潘璐
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人口腔癌相关成纤维细胞的分离培养及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的:分离培养及鉴定口腔癌相关成纤维细胞(CAFs),为探究CAFs可能在肿瘤微环境促进口腔癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用奠定基础。方法:用组织块培养法和酶消化法分离培养、纯化原代口腔癌相关成纤维细胞CAFs和口腔黏膜正常成纤维细胞(NFs);细胞免疫荧光技术及免疫蛋白印迹法对口腔CAFs和NFs进行鉴定。结果:口腔CAFs和NFs分离培养成功,口腔CAFs呈长梭形,达到一定密度时呈多层生长,排列紊乱;NFs呈多胞质突的扁平星状,无重叠生长现象,排列有一定方向性。上皮标志物细胞角蛋白18(CK18)免疫荧光染色在口腔CAFs和NFs均呈阴性,间质标志物波形蛋白(Vimentin)染色均呈阳性。α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1),成纤维细胞激活蛋白(FAP)、血小板衍生生长因子受体α(PDGFR-α)在CAFs染色呈阳性,而在NFs中染色呈阴性。结蛋白(Desmin)在CAFs和NFs中染色均呈阳性。蛋白表达水平上,相对于NFs,CAFs中α-SMA、PDGFR-α蛋白表达呈升高趋势,FSP-1呈下降趋势,而FAP、Desmin在NFs和CAFs中表达无明显差异。结论:CAFs与NFs相比,在形态结构、生长方式、蛋白表达等方面均有明显差异。
- 周美玲李传祝王琼杨聪翀潘璐刘来奎
- 关键词：癌相关成纤维细胞原代细胞培养
- 口腔癌细胞/成纤维细胞三维共培养模型的建立和评价被引量：2
- 2017年
- 目的:建立口腔癌细胞/成纤维细胞三维共培养模型。方法:体外分离培养口腔黏膜正常成纤维细胞(NFs),与口腔癌细胞Cal27共培养构建三维模型,通过HE及免疫荧光染色观察三维共培养模型中Cal27和NFs的生长情况及之间的相互关系。结果:通过原代培养成功获取NFs。三维共培养悬浮培养4 d,胶原凝胶收缩,Cal27细胞呈单层生长;胶原凝胶转移到支架上,气液相界面培养条件下,Cal27细胞呈多层生长,培养3 d时癌细胞基底部出现类基底膜样结构,培养9 d时基底膜样结构趋于完整。结论:三维气液相界面培养模型不同于二维细胞培养,其构建了类似于人体口腔组织的上皮层及其下面的间质细胞层,使口腔癌细胞在生长模式上更接近人体组织,从而为研究口腔癌的侵袭转移提供新的方法和手段。
- 潘璐王琼周美玲刘来奎
- 关键词：成纤维细胞
