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温郁金ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化被引量：4: 2008年; [目的]寻找一个可用于温郁金ISSR-PCR的最适宜反应体系。[方法]利用CTAB法提取基因组DNA,同时利用PCR扩增技术和方法,对引物、模板DNA、Mg2+d、NTP、Taq聚合酶等反应条件进行优化。[结果]反应体系的最佳条件是总体积为25μl,其中Mg2+浓度(25mmol/L)2.2μl,Taq聚合酶(5 U/μl)0.4μl,引物浓度(20μmol/L)1.5μl,模板DNA(5 ng/μl)1.5μl,dNTP(2.5 mmol/L)2.2μl,10×PCRbuffer2.5μl;PCR扩增程序为:1个循环的94℃预变性5 min;94℃变性35 s,相对应的引物退火温度退火1 min,72℃复性1.5 min,共36个循环;最后72℃延伸10 min。[结论]该体系是适合温郁金ISSR-PCR反应的最适宜体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带清晰而稳定等特点,为今后温郁金遗传多样性的研究奠定了基础。; 汤晓闯王晓慧梁广姜程曦肖健李校堃; 关键词：郁金

温郁金愈伤组织培养及快速繁殖被引量：9: 2008年; 为了提纯复壮温郁金资源,快速繁殖良种苗木,满足市场供不应求的现状,对温郁金外植体培养及愈伤组织的诱导、继代、分化和再生进行研究。结果表明:莪术外植体在以MS培养基为基本培养基,附加6-BA 3.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L适于丛生芽的诱导与增殖;附加2,4-D2.0 mg/L+KT 5.0 mg/L适于愈伤组织的诱导;附加2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L适于愈伤组织的继代培养;附加KT 5.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L适于愈伤组织的分化,生根的最佳培养基为MS+IAA 1.0 mg/L。因此,可以通过组织培养的方式提纯复壮温郁金资源,进行温郁金的快速繁殖。; 王晓慧杨恩秀庞实锋汤晓闯姜成曦李校堃; 关键词：温郁金丛生芽快速繁殖

莪术不同种和居群的ISSR-PCR分析被引量：23: 2008年; 目的：应用ISSR-PCR标记技术研究不同种及居群莪术的亲缘关系和遗传多样性。方法：对蓬莪术、广西莪术和温郁金共8个居群的37个样本进行ISSR-PCR分析，用POPGEN32软件分析其遗传相似系数及遗传距离，UPGMA方法聚类，构建亲缘关系系统图。结果：5条引物共扩增出65个位点，其中34个位点是多态性位点，多态位点百分率为52．3％。遗传相似系数变化范围0．6864～0．9997。Neig基因多样性（H）指数为n1521，Shannon信息指数（I）为0．2338，莪术种内的遗传多样性低于种间。结论：莪术居群间的遗传变异较大，而居群内部的分化程度很低。不同居群的莪术与种的特性和地理分布有一定相关性，为莪术的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。; 王晓慧汤晓闯杨恩秀刘德军李敏李校堃; 关键词：居群莪术 ISSR

温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化被引量：4: 2008年; 在提取纯化温郁金DNA的基础上,利用PCR扩增技术,对Mg2+、dNTP、模板DNA、引物、Taq聚合酶等反应条件进行优化,建立温郁金基因组DNA的RAPD-PCR最佳反应体系。结果表明:最佳条件是总体积为25μL,其中Mg2+(25mM)2μL,Taq聚合酶(5U/μL)0.3μL,引物浓度(20μM)1.0μL,模板DNA(5ng/μL)1.0μL,dNTP(2.5mM)2.0μL,10×PCRbuffer2.5μL;PCR扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性35s,36℃退火1min,72℃复性1.5min,共42个循环;最后72℃延伸10min,该研究得出的体系是温郁金RAPD-PCR的最适宜反应体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带较清晰、稳定等特点,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础。; 王晓慧汤晓闯杨恩秀姜程曦李敏李校堃; 关键词：温郁金基因组DNA RAPD-PCR反应体系

随机扩增多态性DNA标记技术及其在药用植物研究中的应用被引量：2: 2009年; 随机扩增多态性DNA(RAPD)技术是近年来广泛应用的分子标记技术之一,以PCR反应为基础,其特点是快速简便、易操作、成本较低,DNA需要量少、无需放射性分析,也不会污染等。该文简述了RAPD技术的原理及优缺点以及其在药用植物遗传多样性分析、药材鉴别和DNA指纹图谱的构建、亲缘关系及系统学研究、药材的道地性等方面的应用,并展望了其发展前景。; 王晓慧汤晓闯杨恩秀姜程曦董建勇黄志锋; 关键词：随机扩增多态性DNA 药材鉴别道地性

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汤晓闯