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斑节对虾泛素基因PmUb的克隆及表达分析: 在实验室已有的斑节对虾(Penaeus monodon)肝胰腺转录组数据中筛选出泛素基因(ubiquitin,Pm Ub)片段,通过RACE-PCR获得了Pm Ub基因的c DNA序列全长,利用生物信息学方法分析了Pm ...; 吴松唐蕾傅明骏黄建华江世贵; 关键词：斑节对虾卵巢发育泛素基因克隆; 文献传递

斑节对虾泛素融合蛋白UbS27基因克隆与表达分析: 2016年; 从构建的斑节对虾（Penaeus monodon）肝胰腺转录组数据中筛选出泛素核糖体融合蛋白Ub S27基因（ubiquitin/ribosomal S27 fusion protein,Pm Ub S27）片段,利用SMART-RACE技术克隆出Pm Ub S27基因c DNA全长,并利用软件对其结构进行分析;利用实时荧光定量技术检测Pm Ub S27基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果显示,Pm Ub S27基因c DNA全长为514 bp,开放阅读框465 bp,编码154个氨基酸,含有泛素（1~72 aa）和核糖体蛋白（101~147 aa）2个结构域。以DNA为模板克隆得到的基因序列由3个内含子和4个外显子组成。实时荧光定量结果显示,Pm Ub S27基因在斑节对虾各组织中均有表达,但是在卵巢中表达量最高,其次为肝胰腺、血淋巴和精巢。Pm Ub S27在卵巢发育前期（Ⅱ期）和成熟期（Ⅴ期）的表达量显著高于其他各期（P〈0.05）。结果表明,Pm Ub S27参与斑节对虾卵巢发育的过程并可能在卵巢发育进程中起到重要的调控作用。; 吴松唐蕾傅明骏杨丽诗黄建华周发林江世贵; 关键词：斑节对虾卵巢发育实时定量PCR

促性腺激素释放激素及多巴胺拮抗物地欧酮对斑节对虾卵巢组织发育的影响被引量：3: 2015年; 研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)促性腺激素释放激素(Es GnRH-I)、克氏原螯虾(Procambarus clarkii)促性腺激素释放激素(Pc GnRH)、多巴胺拮抗物地欧酮(DOM)及神经组织对斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育的调控作用效果。试验前使用石蜡切片、HE染色及荧光观察确定斑节对虾卵巢发育分期及各期卵母细胞形态特征。结果显示,斑节对虾卵巢具有自发荧光现象,主要集中于滤泡细胞以及富含卵黄颗粒的次级卵母细胞、成熟卵母细胞的细胞质区域,荧光强度与卵巢发育阶段具有显著正相关性(P<0.01)。随后采用离体卵巢组织培养的方法研究3种激素对卵巢发育的影响。结果表明,50 ng·m L-1Es GnRH-I、500 ng·m L-1Pc GnRH和0.3μg·m L-1DOM对离体卵巢的发育有明显的刺激作用,显著增大卵母细胞直径(P<0.01),与脑组织、胸神经处理组效果相似;同时组合使用Pc GnRH和DOM能极显著促进卵母细胞发育(P<0.01)。荧光定量PCR结果显示Pc GnRH和DOM处理后能显著增加卵黄蛋白原的积累量。说明甲壳类动物GnRH和DOM均能促进斑节对虾卵母细胞成熟,并具有协同作用。; 韩萍杨丽诗吴松杨其彬黄建华周发林江世贵; 关键词：促性腺激素释放激素地欧酮卵巢发育斑节对虾

斑节对虾泛素融合蛋白UbL40基因的克隆及表达分析: 2016年; 从斑节对虾（Penaeus monodon）肝胰腺转录组数据中筛选获得泛素融合蛋白Ub L40基因（ubiquitin/ribosomal L40 fusion protein,Pm Ub L40）的部分序列,利用RACE技术克隆其c DNA全长序列,通过生物信息学进行结构分析;利用实时定量PCR技术检测该基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果表明,Pm Ub L40基因c DNA全长571 bp,开放阅读框（Open reading frame,ORF）长390 bp,编码129个氨基酸,预测分子量约14.7 ku,理论等电点为9.76。预测氨基酸序列的N-末端（1～76aa）为高度保守的泛素结构域,C-末端（77～129aa）为典型的核糖体蛋白L40结构域。多重序列比对表明不同物种的Ub L40在进化过程中高度保守。实时定量PCR结果显示Pm Ub L40基因在肝胰腺的表达量最高,肌肉、卵巢次之,其他组织的表达较低;在卵巢发育过程中Pm Ub L40基因在II期表达最高,其次是V期,显著高于I、III、IV期。研究结果表明Pm Ub L40基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能具有重要作用。; 傅明骏吴松唐蕾周发林邱丽华江世贵; 关键词：斑节对虾卵巢发育基因克隆

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吴松