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张艳艳
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
南京农业大学动物医学院
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发文基金:
江苏省科技支撑计划项目
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相关领域:
农业科学
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合作作者
杨绪秋
南京农业大学动物医学院
方一臻
南京农业大学动物医学院
范红结
南京农业大学动物医学院
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2014
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产肠毒素大肠杆菌F4菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立
被引量:1
2014年
为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化。确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5%脱脂奶封闭液封闭2 h;血清最佳稀释度为1∶3 200、血清最佳作用时间为1 h;酶标二抗的最佳作用时间为1 h。该方法对F5、F6菌毛阳性血清和猪链球菌阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性。其组内和组间的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。利用建立的间接ELISA方法检测血清并采用PCR方法检测其肛拭子进行符合性试验,其总符合率为96.2%。临床检测312份未经ETEC免疫的猪血清,阳性率为9.9%。表明该方法可以用于ETEC F4菌毛抗体的临床检测。
杨绪秋
方一臻
张艳艳
范红结
关键词:
产肠毒素大肠杆菌
间接酶联免疫吸附试验
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