王晓婕
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
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- 不同浓度枸杞多糖对大鼠动脉血管平滑肌细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的观察大鼠动脉血管平滑肌细胞株A7r5在高浓度葡萄糖作用下的增殖变化以及不同浓度的枸杞多糖(LBP)对该作用的影响。方法将A7r5细胞培养48h后随机分组:对照组(葡萄糖浓度5mM)、高糖组(葡萄糖浓度10、15、20、25、30、40mM)、高糖(25mM)+LBP 60μg.mL-1组、高糖(25mM)+LBP 80μg.mL-1组、高糖(25mM)+LBP 100μg.mL-1组,以MTS孵育A7r5后,经酶联免疫检测仪测定各组的吸光度值。结果①与对照组(1.331±0.097)相比,高糖组吸光度值均明显升高,且以葡萄糖浓度为25mM组(2.485±0.229)增高为甚,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。②高糖(葡萄糖浓度25mM)诱导的A7r5细胞增殖在48~72h达到高峰。③与高糖组相比,中、高浓度LBP组对A7r5细胞增殖有抑制作用,其差异均有统计学意义(P<0.01)。结论高浓度葡萄糖可促进A7r5细胞增殖,中、高浓度LBP可抑制高糖诱导的A7r5增殖。
- 范倩王晓婕李臻何军
- 关键词:细胞增殖枸杞多糖
- Mfn2基因克隆及pEGFPmfn2真核表达质粒的构建
- 2010年
- 目的利用基因工程技术克隆线粒体融合蛋白2(mitofusin-2,mfn2)基因并构建一种无细胞毒性、不激活原癌基因的真核表达的pEGFPmfn2质粒载体。方法采用高效Trizol试剂快速提取大鼠血管平滑肌细胞株A7r5总RNA,经RT-PCR获得mfn2cDNA,扩增、纯化、回收mfn2基因片段并将质粒pEGFP-N1和mfn2基因片段分别双酶切,前者纯化回收大片段,后者纯化回收2.2 kb片段,再将回收的pEGFP-N1大片段与mfn2基因片段(2.2 kb)重组。对重组pEGFPmfn2质粒进行PCR和双酶切鉴定并测序。结果成功地从A7r5中克隆了mfn2基因,并构建了以pEGFP-N1为载体的真核表达质粒。结论含mfn2基因新型表达质粒构建的成功将为研究mfn2功能、进一步研究该基因异常表达与心血管疾病发生的关系奠定基础。
- 席少静何军滕艳萍王晓婕范倩
- 关键词:基因克隆