许鹏飞 作品数:13 被引量:64 H指数:5 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省医学重点学科基金 江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
C17orf76-AS1在卵巢上皮癌中的表达及其对卵巢上皮癌细胞SKOV3生物学功能的影响 2017年 目的检测C17orf76-AS1在正常卵巢上皮细胞与卵巢上皮癌细胞系中的表达情况并探讨C17orf76-AS1过表达对卵巢上皮癌细胞系SKOV3生物学功能的影响。方法通过定量PCR(QPCR)方法检测C17orf76-AS1在在卵巢上皮细胞IOSE80及不同卵巢上皮癌细胞系(A2780、SKOV3、OVCAR3、HO-8910和HO-8910PM)中的表达。在pc DNA3.1基础上构建C17orf76-AS1过表达质粒并采用Lipo2000瞬时转染SKOV3细胞,QPCR检测SKOV3细胞中C17orf76-AS1的过表达效率;CCK-8实验检测C17orf76-AS1过表达对SKOV3细胞增殖的影响;Transwell法和划痕实验检测C17orf76-AS1过表达对SKOV3细胞侵袭迁移能力的影响。结果与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,C17orf76-AS1在A2780、SKOV3、OVCAR3、HO-8910及HO-8910PM细胞中均呈低表达,分别下降了0.36、0.30、0.46、0.32、0.31倍(P<0.05)。在SKOV3细胞中过表达C17orf76-AS1,CCK-8结果显示C17orf76-AS1过表达48 h后,SKOV3的增殖能力显著下降了约1.5倍;Transwell结果显示SKOV3细胞迁移能力下降约1.3倍,划痕实验也同样证实过表达C17orf76-AS1后,SKOV3细胞愈合能力显著低于对照组(P<0.05)。结论C17orf76-AS1在卵巢上皮癌细胞中异常低表达,其过表达显著降低了卵巢癌细胞增殖和迁移能力。 樊卫民 许鹏飞 付子毅 陈云关键词:卵巢上皮癌 长链非编码RNA 增殖 孕中期红细胞叶酸水平对大于胎龄儿和子代肥胖的影响 季晨博 谢开鹏 付子毅 许鹏飞 祝丽珺 崔县伟 尤梁惠 文娟 郭锡镕应用基因芯片技术检测非综合征型耳聋基因突变 被引量:25 2010年 目的:应用遗传性耳聋基因芯片对散发性聋患者进行分子病因学检测,评估其在遗传性耳聋快速基因诊断中的可靠性。方法:门诊收集散发性聋患者10例,取外周血,提取基因组DNA,用遗传性耳聋基因芯片检测4个中国人中常见的耳聋相关基因中的9个热点突变,包括GJB2(35delG、176del16bp、235delC及299delAT)、GJB3(C538T)、SLC26A4(IVS7-2A>G、A2168G)和线粒体DNA 12S rRNA(A1555G、C1494T)。同时,PCR扩增GJB2、线粒体12S rRNA基因全序列,DNA测序,以验证基因芯片检测结果的准确性。结果:在10名耳聋患者中,基因芯片方法检出1例携带线粒体DNA 12S rRNA C1494T突变;2例GJB2基因235delC纯合突变;2例235delC杂合突变;SLC26A4基因和GJB3基因未检出突变。基因芯片的结果与测序结果完全一致。结论:遗传性耳聋基因芯片技术对中国人常见耳聋相关基因热点突变的检出率高,结果准确、可靠,具有快速、高通量、高准确性、低成本等特点,能够满足临床耳聋基因检测的要求,同时结合产前诊断技术能有效预防耳聋患儿的出生,因而具有广阔的临床应用前景。 张艳 卞颖华 许鹏飞 黄辰飞 曹新 邢光前 魏钦俊关键词:耳聋 GJB2基因 线粒体DNA 基因芯片 孕中期红细胞叶酸水平与妊娠结局的前瞻性队列研究 谢开鹏 许鹏飞 付子毅 文娟 祝丽珺 崔县伟 尤梁惠 季晨博 郭锡熔lncRNA TUG1对卵巢癌细胞OVCAR3的增殖迁移及能量代谢的影响 被引量:11 2019年 目的探讨lncRNA TUG1在卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌OVCAR3细胞增殖迁移及能量代谢的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测TUG1在卵巢上皮癌细胞(A2780、SKOV3、OVCAR3)及正常卵巢上皮细胞IOSE80中的表达。合成TUG1干扰片段转染OVCAR3细胞(干扰组),另设阴性对照组(NC组),QPCR验证TUG1的干扰效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell和划痕实验检测细胞迁移能力,采用Seahorse能量分析仪检测细胞糖酵解压力及线粒体压力变化。结果 QPCR检测结果显示,与正常卵巢细胞IOSE80比较,卵巢癌SKOV3、OVCAR3细胞中的TUG1表达显著增加(P <0. 05)。CCK-8实验结果显示,NC组24、48 h时吸光值(A)值分别为0. 65±0. 01和0. 71±0. 01,显著高于干扰组的0. 48±0. 07和0. 50±0. 08,差异有统计学意义(P <0. 05)。干扰组48 h每个视野下穿膜细胞数为(46±15)个,显著少于NC组的(120±35)个;划痕实验也证实TUG1干扰后OVCAR3细胞迁移能力显著下降。Seahorse结果显示,干扰TUG1表达能显著降低OVCAR3细胞的线粒体呼吸和糖酵解通量。结论 lncRNA TUG1高表达可促进卵巢癌细胞的增殖迁移能力及能量代谢能力。 徐苏娟 付子毅 刘丝雨 许鹏飞关键词:卵巢癌 能量代谢 增殖 迁移 微囊藻毒素-LR通过PI3K/AKT信号通路促进黑色素瘤细胞侵袭和肿瘤转移 目的:微囊藻毒素MC-LR是蓝藻分泌的一种七环肽次级代谢产物,越来越多的证据表明,微囊藻毒素-LR可以促进人类肿瘤发生。而我们之前的研究已经证明微囊藻毒素-LR可以促进黑色素瘤细胞系MDA-MB-435的侵袭,但是进一步... 许鹏飞关键词:微囊藻毒素-LR PI3-K/AKT 文献传递 肺癌组织及细胞中MED27的表达及意义 被引量:1 2017年 目的探讨中介因子复合体(mediator 27,MED27)在肺癌组织样本和肺癌细胞中的表达并进一步观察MED27在肺癌细胞中的生物学功能。方法采用免疫组化法和Western blot法检测MED27在70例肺癌组织以及5种不同肺癌细胞中的表达,分析MED27蛋白表达与肺癌临床病理特征的相关性;设计沉默MED27基因的siRNA,利用Western blot法检测MED27siRNA在肺癌细胞中的沉默效率;CCK-8法检测细胞增殖能力的变化,划痕和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力的变化;Western blot法检测迁移侵袭相关蛋白的变化。结果免疫组化和Western blot检测结果表明,MED27在肺癌组织以及肺癌细胞系中的表达水平明显上调(P<0.05)。MED27表达与淋巴结转移呈正相关(χ2=9.438,P=0.002,P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤T分期、远处转移等均无相关性(P>0.05);利用小干扰RNA沉默MED27的表达,可以抑制H460细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。同时,迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达明显下调,侵袭相关蛋白E-cadherin表达也明显下调,而E-cadherin的负性调控蛋白Snail表达升高。结论 MED27在肺癌组织和细胞系中高表达,且MED27阳性肺癌患者预后更差。沉默MED27的表达可以抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以上结果提示MED27可以作为临床肺癌基因治疗的潜在靶标。 朱晓静 许鹏飞 曹彦 谢开鹏 唐冉冉关键词:肺肿瘤 迁移 卵巢癌发病机制与临床干预靶点的研究 贾雪梅 徐娟 许鹏飞 张慧林 曹剑 沈宇 卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤,严重威胁女性生命。其通常发病隐匿,转移较早,70%的患者发现时已存在腹腔转移或/和淋巴结转移及远处转移,因此以铂类为基础、联合紫杉醇化疗是卵巢癌最主要的治疗手段,然而大部分卵巢癌患者在初...关键词:关键词:卵巢癌 妇科恶性肿瘤 D-二聚体和CA125联合检测在卵巢肿瘤诊断中的应用 被引量:7 2017年 目的:研究联合检测D-二聚体和CA125在卵巢恶性肿瘤早期诊断中的应用价值及D-二聚体在卵巢恶性肿瘤中的分布特点。方法:选择109例卵巢肿瘤患者,经病理确认,分为卵巢良性肿瘤组(59例)和卵巢恶性肿瘤组(50例),同时选择同期健康体检者30例。测定各组患者血清中CA125水平和血浆中D-二聚体水平。比较CA125和D-二聚体在各组织之间的表达差异。结果:D-二聚体和CA125联合检测在卵巢恶性肿瘤早期诊断中的检出率更高;D-二聚体在卵巢恶性肿瘤晚期患者中的水平明显高于早期患者;在浆液性卵巢恶性肿瘤中D-二聚体的水平明显高于非浆液性卵巢恶性肿瘤的患者。结论:联合检测D-二聚体和CA125在卵巢恶性肿瘤中的应用价值更大,尤其是晚期卵巢恶性肿瘤。 刘光泉 吴佳聪 徐娟 许鹏飞 贾雪梅关键词:血浆D-二聚体 血清CA125 卵巢恶性肿瘤 外周血循环miRNA诊断卵巢癌的Meta分析 被引量:7 2016年 目的综合评价外周血循环微小RNA(microRNA,miRNA)对卵巢癌的诊断价值。方法全面检索Pub Med、The Cochrane Library、ISI Web of Science、CNKI、万方和维普数据库,按照纳入与排除标准收集从各数据库建库至2015年5月发表的关于运用外周血循环miRNA表达水平诊断卵巢癌的文献,应用Meta-Di Sc 1.4软件进行Meta分析。结果共9项关于外周血循环miRNA诊断卵巢癌的研究纳入本次分析,共1 068例研究对象。Meta分析结果显示,外周血循环miRNA诊断卵巢癌的合并敏感度和合并特异性分别为0.74(95%CI:0.71~0.78)和0.76(95%CI:0.72~0.80),合并诊断阳性似然比和阴性似然比分别为3.03(95%CI:2.17~4.21)和0.32(95%CI:0.25~0.43),合并诊断比值比为10.70(95%CI:6.82~16.78)。总受试者工作特征曲线下面积为0.83,Q*值为0.77。结论外周血循环miRNA对卵巢癌具有一定的诊断价值。 曾玉 许鹏飞 陈辰 顾平清