蔡欣然
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中山大学药学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 羰基氰氯苯腙调节非经典自噬的机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨可以调控羰基氰氯苯腙(carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone,CCCP)诱导的不依赖自噬关键基因的非经典自噬的影响因素。方法分别将野生型细胞和自噬关键基因敲除/敲低的细胞(Atg5-KO MEF,FIP-200 KO MEF,ULK1-KO MEF,Beclin 1-KO U251)用CCCP处理,观察GFP-LC3的分布聚集情况和LC3蛋白水平的表达。荧光定量PCR检测CCCP处理后LC3B mRNA水平变化。Western blot检测FIP200-KO MEF中CCCP处理时,水通道蛋白抑制剂对LC3蛋白水平的影响。结果在Atg5-KO MEF细胞中,和对照组相比,CCCP处理组免疫荧光实验不能产生GFP-LC3自噬斑点,Western blot结果显示LC3-I型不能转变为LC3-II。而在ULK1-KO MEF,FIP200-KO MEF,及Beclin1-KD U251细胞中,CCCP处理组免疫荧光实验能产生GFP-LC3自噬斑点,同时LC3-I型也能转变为LC3-II型。但CCCP处理不影响LC3B的mRNA水平。CCCP诱导的非经典自噬能被水通道蛋白抑制剂所抑制。结论 CCCP诱导的非经典自噬需要自噬关键基因Atg5参与,但不需要Beclin 1,ULK1,FIP200的参与,不影响LC3B的转录调控。渗透压不平衡可以调节CCCP诱导的自噬。
- 高瑛刘亚军蔡欣然刘培庆李民
- 关键词：自噬LC3MEF
