陈思禹
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- K-ras原核表达载体的构建及生物学功能研究
- 2017年
- 目的:构建带Myc标签的K-ras原核表达载体,并初步鉴定其生物学活性。方法:利用PCR技术从人乳腺文库中扩增人K-ras结构域的基因编码序列,插入载体p XJ-40得到重组质粒,经Bam HⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定后,Western印迹检测其在人293T细胞中的表达;利用GST pull down实验检测与Raf1-RBD的结合情况,验证其生物性活性。结果:用PCR技术从人乳腺文库中扩增得到约570 bp的目的片段,插入载体p XJ-40后构建了Myc-K-ras重组质粒,并经酶切鉴定及测序证实无误;Myc-K-ras能在293T细胞中正确表达,并能与Raf1-RBD结合,具有生物学活性。结论:为进一步研究K-ras的生物学功能奠定了重要基础。
- 陈思禹崔越洪甜李玲晋帅黄俊尤文叶韩笑叶棋浓刘阳王钰琦
- 关键词：原核表达
- 食管鳞状细胞癌预后甲基化基因生物标志物筛选被引量：1
- 2020年
- 目的鉴定食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)甲基化生物标志物,预测ESCC患者预后。方法从癌症基因组图谱数据库(the cancer genome atlas,TCGA)下载ESCC和正常样本基因组甲基化数据及临床信息。所有ESCC样本随机分为验证组和训练组。采用Cox比例风险回归模型和随机生存森林算法在训练组中鉴定甲基化生物标志物。并使用时间依赖性ROC曲线来评估该模型的性能。在验证组中对该模型进行验证。通过GO功能注释,探讨DNA甲基化标志物的生物学功能。结果鉴定出差异甲基化基因283个,并从中筛选出与生存相关的4个甲基化基因(RRAGB、SYP、ERCC6L和RNASEH2CP1)作为预后的生物标志物。训练组和验证组ROC曲线下面积(AUC)分别为0.984和0.83。该生物标志物能够将训练组患者分为高风险组、低风险组,并在验证组中得到相似的结果。多因素Cox回归分析表明,甲基化基因生物标志物是ESCC患者预后的独立预测因素。功能分析表明,这些标志物基因参与转录调控与DNA结合。结论筛选出预测ESCC预后的甲基化基因标志物,是独立的预后预测因子。
- 赵明陈思禹王钰琦
- 关键词：食管鳞状细胞癌预后
- 人ERK2基因对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响
- 2017年
- 目的:构建携带Myc标签的人细胞外信号调节激酶2(ERK2)的真核表达载体,表达Myc-ERK2融合蛋白,检测其对人视网膜母细胞瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从乳腺文库中扩增人ERK2基因序列,将其插入pXJ-40载体;将重组质粒与空载体转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞系后,Western印迹检测表达情况,并进行生长曲线实验。结果:双酶切和测序鉴定表明Myc-ERK2真核表达质粒构建成功;转染WERI-Rb-1细胞后融合蛋白获得表达,生长曲线实验结果表明ERK2可促进肿瘤细胞的生长。结论:携带Myc标签的人ERK2基因的真核表达载体能在人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞中表达,且能促进该细胞的生长。本实验为进一步研究ERK2在肿瘤尤其是眼恶性肿瘤中的功能奠定了基础。
- 韩笑刘莹梁迎春闫志风徐小洁梁九思洪甜尤文叶陈思禹黄俊叶棋浓刘丹
- 关键词：真核表达
- 新辅助化疗联合免疫抑制剂对Ⅲ期非小细胞肺癌治疗有效性分析
- 2024年
- 目的探讨新辅助化学药物治疗(以下简称化疗)联合免疫抑制剂对Ⅲ期非小细胞肺癌的短期治疗效果及安全性。方法选取2021年1月至2024年2月解放军总医院第六医学中心的Ⅲ期非小细胞肺癌患者53例,均行新辅助化疗联合免疫治疗,以21 d为一个周期,治疗中评估安全性及治疗结束时评估疗效。结果影像学评估显示,完全缓解8例,部分缓解34例,疾病稳定8例,疾病进展3例,客观缓解率为79.2%,疾病控制率为94.3%。新辅助治疗后经影像学评估及科室讨论后53例患者均实施微创胸腔镜肿瘤切除术,无中转开胸患者,术后并发症10例,发生率18.7%,1例患者术后出现严重肺部感染致呼吸衰竭死亡。术后组织病理学评估显示,完全缓解15例、部分缓解32例、疾病稳定5例、疾病进展1例,主要病理缓解33例(62.3%),客观缓解率为88.7%,疾病控制率98.1%。不良反应主要为1、2级,仅出现3例3级不良事件,无4级不良反应。结论新辅助化疗联合免疫治疗对于局部晚期非小细胞肺癌具有较好的疗效及安全性,值得进一步推广应用。
- 王居巳宋伟安狄守印刘军强范博士周少华岳彩迎赵嘉华陈思禹龚太乾
- 关键词：非小细胞肺癌新辅助治疗免疫治疗
- 微创食管切除术联合三野或二野淋巴结清扫术治疗食管鳞状细胞癌257例近期疗效的回顾性队列研究被引量：1
- 2024年
- 目的比较食管鳞状细胞癌(鳞癌)患者接受微创食管切除术(minimally invasive esophagectomy,MIE)联合三野淋巴结清扫术(three-field lymphadenectomy,3-FL)或二野淋巴结清扫术(two-field lymphadenectomy,2-FL)的短期结果,探讨食管癌微创3-FL的安全性。方法回顾性分析2015年7月—2022年3月于解放军总医院第六医学中心胸外科行MIE(McKeown术式)患者的临床资料。根据淋巴结清扫方式,将患者分为3-FL组和2-FL组,比较两组患者的临床资料和术后并发症。结果共257例食管鳞癌患者纳入研究,其中男211例、女46例,平均年龄(62.2±8.1)岁。3-FL组109例,2-FL组148例。3-FL组手术时间较2-FL组长约20 min,差异有统计学意义(P<0.001);两组术中出血量差异无统计学意义(P=0.376)。3-FL组比2-FL组清扫淋巴结个数更多(P<0.001)以及获得阳性淋巴结数更多(P=0.003),且两组病理N分期差异有统计学意义(P<0.001)。但3-FL组和2-FL组吻合口瘘(P=0.667)、乳糜瘘(P=0.421)、喉返神经损伤(P=0.081)、肺部并发症(P=0.601)、肺炎(P=0.061)、心脏并发症(P=0.383)、总并发症(P=0.147)发生率差异无统计学意义。两组术后并发症严重程度(Clavien-Dindo分级)差异也无统计学意义(P=0.152)。结论微创食管癌3-FL可提高淋巴结的清扫率及肿瘤淋巴结分期的准确性,但不增加手术风险,值得临床推广应用。
- 孙曾锋刘军强范博士宋伟安岳彩迎狄守迎赵嘉华周少华东海王居巳陈思禹龚太乾
- 关键词：食管鳞癌三野淋巴结清扫术
- 人Six1基因促进肺腺癌细胞A549的增殖被引量：1
- 2017年
- 目的:构建带有Flag标签的Six1基因的慢病毒表达载体,并对表达产物Flag-Six1的生物学功能进行初步鉴定。方法:以实验室构建的真核表达载体myc-Six1为模板,根据实验需求合成引物,经PCR扩增,酶切后插入pCDHFlag载体,Western印迹检测其在人293T细胞中的表达;经Western印迹鉴定无误后,与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染人肺癌细胞A549,经嘌呤霉素筛选2周,收集部分细胞,用Western印迹验证蛋白水平的表达,并通过细胞生长实验检测Six1对A549细胞生长的影响;提取RNA,通过qRT-PCR检测细胞中血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)在mRNA水平的变化。结果:构建的慢病毒表达载体pCDH-Flag-Six1能够在293T细胞中正确表达;包装成慢病毒,感染肺癌细胞A549后可正常表达;生长曲线表明Flag-Six1可促进人肺癌细胞A549的繁殖;qRTPCR结果表明Six1可升高肺癌细胞A549的VEGF-C转录水平。结论:构建了带pCDH-Flag标签的人Six1基因慢病毒表达载体,Flag-Six1能够在肺癌细胞系A549中表达,并能促进细胞增殖,这为进一步研究Six1的生物学功能奠定了重要基础。
- 陈思禹李玲晋帅洪甜黄俊尤文叶韩笑崔越叶棋浓王钰琦
- 关键词：慢病毒表达载体生物学功能
- 术前3D重建、术中CT定位荧光胸腔镜下右肺下叶外后基底段精准切除术被引量：4
- 2018年
- 肺段切除术历史悠久,1939年,Churchill和Belsey[1]进行了首例左上肺舌段切除用于治疗结核性肺不张。早期肺癌的治疗,在1960年以前,一侧全肺切除被认为是金标准。但随着人们对肺门结构解剖认识的深入以及肺叶切除术的技术成熟,在20世纪60年代,肺叶切除+系统性淋巴结清扫被确立为治疗早期肺癌的标准术式[2]。虽然Churchill早在1958年就开始将肺段切除术应用于早期肺癌的治疗,但对于早期外周型非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的最佳术式的选择一直存在争议。1995年,Ginsberg和Rubinstein[3]报道了1982年至1988年开展的比较亚肺叶切除(楔形切除后肺段切除)和肺叶切除的临床研究,该研究结果表明,亚肺叶切除的局部复发率、肺癌相关病死率均高于肺叶切除。
- 马永富姚洁陈瑞骥李宬润李云婧陈思禹杨博郭俊唐梁朝阳刘阳
- 关键词：肺段切除术3D重建右肺下叶CT定位胸腔镜术前
- 糖代谢与肿瘤化疗靶向药物耐药关系研究进展被引量：2
- 2018年
- 恶性肿瘤严重危害人类健康,其发病率和死亡率不断上升。目前临床上治疗恶性肿瘤主要以手术、放化疗和分子靶向治疗为主。近几年,抗肿瘤分子靶向治疗取得了长足进步,与传统的放化疗联合应用获得了更好的疗效。肿瘤多药耐药是临床上化疗和靶向治疗失败的最主要原因之一。产生耐药的肿瘤细胞不仅仅对已使用过的抗肿瘤药物耐药,对未曾使用过的治疗肿瘤和作用机理不同的多种药物也会产生耐药。这种肿瘤的多药耐药,往往是多种耐药蛋白参与及不同机制共同作用的结果。肿瘤细胞能量代谢依赖于糖酵解和氧化磷酸化,而有氧糖酵解是肿瘤细胞能量代谢的重要途径。我们就肿瘤细胞糖酵解调节机制与耐药的关系做简要分析和综述。
- 陈思禹王钰琦
- 关键词：糖酵解肿瘤化疗肿瘤靶向治疗耐药
