王俊妹
- 作品数：5 被引量：20H指数：4
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目广东省科技计划工业攻关项目吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 银杏叶中异鼠李素对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其分子机制被引量：6
- 2018年
- 目的探讨银杏叶中异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其可能的相关分子机制。方法在核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的同时,加入不同浓度的ISO(1~10μM),研究其对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响,通过CCK8法检测及评估各作用浓度ISO的细胞毒性,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resis-tant acid phosphatase staining,TRAP)染色及骨片吸收效果判定其对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。实时定量PCR检测破骨细胞分化过程的标志性基因:TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)、金属基质蛋白酶9(matrix metallo protein,MMP-9);分化相关转录因子:原癌基因c-Fos(proto-oncogene protein,c-Fos)、核转录因子激活的T细胞1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)的表达及破骨细胞分化下游因子NF-κB p65信号通路的磷酸化水平。结果不同浓度的ISO(1~10μM)对RAW264.7细胞无细胞毒性,并且能抑制TRAP活性,减少骨吸收陷窝数量,在浓度为10μM时最为显著;ISO能显著降低TRAP、Ctsk、MMP-9、c-Fos、NFATc1及NF-κB p65的m RNA表达。结论 ISO对RAW264.7细胞向破骨细胞的分化具有抑制作用,其机制可能与经典NF-κB通路的抑制有关。
- 李婧程梁郭吕华李彤杨沫扬王俊妹吴哲
- 关键词：异鼠李素破骨细胞
- 银杏叶提取物对破骨细胞分化和骨吸收的作用及其机制被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨不同浓度银杏叶提取物(GBE)对破骨胞分化和骨吸收的作用,并阐明其作用机制。方法:体外培养RAW264.7细胞,采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和不同浓度GBE处理细胞,分为空白对照组(0μg·L^(-1) RANKL)、RANKL组(100μg·L^(-1) RANKL)和RANKL+75 mg·L^(-1) GBE和RANKL+150mg·L^(-1) GBE组。抗酒石酸酸性染色(TRAP)法观察各组破骨细胞的形态及数量,骨吸收陷窝面积评估GBE对破骨细胞骨吸收能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法检测RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因活化T细胞核因子c1(NFATc1)、树突状细胞特异性跨膜蛋白(DCSTAMP)、组织蛋白酶K(Cathepsin K)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、P27和细胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)的表达水平。结果:与空白对照组比较,RANKL组破骨细胞的数量明显增加(P<0.05);与RANKL组比较,RANKL+75mg·L^(-1) GBE和RANKL+150mg·L^(-1)GBE组破骨细胞数量明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,RANKL组骨片中骨吸收陷窝面积明显升高(P<0.05);与RANKL组比较,RANKL+75mg·L^(-1) GBE和RANKL+150mg·L^(-1) GBE组骨片中骨吸收陷窝面积明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,75和150 mg·L^(-1) GBE组RAW264.7细胞凋亡率升高(P<0.05),RAW264.7细胞中Bcl-2基因表达水平明显降低(P<0.05),Bax基因表达水平明显升高(P<0.05)。与RANKL组比较,RANKL+75 mg·L^(-1) GBE和RANKL+150 mg·L^(-1) GBE组RAW264.7细胞G0-G1期阻滞明显缩短(P<0.05);RAW264.7细胞中P27基因表达水平明显降低(P<0.05),Cyclin-D1基因表达水平明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,RANKL组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DC-STAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显升高(P<0.05);与RANKL组比较,RANKL+75mg·L^(-1) GBE和RANKL+150 mg·L^(-1) GBE组RAW264.7细胞中破骨细胞相关基因NFATc1、DCSTAMP、Cathepsin K和MMP-9表达水平明显降低(P<0.05)。结论:GBE可抑制破骨细
- 王俊妹孙千月吴哲李彤李婧
- 关键词：银杏叶提取物破骨细胞细胞周期细胞凋亡
- 三维细胞培养中支架的研究现状被引量：5
- 2017年
- 细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术,目前常用的二维细胞培养方法,例如,多孔板、烧瓶和培养皿等存在诸多不足和限制,三维细胞培养能够改善细胞局部微环境、促进细胞与细胞、细胞与基质之间的交流,模拟体内生理环境,从而增强细胞功能,在新药研发、肿瘤研究等领域具有广泛应用前景。支架是实现三维细胞培养最常用的手段之一,相当于人工细胞外基质,能够模拟体内组织复杂的三维结构及其主要特征。本文从基于支架的培养体系和无支架的培养体系两方面讨论了三维细胞培养方法,尤其详细介绍了各种支架。
- 李彤张晓晓李婧王俊妹吴哲
- 关键词：细胞外基质
- 银杏叶提取物对破骨细胞的影响和相关机制的研究
- 一、研究目的研究银杏叶提取物(GBE)对RAW264.7破骨胞相分化及对其骨吸收的影响,探讨其对RAW264.7细胞的相关作用机理。二、研究方法RAW264.7细胞被RANKL诱导向破骨细胞相分化,利用0.075和0.1...
- 王俊妹
- 关键词：银杏叶提取物骨吸收破骨细胞
- 文献传递
- 银杏叶提取物对成骨细胞分化的影响及相关机制研究被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对成骨细胞分化的影响及其可能的相关分子机制。方法:将不同浓度的GBE作用于MG63,通过茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)活性检测判定其对细胞成骨分化能力的影响。RT-PCR检测Runx2(runt-related transcription factor 2)、一型胶原蛋白(COL1A1)、骨钙素(Osteocalcin,OC)及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达,Western Blot检测细胞核蛋白β-catenin及cyclinD1的表达。结果:不同浓度的GBE能提高ALP活性及钙结节数量,在浓度为75 mg/L时最为显著;此外,GBE能显著提高Runx2、COL1A1、OC、cyclinD1的mRNA表达及cyclinD1的蛋白表达,同时促进β-catenin蛋白的核内转移;而上述活性均能被DKK1所抑制。结论:银杏叶提取物对成骨细胞的分化具有积极意义,其机制可能与经典Wnt通路的激活有关。
- 张晓晓李婧王俊妹李彤杨沫扬吴哲
- 关键词：银杏叶提取物成骨分化成骨细胞
