周芳芳
- 作品数:3 被引量:15H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院棉花研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项科技基础性工作专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及变异性状的分析被引量:3
- 2012年
- 利用农杆菌介导遗传转化(ATMT)的方法,成功构建含2 000个转化子的棉花黄萎病菌强毒菌株Vd080的突变体库。200μmol/L乙酰丁香酮(AS)作诱导剂,25℃共培养48h,棉花黄萎病菌孢子量为106 mL-1,其转化效率达150~540个转化子。进一步研究发现,供试突变体的T-DNA成功插入Vd080基因组,且均为单拷贝插入,转化子的潮霉素B基因能够稳定遗传。309个突变体中,53.7%的突变体菌落形态与初始菌株Vd080相同,均产生黑色的微菌核,不产生黑色素微菌核的菌丝型仅占17.5%。与初始菌株相比,随机选取的85个突变体,产孢量、生长速率、粗毒素分泌量及致病力发生显著变异的菌株分别占36.4%、12.9%、50.6%和29.4%,四者之间不存在明显的相关性。
- 周芳芳李志芳冯自力赵丽红师勇强朱荷琴
- 关键词:农杆菌介导转化棉花黄萎病菌突变体库变异性状
- 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展被引量:10
- 2012年
- 农杆菌介导遗传转化成为真菌实现菌种改良、新基因标记及目的基因的筛选、分离和克隆的重要方法之一。该方法操作简单、受体范围广、转化效率高、单拷贝率高及突变体遗传稳定,解决了传统转化方法的瓶颈。利用该方法成功实现了多种真菌大容量高质量突变体库的构建,且在各类真菌突变体库构建的基础上,相关基因的筛选和功能基因的验证工作成为下一步的研究热点,进而为各类病原菌致病机理的深入研究提供依据,为抗病育种等亟待解决的问题奠定基础。
- 周芳芳李志芳冯自力师勇强赵丽红李彩红朱荷琴
- 关键词:农杆菌真菌突变体
- 棉花黄萎病菌低致病力突变体的表型分析及致病相关基因克隆被引量:2
- 2015年
- 本研究通过对菌核型强致病力菌株Vd080产生的800个T-DNA插入突变体进行致病力测定,筛选得到31株致病力极显著降低的突变体,并对其进行了生物学性状分析。分子验证结果表明,这些低致病力突变体均为阳性,且有25株的T-DNA为单拷贝插入。与野生型菌株Vd080相比,这25株低致病力突变体菌落形态变异丰富,除了8株与野生型菌株形态一致的菌核型突变体外,还有3株黄色菌丝型,2株白色菌丝型和12株中间型突变体。此外,多数突变体的生长速率、产孢量和粗毒素产量都发生了显著变化,且各生理指标之间并无明显相关性。借助TAIL-PCR技术和Vd Ls.17的基因组数据库,进一步获得了这25株单拷贝插入低致病力突变体T-DNA的侧翼序列,并从Vd080中成功克隆得到了影响黄萎病菌致病力的相关基因。
- 刘义杰李志芳冯自力赵丽红周芳芳师勇强杨家荣朱荷琴
- 关键词:大丽轮枝菌基因克隆