李玲 作品数:8 被引量:34 H指数:3 供职机构: 上海中医药大学附属曙光医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
黄芪甲苷调控外泌体介导的JMJD3/H3K27me3/OPN通路抗结直肠癌肝转移机制研究 2023年 目的研究黄芪甲苷(ASⅣ)抑制结直肠癌肝转移的作用机制,探索ASⅣ对外泌体介导的Jumonji结构域包含蛋白3(JMJD3)/第27位的赖氨酸三甲基化的组蛋白H3(H3K27me3)/骨桥蛋白(OPN)信号通路的影响。方法取对数生长期的MC38细胞,超速离心法提取MC38细胞外泌体(MC38-EVs)及ASⅣ干预后MC38细胞外泌体(ASⅣ/MC38-EVs),粒径鉴定后用于动物实验。选取C57BL/6J小鼠15只,建立结直肠癌原位肝转移模型后,按照随机数字表法分为模型组、MC38-EVs组、ASⅣ/MC38-EVs组,每组5只。模型组造模前1周尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS),100μL/次,隔日1次,连续3周;MC38-EVs组和ASⅣ/MC38-EVs组造模前1周尾静脉分别注射0.1 g/L的MC38-EVs、ASⅣ/MC38-EVs,100μL/次,隔日1次,连续3周。4周后处死小鼠,观察结直肠癌肝转移情况;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝转移灶病理学改变;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝转移灶中JMJD3、H3K27me3、OPN蛋白表达情况;免疫荧光法检测肝转移灶中F4/80+、CD206+巨噬细胞的浸润和JMJD3、H3K27me3、OPN蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测瘤体中JMJD3、OPN mRNA表达。结果与模型组比较,MC38-EVs组肝转移灶数目和肝脏质量明显增加(P<0.05);与MC38-EVs组比较,ASⅣ/MC38-EVs组肝转移灶数目和肝脏质量明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示,与模型组比较,MC38-EVs组中肝组织F4/80+、CD206+巨噬细胞浸润程度明显升高(P<0.05);与MC38-EVs组比较,ASⅣ/MC38-EVs组中肝组织巨噬细胞浸润程度明显降低(P<0.05);Western blot、RT-qPCR和免疫荧光结果显示,与模型组比较,MC38-EVs组JMJD3、OPN蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),H3K27me3蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与MC38-EVs组相比,ASⅣ/MC38-EVs组JMJD3、OPN蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.05),H3K27me3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论ASⅣ能够有效抑制结直肠癌肝转移,其机制与调控外泌体介导的J 李玲 季青 周晶关键词:结直肠癌 肿瘤转移 黄芪甲苷 外泌体 肿瘤相关巨噬细胞 左金丸逆转KRAS突变型大肠癌西妥昔单抗耐药的作用机制研究 被引量:3 2023年 目的探讨左金丸(ZJW)对KRAS突变型大肠癌西妥昔单抗(CET)耐药的逆转作用及其机制。方法①常规培养KRAS突变人结肠癌细胞HCT116,通过细胞增殖率(CCK-8法检测)确定ZJW无毒剂量(即10 mg·L^(-1)),观察ZJW、CET的协同效应(ZJW 10 mg·L^(-1)与CET 100、200 mg·L^(-1)具有协同效应,本研究选择CET 100 mg·L^(-1)进行后续实验)。将处于对数生长期的HCT116细胞分为对照组、CET 100 mg·L^(-1)组(CET组)、ZJW 10 mg·L^(-1)组(ZJW组)、CET 100 mg·L^(-1)+ZJW 10 mg·L^(-1)组(ZJW+CET组),作用48 h;采用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡情况,Western blot法检测细胞中核因子-κB p65(NF-κB p56)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达情况,免疫荧光法检测细胞中NF-κB p65、磷酸化核因子-κB p65(p-NF-κB p65)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测细胞中NF-κB p65、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达情况。②将HCT116细胞皮下注射于裸鼠腋下,建立大肠癌皮下移植瘤模型,然后将16只裸鼠随机分为对照组(PBS灌胃)、CET组(CET尾静脉注射,15 mg·kg^(-1))、ZJW+CET组(CET尾静脉注射,15 mg·kg^(-1);ZJW灌胃,2055 mg·kg^(-1))、ZJW组(ZJW灌胃,2055 mg·kg^(-1)),每组4只,连续干预28 d,绘制肿瘤生长图,28 d后剥离肿瘤组织,RT-qPCR法检测皮下移植瘤组织NF-κB p65、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达情况。结果①ZJW在HCT116细胞中的IC_(10)为10.71 mg·L^(-1);CET抑制HCT116增殖的IC_(50)为578.6 mg·L^(-1),与10 mg·L^(-1)左金丸联合使用时IC_(50)值降低为231.3 mg·L^(-1);CET 100、200 mg·L^(-1)与ZJW 5、10 mg·L^(-1)联合使用时,药物联合指数(CI)<1。②与对照组相比,ZJW组、ZJW+CET组细胞S期比例、早期凋亡率升高(P<0.05);与CET组相比,ZJW组细胞S期比例、早期凋亡率升高(P<0.05);与ZJW组相比,ZJW+CET组S期细胞比例、早期凋亡率升高(P<0.05)。③与对照组比较,CET组、ZJW组细胞中Bcl-2表达降低(P<0.05),ZJ 周晶 卫真真 浦匀舟 李玲 朱惠蓉 季青 李红山关键词:大肠癌 左金丸 耐药 中药研究 基于动机行为转化的渐进性康复护理对肺癌化疗患者的影响 被引量:13 2022年 目的 探讨基于动机行为转化的渐进性康复护理对肺癌化疗患者的影响。方法 选取2019年4月至2021年4月间上海中医药大学附属曙光医院收治的60例肺癌化疗患者,采用随机数表法分为观察组和对照组,每组30例。观察组患者采用基于动机行为转化的渐进性康复护理,对照组患者采用常规康复护理,比较两组患者护理前后的生活质量、心理状态及护理满意度。结果 护理后,观察组患者生理能力、心理状况、社会能力和环境适应能力评分均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。护理后,观察组患者焦虑和抑郁评分均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组患者护理满意度为93.3%,高于对照组的73.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 基于动机行为转化的渐进性康复护理可改善肺癌化疗患者的生活质量和心理状态,患者满意度较高,值得临床应用推广。 田君 沈卓婴 李玲关键词:肺肿瘤 动机行为 黄芪甲苷调控肿瘤外泌体生成与分泌抑制结直肠癌转移的作用机制 被引量:1 2023年 目的从调控外泌体分泌角度,探讨黄芪甲苷(ASⅣ)抑制结直肠癌转移的作用及机制。方法①细胞实验:使用低、中、高剂量ASⅣ干预MC38细胞,收集细胞上清提取外泌体;透射电镜(TEM)观察外泌体形态;纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体密度;免疫荧光法和实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测ASⅣ对外泌体生成、分泌相关基因中性鞘磷脂酶-2(nSMase2)、Ras相关蛋白27a(Rab27a)表达的影响;划痕和Transwell实验检测ASⅣ对肿瘤细胞迁移能力的影响。②动物实验:构建小鼠结直肠癌肝转移模型,随机分为模型组、ASⅣ组和鞘磷脂酶抑制剂(GW4869)组,28d后处死小鼠,观察小鼠肝转移情况。苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,免疫荧光法检测肝转移灶内nSMase2、Rab27a的表达。结果①细胞实验结果显示:与对照组比较,ASⅣ干预不改变外泌体形态,但能够通过浓度和时间依赖方式抑制MC38细胞外泌体分泌(P<0.05);与对照组比较,ASⅣ能够减少MC38细胞中nSMase2、Rab27a的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),且呈浓度依赖性;与对照组比较,ASⅣ能够抑制MC38细胞侵袭迁移能力(P<0.05),且呈浓度依赖性。②动物实验结果显示:与模型组比较,ASⅣ能够显著降低小鼠结直肠癌肝转移模型肝组织质量(P<0.05),减少肝转移瘤数量(P<0.05),降低nSMase2、Rab27a蛋白表达(P<0.05);且ASⅣ抑制结直肠癌肝转移的作用与外泌体生成抑制剂GW4869相当(P>0.05)。结论ASⅣ能够调控肿瘤外泌体生成与分泌,进而抑制结直肠癌肝转移。 浦匀舟 李昊泽 李玲 周晶 季青关键词:结直肠癌 黄芪甲苷 外泌体 小鼠模型 中药研究 改良后高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立 2013年 目的:探讨非酒精性脂肪性肝病动物模型的一种快速的建立方法。方法:将30只雄性大鼠随机分为正常组和模型组,分别喂养普通基础饲料和改良后高脂饲料10 w。比较两组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC和肝组织匀浆GGT、TG、GSH含量的变化及肝脏组织学变化。结果:与正常组比较,第10周时模型组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC、TC/HDL-C均明显升高(P<0.05);肝组织匀浆GGT、TG含量升高,GSH含量降低(P<0.05)。正常组大鼠肝组织未见明显脂肪变性及炎症,模型组大鼠在小泡性脂肪变性的基础上伴随淋巴细胞浸润和灶状坏死。结论:改良后高脂饲料可加快非酒精性脂肪性肝病的造模进程,值得推广。 李玲 孙学华 李曼 周振华 高月求关键词:非酒精性脂肪性肝病 动物模型 改良后高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立 目的:探讨一种非酒精性脂肪性肝病的动物模型快速建立的方法.
方法:将30只180~200gSPF级SD雄性大鼠随机分为正常组和模型组,分别喂养普通基础饲料和改良后高脂饲料10周.观察比较治疗前后大鼠血清ALT、... 李玲 孙学华 李曼 周振华 高月求关键词:非酒精性脂肪性肝病 动物模型 造模方法 高脂饮食 文献传递 基于“肝肾同源”理论探讨OPG/RANKL/RANK信号系统在骨转移癌痛中的调控机制 被引量:2 2022年 从肝肾同源理论的应用出发,结合骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子受体活化因子NF-κB配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)/NF-κB受体活化因子(receptor activator for NF-κB,RANK)信号系统在骨代谢中的调控机制,阐释肝肾同源理论应用于临床的客观分子生物学依据,更好地指导临床。 李玲 李菁关键词:骨转移癌痛 肝肾同源 中药离子导入穴位贴敷和康复护理在肺癌根治术后化疗患者中的应用分析 被引量:15 2022年 目的探讨中药离子导入穴位贴敷及康复护理在肺癌根治术后化疗患者中的应用。方法选取2015年12月至2020年12月间上海中医药大学附属曙光医院收治的60例肺癌根治术后患者,采用随机数字表法分为研究组和对照组,每组30例。两组患者均行培美曲塞联合卡铂方案化疗治疗,对照组在化疗后采用康复护理,研究组在对照组基础上采用中药离子导入穴位贴敷,比较两组患者的生活质量和护理满意度。结果化疗结束后,研究组患者的失眠、呕吐与恶心、腹泻、便秘、总健康状况子量表与总量表得分均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。研究组患者护理满意度为93.3%,高于对照组的66.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药离子导入穴位贴敷及康复护理能有效缓解肺癌根治术后化疗患者的不良反应,提高生活质量和护理满意度,值得临床推广运用。 李玲 田君关键词:肺癌根治术 中药离子导入 穴位贴敷 康复护理