吴剑华
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：兰州大学药学院更多>>
- 发文基金：甘肃省国际合作计划甘肃省中青年科技研究基金环境化学与生态毒理学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 墓头回提取物作用白血病K562细胞蛋白双向电泳方法的建立被引量：2
- 2011年
- 目的建立适用于体外培养的K562细胞总蛋白的双向电泳图谱,提高电泳分辨率和重复性,以进一步了解中药墓头回作用于白血病细胞的新机制。方法采用标准裂解法提取K562细胞总蛋白,后续进行丙酮沉淀和三氯乙酸/丙酮沉淀,分别比较一步裂解法所得蛋白和丙酮沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱,优选最佳的样品制备方法。此外在等电聚焦时,聚焦电压在传统聚焦条件上进行优化。结果 丙酮沉淀法不仅能减少蛋白降解,而且增加蛋白的溶解性,因此丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱显示出更好的溶解性和重复性,在聚焦条件上对传统聚焦条件的优化使横向和纵向拖尾有明显改善,所得图谱蛋白点更清晰,分离更完全,能获得分辨率较高的双向电泳图谱。结论 在标准裂解液提取蛋白基础上结合丙酮沉淀法更适于制备K562细胞的双向电泳样品,等电聚焦(IEF)电泳时适当延长除盐时间能更有效的分离K562细胞全蛋白,而且后续实验证明此方法同样成功建立了墓头回作用白血病K562细胞蛋白和肿瘤组织蛋白2-DE图谱。
- 刘婷婷卫东锋赵春燕苏刚吴剑华卢艳曹慧明程卫东
- 关键词：K562细胞双向电泳墓头回
