刘洪茂
- 作品数：8 被引量：22H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- 镉处理对小鼠睾丸间质细胞PI3K/AKT信号通路的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨镉对小鼠睾丸间质细胞3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 TM3细胞经20μmol/L Cd Cl2处理,分别在加入Cd Cl24 h和8 h后收集细胞;对照组给予相应体积的PBS,8 h后收集细胞。利用实时定量RT-PCR法测定炎症相关细胞因子白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2、MIP-1和环氧合酶(COX)-2 mRNA的表达水平以及用Western blot法检测细胞COX-2、AKT和p-AKT蛋白的表达水平。结果与对照组相比,镉能够显著诱导TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.01);镉处理4 h组MCP-1 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.01),而镉处理8 h组MCP-1 mRNA表达水平与对照组相比差异无统计学意义;镉对TM3细胞MIP-1和MIP-2mRNA表达差异无统计学意义;镉能够明显诱导TM3细胞COX-2蛋白和mRNA的表达(P<0.01)。此外,镉处理组pAKT蛋白表达水平也明显高于对照组(P<0.01)。结论镉可能通过激活TM3细胞中PI3K/AKT信号通路进而选择性调节部分炎症相关细胞因子的表达。
- 姬艳丽刘洪茂刘洪茂朱文祥徐德祥
- 关键词：镉睾丸间质细胞
- IRE1信号通路在热诱导睾丸生殖细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2016年
- 目的探讨内质网应激IRE1信号通路在急性热应激诱导睾丸生殖细胞凋亡中的作用。方法 24只成年ICR雄性小鼠,随机分为4组。将热处理组小鼠身体的下1/3部分(包括阴囊、后腿和尾巴)浸于43℃恒温水浴中15 min,于热处理后0.5、2和6 h取睾丸组织。将对照组小鼠下腹部浸入22℃水浴15 min,6 h后取睾丸组。采用TUNEL法检测睾丸组织生殖细胞凋亡;用半定量RT-PCR技术检测u XBP-1/s XBP-1 mRNA表达;用Western blot检测睾丸总蛋白p-JNK表达。结果单次热应激能够明显诱导小鼠睾丸生殖细胞凋亡。与对照组相比,热处理能够明显降低睾丸组织u XBP-1/s XBP-1 mRNA的比值,以热处理后0.5和2 h最为显著,而随着时间的延长,又逐渐恢复正常。热应激明显诱导睾丸JNK(另一个IRE1的下游分子)磷酸化水平。结论单次热处理能激活睾丸组织内质网应激IRE1通路,在早期可能激活IRE1-XBP-1通路保护睾丸组织对抗热应激,而后期可能通过激活IRE1-JNK通路诱导睾丸生殖细胞凋亡。
- 刘洪茂陈啸郭涛潘显阳吴方强江旋穆柯瀚姬艳丽徐德祥
- 关键词：热应激睾丸生殖细胞凋亡
- PERK信号通路在热诱导睾丸生殖细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2016年
- 目的探讨内质网应激PERK信号通路在急性热应激诱导睾丸生殖细胞凋亡中的作用。方法将18只健康6-8周龄清洁级ICR雄性小鼠随机分为3组,每组6只。将热处理组小鼠身体的下1/3部分（包括阴囊、后腿、尾巴）浸于43℃恒温水浴15 min,于热应激后2、6 h处死小鼠;将对照组小鼠下腹部浸入22℃水浴15 min,6 h后处死小鼠。采用TUNEL法检测睾丸组织生殖细胞的凋亡率。采用Western blot法检测睾丸总蛋白p-e IF2α和CHOP蛋白的表达水平。结果与对照组比较,热处理后不同时间小鼠睾丸组织生精小管内核浓缩小管、含空泡小管和MSCs的发生率及阳性小管发生率和每管凋亡细胞数以及p-e IF2α与CHOP蛋白的表达水平均较高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;且随着热处理后时间的延长,小鼠睾丸组织生精小管内核浓缩小管、含空泡小管和MSCs的发生率及阳性小管发生率和每管凋亡细胞数均呈上升趋势,而p-e IF2α与CHOP蛋白的表达水平均呈先上升后下降的趋势。结论单次热处理能明显上调睾丸组织e IF2α蛋白磷酸化和CHOP蛋白的表达水平,提示内质网应激PERK信号通路可能参与了热处理诱导的睾丸生殖细胞凋亡。
- 刘洪茂姬洋曹博阳张晓盼穆柯瀚姬艳丽徐德祥
- 关键词：热应激睾丸生殖细胞细胞凋亡
- 阴囊短暂、轻度热处理对小鼠睾丸应激反应的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨单次、短暂、轻度热处理(43℃、15 rmin)对小鼠睾丸的应激反应。方法将24只成年ICR雄性小鼠随机分为4组。将热处理组小鼠身体的下1/3部分浸于43℃恒温水浴中15 min,于热处理后0.5、2、6 h取睾丸组织。将对照组小鼠身体的下1/3部分浸人22℃水浴15 min,6 h后取睾丸组织。采用Western blot法检测睾丸总蛋白热休克蛋白32(HO-1)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;采用免疫组化法检测GRP78的表达。结果 HO-1为热应激的标志物,在热处理后,睾丸HO-1表达显著上调(P<0.01),并呈时间依赖性。3-NT为蛋白质硝化标志物,热处理明显增强睾丸组织蛋白的硝化(P<0.01)。此外,与对照组比较,热处理下调内质网应激标志物GRP78在睾丸中的表达(P<0.05)。结论单次短暂轻度阴囊热处理明显诱导睾丸组织HO-1和3-NT表达,而下调GRP78表达,提示热应激、硝化应激和内质网应激可能参与了短暂、轻度阴囊热处理诱导的睾九损伤。
- 刘洪茂穆柯瀚姬艳丽张君张桂彬刘路王华徐德祥
- 关键词：睾丸热应激硝化应激内质网应激
- 镉诱导小鼠急性肝损伤模型的研究被引量：6
- 2015年
- 目的通过腹腔注射氯化镉(Cd Cl2)建立小鼠急性肝损伤模型,初步阐明其分子机制。方法以4 mg/kg Cd Cl2腹腔注射小鼠,观察各时间点小鼠肝组织病理变化和血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的变化,探索Cd Cl2引起明显肝损伤的染毒时间;以1、2、4 mg/kg Cd Cl2对小鼠腹腔注射染毒,筛选出Cd Cl2诱导急性肝损伤的最佳染毒剂量;检测血清丙二醛(MDA)以及肝匀浆MDA、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量,观察氧化应激在Cd Cl2诱导的小鼠肝损伤中的作用。结果以4 mg/kg Cd Cl2腹腔注射18 h后,肝脏组织出现片状坏死,肝细胞严重气球样变,血清ALT和AST明显升高。此外,与对照组比较,Cd Cl2处理18 h后,血清与肝脏MDA及肝脏NO水平显著升高,肝脏GSH、GSH-PX活性明显降低。结论 4 mg/kg Cd Cl2腹腔注射18 h后可成功建立小鼠急性肝损伤模型,其发生可能与MDA和NO升高,肝组织GSH含量、GSH-PX活性降低相关。
- 吴永琴关存杰刘洪茂姬艳丽徐德祥
- 关键词：氯化镉急性肝损伤MDAGSH
- 镉对小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响被引量：4
- 2018年
- 目的探讨镉对小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响。方法镉处理组采用20μmol/L CdCl_2处理TM3细胞,分别在加入CdCl_24 h和8 h后收集细胞上清液,对照组TM3细胞给予等容积磷酸盐缓冲液(DPBS)。采用ELISA法测定细胞上清液中睾酮含量,采用RT-PCR和Western blot技术检测睾酮合成关键酶mRNA和蛋白表达水平。结果镉处理组细胞上清液中睾酮含量明显降低(P<0.01)。与对照组相比,镉显著下调TM3细胞类固醇激素合成急性调控蛋白(St AR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)与17β-羟类固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达(P<0.01),镉处理组TM3细胞St AR、P450_(SCC)、细胞色素P450_(17α)-羟化酶(P450_(17α))、3β-HSD与17β-HSD的蛋白表达水平也明显降低,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论镉抑制小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌,其原因可能与镉抑制间质细胞部分睾酮合成关键酶mRNA和蛋白表达水平有关。
- 朱文祥刘洪茂穆柯瀚姬艳丽姬艳丽
- 关键词：镉睾丸间质细胞睾酮睾酮合成
- 热应激对睾丸钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ表达的影响被引量：3
- 2019年
- 目的探讨阴囊轻度热应激对睾丸钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶I(p-CaMKII)表达的影响。方法将24只成年ICR雄性小鼠分为4组:对照组、热应激0.5h组热应激2 h组和热应激6h组。热应激组小鼠的处理方式为:将小鼠身体的下1/3部分浸于43℃水浴中15 min,在热应激后0.5.2.6 h取舉丸样品,分别对应为热应激0.5 h组、热应激2 h组和热应激6h组。将对照组小鼠身体下1/3部分浸人22℃水中15 min,6 h后处死并取出睾丸样品。采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的脱氧三磷酸尿苷(dUTP)缺口末端标记法检测细胞凋亡;用Westerm blot和免疫组织化学技术检测睾丸组织组织磷酸化钙/钙调蛋白依赖性蛋白繳酶II(p-CaMKI)蛋白的表达。结果阴囊热应激能够使睾丸发生明显的病理学损伤,引起小鼠睾丸生殖细胞凋亡。Westemblot和免疫组织化学技术检测结果均表明,热应激组睾丸组织p-CaMK II、p-ERK1/2蛋白的表达水平明显高于对照组。结论单次热应激能激活睾丸CaMKII,CaMKII的激活可能在热诱导睾丸生殖细胞调亡中起重要作用且CaM-℃aMK II和ERK1/2信号通路可能参与其中。
- 吴震朱文祥刘洪茂穆柯瀚姬艳丽
- 关键词：热应激睾丸生殖细胞凋亡
- 短暂轻度阴囊热应激对小鼠睾丸的损害作用被引量：2
- 2016年
- 目的探讨单次、短暂、轻度阴囊热处理(43℃,15 min)对小鼠睾丸的损害作用。方法 24只成年ICR雄性小鼠,随机分为4组。将热处理组小鼠身体的下1/3部分浸于43℃恒温水浴中15 min,于热处理后0.5 h、2 h和6 h取睾丸组织。将对照组小鼠下腹部浸入22℃水浴15 min,6 h后处死取睾丸组织。采用HE染色对睾丸组织进行病理学检查,采用TUNEL方法检测细胞凋亡,采用western blotting检测睾丸caspase-3蛋白表达。结果热处理后6 h小鼠睾丸组织生精小管间隙增大,生精小管内细胞排列紊乱,胞浆空泡化明显,核固缩细胞增多,多核精细胞显著增加。与阴性对照组相比,阴囊热处理能够显著诱导小鼠睾丸生殖细胞凋亡,增加睾丸组织裂解型caspase-3蛋白的表达。结论单次、短暂、轻度阴囊热处理(43℃,15 min)能够明显引起睾丸病理组织学损伤,诱导睾丸生殖细胞凋亡。
- 穆柯瀚曹博阳姬洋吴一鹏卫霞刘洪茂姬艳丽徐德祥
- 关键词：应激生殖细胞
