周杨永
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：武汉大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 红莲型水稻杂种F1花药噬菌体展示文库的构建被引量：1
- 2008年
- 噬菌体展示是研究蛋白质相互作用的重要手段,为深入研究红莲型水稻不育和育性恢复的分子机理,以红莲型水稻杂种F1花药为材料,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA,在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,再用EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。经Mini Column纯化后,收集300bp以上的双链cDNA片段,将其连接到带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7 Select 10-3b载体上,经体外包装后,以BL T5403为受体菌构建了红莲水稻杂种F1花药的噬菌体展示文库。经测定显示,该噬菌体展示文库容量为1.03×106pfu/mL,重组率为100%,扩增后文库滴度为2.14×1012pfu/mL。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,97%的插入片段大于300bp。
- 胡朝凤彭晓珏周杨永谭艳平李绍清朱英国
- 关键词：水稻花药噬菌体展示文库构建
