词：流感病毒抗原表位
- His标签单克隆抗体的制备及交叉抗原的表位分析被引量：7
- 2016年
- 目的研究His标签对重组蛋白在疫苗、免疫和致病等方面的影响。方法制备His标签的单克隆抗体(m Ab),通过ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色方法研究其生物学特性、免疫反应特性以及与人体组织的反应性。结果 His标签m Ab和抗原的结合与空间构型有关,多数抗His标签m Ab可以与血红蛋白结合,亦可与人体多种正常组织反应。结论带His标签的重组蛋白进行体内实验时可刺激机体产生抗His标签的抗体,该抗体可与血红蛋白及人体正常组织结合而影响重组蛋白的后期研究。
- 赵向绒张海祥刘杨王鑫王光华齐宗利李元胡军
- 关键词：重组蛋白单克隆抗体空间构型
- 噬菌体文库与计算机模拟筛选H1N1流感病毒血凝素结合位点的比较被引量：1
- 2018年
- 目的:对H1N1流感病毒血凝素HA的抗原表位初步筛选。方法:用噬菌体展示文库对2株抗体的结合位点进行筛选,将筛选的抗原位点结合HA序列进行多肽合成,免疫小鼠制备单克隆抗体,通过分子生物学手段对4株抗体的轻链和重链可变区基因进行调取,通过计算机模拟抗体序列结合的抗原的结构域,推测抗体结合的氨基酸位点。结果:噬菌体文库筛选得出抗体的结合序列富含组氨酸和精氨酸,将针对多肽的单克隆抗体的序列和前期获得的2株抗HA单克隆抗体的序列比对分析,发现A1-8和anti-14p结合的HA抗原序列相一致,H1-13和anti-11p结合的HA抗原序列相一致。结论:通过将噬菌体展示文库技术和计算机模拟预测抗原抗体结合,可以有效筛选抗原表位,为流感病毒HA抗原表位预测方法的完善提供理论基础。
- 李慧瑾连媛媛孙丽君孙晶莹李元胡军曹慧玲
- 关键词：H1N1流感病毒血凝素
- 甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链可变区基因的巢式PCR扩增及序列分析
- 2013年
- 目的:采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链基因进行扩增,对获得的基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因的通用方法。方法:设计22对扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因的引物,对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布的鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程的假基因,并且得到的单克隆抗体的氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因的通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体的可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体的结合位点提供了实验数据。
- 李慧瑾李研孙晶莹高锦伟赵向绒封青谭天天胡巧侠李元胡军
- 关键词：甲型H1N1流感病毒可变区巢式PCR
- 多肽结构与功能相互关系的研究进展被引量：3
- 2009年
- 多肽在生物体内具有多种重要的生理功能,涉及激素、神经和细胞因子、免疫和生殖等多个领域。多肽的构象决定其功能,针对多肽的构象与功能之间关系的研究日趋重要。多肽构象与功能相互关系的研究方法也成为研究的热点。
- 聂新华张涛李元唐乾郑学仿
- 关键词：多肽相互作用
- 肉及肉制品动物源成分联合检测方法建立及应用被引量：1
- 2017年
- 目的建立肉及肉制品中6种动物源成分的联合检测方法,并对西安市场的肉制品掺假情况进行调查分析。方法设计猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅6种动物源成分的特异性引物,建立实时荧光PCR联合检测方法,对该方法的特异性和灵敏度进行验证,并用此方法检测西安市场上的肉制品。结果本研究建立的肉制品联合检测方法的特异性为100%,灵敏度可达1%,其检测50份样本,与标注成分不符的共有19份,占总样本的38%。结论成功建立了6种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法,可应用于肉和肉制品的掺假检测。
- 孙丽君张海祥舒静孙晶莹郭华齐宗利李元胡军
- 关键词：肉制品掺假
- 三株交叉反应性的流感病毒HA抗体与H1N1流感病毒的致病机制分析
- 2019年
- 目的:结合临床甲型流感病例分析流感病毒可能的致病机理。方法:收集87份陕西省2009年甲型H1N1流感重症,危重症及死亡病例的血常规参数,对其淋巴细胞、红细胞和血小板三个指标分析。制备针对甲型H1N1的单克隆抗体,采用抗体亚类鉴定试剂盒分析其抗体轻链和重链的亚型,通过血凝活性实验检测三株抗体的血凝抑制活性,通过ELISA检测三株抗体与人和小鼠的血红蛋白、红细胞、白细胞膜和血小板膜的反应,通过免疫组化分析三株流感病毒抗体与正常小鼠肺组织的结合。结果:流感病毒感染后的死亡病例中淋巴细胞、红细胞和血小板均明显降低。三株抗体与人和小鼠的淋巴细胞、红细胞和血小板均有不同程度的交叉反应;免疫组化结果同时也证实三株HA抗体与小鼠的肺组织有不同的结合力。结论:流感病毒致病的原因可能与流感病毒感染机体后产生的抗体可与血液和组织中的成分结合有关。
- 李慧瑾李慧瑾孙丽君孙晶莹赵向绒梁导艳李元
- 关键词：H1N1流感病毒血凝素
