李林蔚
- 作品数:7 被引量:28H指数:4
- 供职机构:郑州大学人民医院更多>>
- 发文基金:郑州市科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 自噬基因Beclin-1通过食管癌相关基因4通路影响A549肺癌细胞自噬和凋亡被引量:4
- 2016年
- 目的探讨自噬基因Beclin-1表达沉默对A549肺癌细胞自噬和凋亡的影响以及其作用机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)和Westernblot的方法分别检测转染后各组A549肺癌细胞Beclin-1mRNA和蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法检测各组A549细胞生长增殖;单丹磺酰戊二胺(MDC)法检测各组A549细胞自噬的变化;用流式细胞仪检测各组A549细胞凋亡;Westernblot方法检测各组A549细胞食管癌相关基因4(ECRG4)蛋白表达变化。结果与对照组比较,感染Beclin-1小干扰RNA(siaNa)慢病毒颗粒后,A549细胞中Beclin-1mRNA和蛋白表达显著减少(P〈0.05),Beclin-1mRNA的沉默效率分别为35.56%、89.22%和66.78%;感染Beclin-1siRNA慢病毒颗粒后,A549细胞凋亡率为(4.31±0.49)%,和对照组比较显著降低(P〈0.05);感染Beclin-1siRNA慢病毒颗粒后,A549细胞群体平均倍增时间为(37.7±2.6)h,和对照组比较,平均倍增时间缩短(P〉0.05);感染Beclin—1siRNA慢病毒颗粒后,和对照组比较,A549细胞自噬细胞阳性数量减少(P〉0.05);感染Beclin-1siRNA慢病毒颗粒后,和对照组比较,ECRG4蛋白表达下降(P〈0.05)。结论自噬基因Beclin-1通过ECRG4通路影响A549肺癌细胞自噬和凋亡。
- 王文玉樊红琨李晓燕伍钢赵国强李林蔚
- 关键词:BECLIN-1自噬脱噬作用
- 食管癌相关基因4蛋白和TMPRSS11A相互作用抑制食管癌细胞增殖被引量:6
- 2015年
- 目的 探讨食管癌相关基因4 (ECRG4)蛋白在食管癌中的抑癌功能和作用机制.方法 利用Western blot方法和共聚焦显微成像分析验证ECRG4蛋白是分泌蛋白;利用细胞增殖曲线分析检测ECRG4蛋白的抑癌功能;利用亲和结合实验检测ECRG4蛋白和TMPRSS11A的相互作用.结果 ECRG4蛋白是小分子分泌蛋白;浓度为10 mg/L的重组ECRG4蛋白抑制食管癌细胞增殖,第5天的抑制率为37.5%(P<0.05);ECRG4蛋白和TMPRSS11A体外存在相互作用.结论 ECRG4蛋白和TMPRSS11A相互作用抑制食管癌细胞增殖.
- 李晓燕李林蔚王文玉高天慧周云
- 关键词:食管癌
- 食管癌相关基因4通过p53通路诱导食管癌细胞G1期阻滞被引量:18
- 2015年
- 目的 探讨食管癌相关基因4(ECRG4)在食管癌中的抑癌功能及其机制.方法 构建ECRG4基因表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,筛选ECRG4稳定转染细胞株.通过细胞增殖曲线和裸鼠移植瘤实验检测ECRG4过表达对食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠成瘤能力的影响;流式细胞仪检测ECRG4过表达对食管癌细胞细胞周期的影响;Western blot检测食管癌细胞中ECRG4过表达,细胞周期调控基因p53和p21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因过表达,食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠移植瘤生长减缓,体内肿瘤生长抑制率为48.5%,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05);ECRG4基因过表达诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ECRG4基因过表达,导致食管癌细胞中p53和p21蛋白表达增加,与空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ECRG4通过p53通路诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞.
- 李晓燕李林蔚王文玉高天慧周云
- 关键词:P53P21食管癌
- 自噬基因Beclin-1通过食管癌相关基因4通路抑制A549肺癌细胞增殖被引量:3
- 2016年
- 目的 探讨自噬基因Beclin-1过表达对A549肺癌细胞自噬和增殖的影响以及其作用机制.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot的方法分别检测转染后各组A549肺癌细胞Beclin-1 mRNA和蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法检测各组A549细胞生长增殖;单丹磺酰戊二胺(MDC)法检测各组A549细胞自噬的变化;Western blot方法检测各组A549细胞食管癌相关基因4(ECRG4)蛋白表达变化.结果 与对照组比较,感染pLenex-Beclin-1慢病毒颗粒后,A549细胞中Beclin-1 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05);与对照组比较,感染pLenex-Beclin-1慢病毒颗粒后,Beclin-1过表达组细胞群体平均倍增时间[(46.0±2.4)h]显著延长(P<0.05);与对照组比较,感染pLenex-Beclin-1慢病毒颗粒后,自噬细胞阳性数量[(10.0±1.5)个]显著增加(P<0.05);与对照组比较,感染pLenex-Beclin-1慢病毒颗粒后,ECRG4蛋白表达增加(P<0.05).结论 自噬基因Beclin-1通过ECRG4通路抑制A549肺癌细胞增殖.
- 王文玉樊红琨李晓燕伍钢赵国强李林蔚
- 关键词:BECLIN-1自噬增殖食管癌
- 人食管癌相关基因4蛋白的亚细胞定位、纯化和抑癌功能研究被引量:5
- 2013年
- 目的检测人食管癌相关基因4(ECRG4)蛋白的亚细胞定位,探讨重组人ECRG4(rhECRG4)蛋白的纯化和抑癌功能。方法用激光扫描共聚焦显微镜成像和Westernblot方法检测ECRG4蛋白的亚细胞定位;用噻唑蓝(MTT)方法检测rhECRG4蛋白的体外抑癌功能。结果激光扫描共聚焦显微镜成像显示,内源性和外源性ECRG4蛋白主要定位在细胞质。Westernblot方法在转染细胞的培养液中检测到ECRG4蛋白表达。rhECRG4蛋白浓度达到3mg/L时,抑制肿瘤细胞增殖;抑制率随着重组蛋白浓度增加而升高,呈剂量一效应关系(P〈0.05)。结论ECRG4蛋白可能是分泌蛋白;rhECRG4蛋白体外抑制肿瘤细胞增殖。
- 刘卫青李晓燕李林蔚
- 关键词:重组蛋白生物治疗
- 人乳腺癌细胞雌激素受体基因的去甲基化及其蛋白再表达
- 本实验探讨去甲基化剂5-aza-2'-deoxycytidine(5-AZA-dC,5-杂氮-2'脱氧胞嘧啶)诱导雌激素受体(ER)阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的雌激素受体(ER)基因去甲基化后,雌激素受体(E...
- 李林蔚
- 关键词:乳腺癌雌激素受体三氧化二砷
- 文献传递