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葡萄叶片芪类物质积累对UV-C氧化胁迫的响应作用: 2015年; 【目的】紫外引起葡萄叶片芪类物质白藜芦醇积累是一种常见的辐射效应,研究积累与UV-C引起的氧化胁迫关系。【方法】采用UV-C对离体红地球葡萄叶片进行胁迫;应用荧光照相与HPLC分析芪类物质变化特征,利用RT-PCB分析其生物合成途径基因表达规律,DAB检测叶片活性氧水平,分光光度法测定丙二醛水平,依文思蓝检测叶片细胞死亡程度。【结果】以22.5(W.h)/cm^2UV-C辐射叶片后白藜芦醇的含量最大,达到158μg/g鲜重。同一叶片左右差异明显,辐射处理一侧芪类物质含量、活性氧水平和细胞死亡程度明显高于未处理一侧;经辐射后的叶片中的MDA含量高于对照组;加抗氧化剂CAT和NAC可明显降低UV-C对白藜芦醇诱导效果。【结论】UV-C辐射导致离体红地球葡萄叶片氧化胁迫受损,其变化在空间和时间上与芪类物质白藜芦醇积累密切相关。; 李月荣颜欢张波黄方爱黄方爱杨晓燕; 关键词：葡萄叶片氧化胁迫 UV-C 次生代谢

葡萄芪类物质的研究进展被引量：4: 2012年; 芪类物质(stilbenes),属于植保素(Phytoalexin),因其具有抑菌、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性,越来越受到人们的重视。而作为天然芪类化合物的代表的白藜芦醇也成为最近研究的热点。本文就芪类化合物的最新研究进展情况进行综述,以期为进一步研究该类成分提供科学依据。; 黄方爱张波杨晓燕颜欢陈韩英郑秋生; 关键词：白藜芦醇葡萄

H_2O_2对葡萄离体叶片白藜芦醇的诱导作用被引量：7: 2012年; 【目的】葡萄叶片白藜芦醇含量较虎杖根含量低,难以作为药用提取用途,研究采用诱导剂升高葡萄离体叶片中白藜芦醇的含量。【方法】实验采用H_2O_2对离体红地球葡萄叶片进行诱导,采用薄层及高效液相色谱法分析白藜芦醇的含量变化,并使用RT-PCR方法分析芪合酶基因(STS)的表达量变化。【结果】H_2O_2对离体叶片芪类物质具有显著的诱导作用,诱导白藜芦醇的积累呈现显著的量时依赖性;5%H_2O_2处理48 h后叶片白藜芦醇含量可提高15倍以上,鲜重达到263μg/g。【结论】H_2O_2可以作为葡萄离体叶片白藜芦醇的有效诱导剂。; 黄方爱张波杨晓燕颜欢陈韩英郑秋生; 关键词：白藜芦醇过氧化氢葡萄叶片

3种非生物诱导剂对红地球葡萄离体叶片中主要茋类物质的诱导作用被引量：4: 2012年; 茋类物质是葡萄材料中一大类具有特殊药理活性的天然产物,实际操作中由于葡萄叶片含量过低而导致利用率不足。已有报道UV、氯化铝、过氧化氢等非生物诱导剂能够引起一些植物材料茋类物质的积累的同时又能引起材料氧化胁迫。为了研究这3种诱导剂在葡萄离体叶片上的诱导特性及与氧化胁迫的关系,本文首次使用上述3种诱导剂对红地球葡萄离体叶片中4种主要茋类物质含量变化进行分析,并研究过氧化氢酶(CAT)及N-乙酰-L-半胱氨(N-acetyl-L-cysteine)预处理后茋类物质变化规律。诱导剂处理后,白藜芦醇、白藜芦醇苷、紫檀茋、ε-viniferin等茋类物质都有不同程度的升高,其中紫外照射处理10min,暗室放置24h对白藜芦醇的诱导效果最为明显,鲜重达到200μg/g。加完抑制剂CAT和NAC后,茋类物质变化不规律,其中H2O2诱导加抑制剂CAT对白藜芦醇的抑制效果最佳,含量从113μg/g降低到16.5μg/g。结果说明,3种诱导剂对红地球葡萄离体叶片茋类物质类别及其含量具有特殊的影响作用,且此与材料内部氧胁迫水平存在一定联系。; 黄方爱张波杨晓燕颜欢陈韩英郑秋生; 关键词：诱导剂白藜芦醇葡萄离体叶片

适合转录组测序的葡萄叶片总RNA试剂盒提取法的改进被引量：13: 2013年; RNA试剂盒法是获取植物高质量RNA样品的常用技术,针对3种常见RNA提取试剂盒在红地球葡萄叶样品RNA提取效果进行评估和优化,以期找到适合红地球葡萄叶片RNA表达谱测序需求的高质量RNA提取策略。试验依据3种试剂盒推荐时间和条件进行RNA提取,并对时间等条件进行优化,比对了优化前后RNA质量。结果显示,试剂盒经优化后的方法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280在1.8-2.2之间,OD260/OD230大于2,28S与18S条带清晰完整,RNA-Seq测序质量及基因覆盖度符合要求。在红地球葡萄叶片上的RNA提取结果表明,延长提取试剂与样品的接触时间操作可以显著提高RNA提取质量(纯度/完整性)。; 杨晓燕张波黄方爱黄方爱颜欢李月荣; 关键词：红地球葡萄 RNA提取

孵育时间对UV-C辐射处理离体葡萄叶片茋类物质含量和种类的影响被引量：4: 2013年; 【目的】茋类物质是一类重要的次生代谢产物,其在葡萄属植物中承担了重要的病理及生理作用。以往研究发现UV-C照射会引起茋类物质白藜芦醇含量升高,研究UV-C照射后离体叶茋类物质含量与时间的变化关系及与叶龄的关系。【方法】采用不同叶龄的红地球葡萄离体叶片为材料,应用HPLC检测UV-C处理后的不同孵育时间叶片茋类物质的变化规律,以及叶龄对诱导效果的影响特征,同时利用RT-PCR技术对其生物合成途径限速酶基因表达规律进行研究。【结果】UV-C处理后随暗孵育时间的增加,老叶中的茋类物质比率及种类变化较大。诱导后24 h时白藜芦醇苷达到376μg/g,白藜芦醇高达258μg/g,紫檀茋515μg/g,ε-viniferin达到22μg/g,分别是空白组的1.6、50、100以及62倍。【结论】在UV-C处理离体葡萄叶后,叶龄和暗孵育时间对叶片的茋类物质的积累有重要的影响。老叶在UV-C辐射后24 h茋类物质的种类最多,总含量较高。; 颜欢张波赵文彬赵文彬杨晓燕黄方爱; 关键词：UV-C 叶龄

过氧化氢诱导不同色素水平葡萄愈伤组织白藜芦醇及白藜芦醇苷含量差异被引量：2: 2015年; 以不同状态的"红地球"葡萄愈伤组织为试材,采用高效液相色谱法,研究H2O2对其白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的影响。结果表明:经H2O2诱导后3种愈伤组织中白藜芦醇苷含量为:红色愈伤组织>褐化的愈伤组织>白色愈伤组织,而白藜芦醇在白色愈伤组织中的含量高于红色和褐化的愈伤组织。2.5μM H2O2诱导红色愈伤组织24h后,白藜芦醇苷含量高达306μg/gFW,而白藜芦醇的含量变化不明显。红色愈伤组织中的白藜芦醇苷响应H2O2的胁迫较为明显,其对H2O2最佳的响应浓度为2.5μM。; 李月荣颜欢张波杨晓燕杨晓燕李荣飞; 关键词：白藜芦醇白藜芦醇苷过氧化氢

葡萄叶片中提取总RNA的三种方法比较被引量：10: 2013年; 采用试剂盒法、热酚法和LiCl沉淀法3种方法提取葡萄叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和Agilent 2100计检测总RNA的完整性和提取纯度。对红地球葡萄叶片总RNA提取方法做比较,以得到完整的、高质量的葡萄RNA。结果表明:LiCl沉淀法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280均在1.80～2.00,纯度高,28S、18S条带清晰完整。可以满足后续分子生物学的研究。; 杨晓燕张波黄方爱黄方爱颜欢; 关键词：总RNA

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颜欢