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袁春雷
作品数:
1
被引量:9
H指数:1
供职机构:
华中科技大学同济医学院
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发文基金:
国家教育部博士点基金
广东省科学事业费计划项目
博士科研启动基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
徐军发
广东医学院
龚非力
华中科技大学同济医学院
杨衡
华中科技大学同济医学院
胡国艳
广东医学院
赵坤
广东医学院
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徐军发
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袁春雷
传媒
1篇
细胞与分子免...
年份
1篇
2007
共
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小鼠B7-H4基因克隆及真核表达载体的构建
被引量:9
2007年
目的:克隆小鼠B7-H4(mB7-H4)基因cDNA全长,构建表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-GFP和表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-Fc。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB7-H4cDNA,将其全长cDNA去掉中止密码克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,并转染293T细胞使其表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白;将其胞外功能区cDNA克隆入pcDNA3·1-hFc真核表达载体中,并转染COS-7细胞使其表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白。结果:序列测定证实克隆的mB7-H4全长cDNA阅读框正确完整,酶切和序列测定证实mB7-H4分别正确插入pEGFP-N1和pcDNA3·1-hFc载体中,两种表达载体分别转染293T细胞和COS-7细胞后可分别表达跨膜型mB7-H4-GFP和可溶性mB7-H4-Fc。结论:成功地克隆mB7-H4基因并构建了两个真核表达载体,它们可分别表达跨膜型和可溶性融合蛋白。
徐军发
袁春雷
杨衡
赵坤
胡国艳
龚非力
关键词:
B7-H4
真核表达
基因克隆
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