李南
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:广东医学院附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 靶向IGFBP7慢病毒载体遏制恶性黑素瘤的实验研究被引量:1
- 2015年
- 目的构建靶向IGFBP7的LV5病毒表达载体,并检测其表达效能及在黑素瘤细胞系中促凋亡的作用。方法以人igfbp7基因序列作为模版合成编码核酸序列,通过限制性内切酶NotⅠ和NsiⅠ酶切、T4 DNA连接酶连接,将igfbp7插入LV5-GFP,构建靶向IGFBP7的慢病毒质粒表达载体,筛选阳性克隆后与包装质粒通过脂质体共转染SK-MEL-28人黑素瘤细胞株,对照组转染LV5空载体。病毒感染SK-MEL-28,采用荧光显微镜观察感染的效率,Realtime PCR检测igfbp7m RNA的表达,流式细胞术检测对照组及处理组细胞凋亡率。统计数据分析LV5-NC-IGFBP7促黑素瘤凋亡的效9能。结果成功构建LV5-NC-IGFBP7,病毒转染后测定其滴度为1x10 UT/m L,细胞感染率在80%以上,Realtime PCR检测表明处理组igfbp7 m RNA表达高于对照组(P<0.01),但对照组及处理组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论靶向IGFBP7的LV5-NC-IGFBP7病毒载体能有效促进igfbp7 m RNA高表达,但促恶性黑素瘤凋亡的效能有待提高。
- 陈嵘祎阿彩岭李南潘紫凤蔡川川罗世英
- 关键词:病毒载体IGFBP7恶性黑素瘤