刘洁琼
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 油棕花序性别分化过程观察被引量：3
- 2016年
- 【目的】了解油棕雌、雄花序的发育规律及在形态学和细胞组织学水平上的差异,为进一步研究油棕花序性别分化机理打下基础。【方法】取油棕不同发育时期的花序,测量其长度和质量,制作石蜡切片后利用体视显微镜观察其细胞组织学特点。【结果】油棕花序的整个发育过程可分为两个阶段:雌雄未显性期和雌雄显性期,且雌雄未显性期发育时间比雌雄显性期长得多,约占总时期的80%。雌雄未显性期与雌雄显性期间存在一个花序长度和质量呈指数式迅速增长的时期,即花序发育指数增长期(EGSI)。油棕花性别分化之初,花序开始迅速发育,进入EGSI。油棕雌、雄花序在发育过程中的不同之处表现为:雌花有一个两性期阶段,由一个有功能的雌花及两侧的伴随雄花组成,伴随雄花选择性败育,雌花成为单性花;而性别分化后,雄花不存在两性期阶段,直接进入单性期阶段。油棕雌、雄花序每个小穗轴上花原基分生组织数目明显不同,雄花花原基的数量远多于雌花花原基,具有数量级差别。【结论】油棕花序发育过程中存在EGSI。幼嫩雌、雄花序的花原基分生组织数目显著不同,根据花原基分生组织的数量可判断尚未从叶片基部露出的幼嫩花序性别。
- 杨静李哲曾宪海林位夫邹积鑫潘登浪李炜芳刘钊周建南刘洁琼张春红
- 关键词：油棕花序雌花雄花发育分化细胞组织学
- 橡胶树乳管特异性启动子连接HbHMGR1基因的易碎胚性愈伤组织转化被引量：1
- 2016年
- 【目的】以3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶1基因（Hb HMGR1）乳管表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1转化橡胶树易碎胚性愈伤组织,获得抗性转基因材料,为研究Hb HMGR1基因的乳管特异性表达及提高橡胶产量打下基础。【方法】用根癌农杆菌EHA105介导表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1转化橡胶树品种热研8-79花药易碎胚性愈伤组织,经卡那霉素筛选数月后,对抗性愈伤组织进行GUS染色和分子检测。【结果】经过对根癌农杆菌侵染的易碎愈伤组织进行4~6个月筛选,得到5个GUS检测呈阳性的抗性愈伤组织系;取其中的2号和11号抗性愈伤组织系进行PCR鉴定,均能扩增出与阳性对照相同的特异片段,uid A、NPTII和PHEV2.1-Hb HMGR1序列的目的片段大小分别为829、797和3592 bp。2号和11号抗性愈伤组织系经反向PCR鉴定,发现2号抗性愈伤组织系未扩增出目的条带,而11号抗性愈伤组织系扩增获得一条约2000 bp的条带,包含T-DNA序列和一段未知的DNA序列,其中未知DNA序列是橡胶树品种热研8-79基因组的一段连续序列。【结论】将植物表达载体的T-DNA整合到抗性愈伤组织系基因组DNA中,可获得一个含35S-NPTII-PHEV2.1-Hb HMGR1-35S-uid A的转基因愈伤组织系。
- 李哲贺永国黄绵佳曾宪海林位夫刘洁琼张春红李运合马晓晓
- 关键词：橡胶树
- 一种用乳管特异性启动子获得橡胶树转基因植株的方法
- 本发明公开了一种克隆橡胶树乳管特异性强启动子PHEV2.1，与天然橡胶生物合成途径的关键限速酶HbHMGR1基因连接构建植物表达载体，转化橡胶树易碎胚性愈伤组织，获得转基因植株的方法。本发明从橡胶树优良品种材料中克隆PH...
- 李哲贺永国黄绵佳马晓晓曾宪海林位夫周建南刘洁琼
- 文献传递
- 一种用细胞组织学技术判定油棕幼嫩花序性别的方法
- 本发明属植物生物学领域，涉及一种用细胞组织学技术判定油棕幼嫩花序性别的方法，是选取处于雌雄未显性期Ⅲ期的花序，经固定、脱水与透明、浸蜡与包埋、切片与烤片、脱蜡与染色后制作成切片，用显微镜对切片进行观察并拍照，计算花苞片原...
- 李哲杨静曾宪海潘登浪李炜芳邹积鑫刘钊林位夫周建南刘洁琼张春红
- 文献传递
- 橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定被引量：3
- 2016年
- 【目的】克隆橡胶树乳管特异性强启动子HEV2.1(PHEV2.1),构建天然橡胶生物合成途径关键限速酶基因(Hb HMGR1)的乳管特异性植物表达载体,为橡胶树遗传转化奠定基础。【方法】根据已报道的HEV2.1序列(Gen Bank登录号AY247789.1)设计1对特异引物,采用PCR从橡胶树热研7-33-97基因组DNA中克隆PHEV2.1,与Hb HMGR1基因融合构建橡胶树乳管特异性植物表达载体,并以PCR和限制性内切酶酶切进行鉴定。【结果】用特异引物可从热研7-33-97基因组DNA中扩增获得1852 bp的PHEV2.1片段,其与AY247789.1启动子序列的同源性为98.6%。将PHEV2.1与Hb HMGR1基因融合构建乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1,经PCR和限制性内切酶酶切鉴定证明植物表达载体构建成功。【结论】将PHEV2.1和Hb HMGR1基因先构建到p CAMBIA3301载体上再克隆至p CAMBIA2301载体上,能有效解决直接克隆至p CAMBIA2301载体上出现Pst I突变、阻碍载体构建的难题,成功构建获得乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1。
- 贺永国李哲黄绵佳曾宪海林位夫刘洁琼张春红马晓晓
- 关键词：橡胶树植物表达载体
- 一种用细胞组织学技术判定油棕幼嫩花序性别的方法
- 本发明属植物生物学领域，涉及一种用细胞组织学技术判定油棕幼嫩花序性别的方法，是选取处于雌雄未显性期Ⅲ期的花序，经固定、脱水与透明、浸蜡与包埋、切片与烤片、脱蜡与染色后制作成切片，用显微镜对切片进行观察并拍照，计算花苞片原...
- 李哲杨静曾宪海潘登浪李炜芳邹积鑫刘钊林位夫周建南刘洁琼张春红
- 文献传递
- 一种用乳管特异性启动子获得橡胶树转基因植株的方法
- 本发明公开了一种克隆橡胶树乳管特异性强启动子PHEV2.1，与天然橡胶生物合成途径的关键限速酶HbHMGR1基因连接构建植物表达载体，转化橡胶树易碎胚性愈伤组织，获得转基因植株的方法。本发明从橡胶树优良品种材料中克隆PH...
- 李哲贺永国黄绵佳马晓晓曾宪海林位夫周建南刘洁琼
- 文献传递
