吴唯维
- 作品数:8 被引量:11H指数:2
- 供职机构:福建省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 嗜水气单胞菌外膜蛋白基因DNA疫苗载体的构建及分析被引量:4
- 2013年
- 为构建嗜水气单胞菌的DNA疫苗载体,根据已发表的该菌外膜蛋白基因momp的核苷酸序列设计一对特异性引物,应用PCR技术,扩增到嗜水气单胞菌L316的主要外膜蛋白基因,并插入到真核表达载体pcDNA3上,构建成DNA疫苗,命名为pcDNA3-POMP。以纯化的原核表达蛋白GST-POMP免疫SD大鼠制备抗血清,用ELISA测定抗体效价达到1∶100 000以上;用pcDNA3-POMP质粒转染293细胞,转染48h后收集细胞,提取细胞的RNA进行RT-PCR,检测到外源基因的表达。至此,初步完成嗜水气单胞菌DNA疫苗表达载体的构建,为进一步疫苗免疫和效价的检测奠定基础。
- 李盼李素一吴唯维林天龙林晨韬陈叙
- 关键词:嗜水气单胞菌DNA疫苗外膜蛋白
- 创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达被引量:2
- 2013年
- 创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌。本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达。37℃,0.5mmol.L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带。将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU。
- 李素一吴唯维李盼柯翎许斌福林晨韬林天龙陈叙
- 关键词:创伤弧菌克隆原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 斑马鱼在鱼类病原免疫学研究中的应用被引量:3
- 2014年
- 斑马鱼全基因组测序已经完成,建立了多个专门的在线数据库,作为模式生物在遗传学、发育生物学等领域已得到了广泛的应用。本文介绍了斑马鱼用于鱼类病原免疫学研究的优点,包括个体发育过程透明、免疫系统较成熟,具有先天性和获得性2种免疫系统;多种鱼类来源的细菌和病毒在成年斑马鱼和胚胎中都能感染和复制,使其成为研究鱼类病原的入侵机制和宿主免疫应答的模式生物。同时,对当前已建立的鱼类细菌和病毒病原斑马鱼感染模型以及在疫苗方面的研究现状作简要概述。
- 吴唯维李盼柯翎李素一陈华陈叙林天龙林晨韬
- 关键词:斑马鱼病原免疫模式生物
- 一种用于表达抑菌肽的基因、抑菌肽及应用
- 本发明首次从欧洲鳗鲡中发现SEQ ID NO:1的核苷酸序列,并通过基因工程获得具有抑菌活性的抑菌肽,实验证明其能有效地抑制金黄色葡萄球菌的活性,具有抑菌的功能。发明人通过抑制消减杂交技术,构建了欧鳗感染创伤弧菌前后组织...
- 陈叙林晨韬张丽娟李素一柯翎陈华吴唯维
- 欧洲鳗鲡对创伤弧菌免疫应答相关基因的筛选
- 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是公认的人兽共患病的重要致病菌之一,也是水产养殖经济动物的致病菌,由其引发的典型的血性败血症可导致鳗鲡爆发性死亡.作者所在实验室于2003年从福建省长乐市发病欧洲鳗鲡分离到毒...
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- 关键词:欧洲鳗鲡创伤弧菌抑制差减杂交免疫应答
- 创伤弧菌DNA疫苗的构建及相应基因的原核表达、蛋白质纯化与抗体制备
- 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是重要的人兽共患病的致病菌,在医学界和鱼病学界都颇受重视。本研究旨在构建创伤弧菌的DNA疫苗,并对DNA疫苗在欧洲鳗鲡上的应用进行初步探索,为合理选择疫苗提供新思路。我们应用...
- 陈叙林晨韬李素一柯翎李盼吴唯维
- 关键词:创伤弧菌DNA疫苗欧洲鳗鲡
- 新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin在毕赤酵母中的表达被引量:2
- 2021年
- 前期采用差减杂交的方法筛选到新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin,其基因全长为477 bp,编码159个氨基酸,理论分子量约17.4 kDa。为了获得具活性的大量表达的抗菌肽,本研究利用毕赤酵母表达了elecilin。首先将elecilin基因克隆至酵母分泌表达载体pPICZaA,构建了重组分泌表达质粒pPICZaA-elecilin,电击转化毕赤酵母X-33。经Zeocin筛选和PCR鉴定,获得重组酵母菌,通过甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定,证实诱导后的培养基中存在与预期分子量大小相一致的蛋白,能被His-tag单克隆抗体识别,表明利用酵母成功表达了欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin。这为进一步研究该抗菌肽的功能及作为饲料添加剂的应用奠定了基础。
- 张丽娟吴唯维李素一陈华柯翎陈叙林晨韬
- 关键词:欧洲鳗鲡抗菌肽毕赤酵母
- 一种用于表达抑菌肽的基因、抑菌肽及应用
- 本发明首次从欧洲鳗鲡中发现SEQ ID NO:1的核苷酸序列,并通过基因工程获得具有抑菌活性的抑菌肽,实验证明其能有效地抑制金黄色葡萄球菌的活性,具有抑菌的功能。发明人通过抑制消减杂交技术,构建了欧鳗感染创伤弧菌前后组织...
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