王占洋
- 作品数：5 被引量：39H指数：3
- 供职机构：石河子大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 白藜芦醇对CdCl_2暴露所致斑马鱼胚胎发育毒性干预作用及机制的初步研究被引量：3
- 2015年
- 为考察天然抗氧化剂白藜芦醇（Res）对CdCl2暴露所致斑马鱼胚胎发育毒性的干预作用，并初步探讨其作用机制。采用单独应用Res联合CdCl：共同处理受精后2h（2hpf）的斑马鱼胚胎，观察至96hpf胚胎死亡率和孵化率；采用荧光探针DCFH—DA、MitoSOX、JC-1分别检测胚胎总体活性氧、线粒体源ROS水平和胚胎线粒体的膜电势；采用吖啶橙（AO）染色法检测细胞凋亡情况；采用Real-timePCR方法检测胚胎线粒体单链DNA结合蛋白（mtSSBP）、OPAl的表达水平。结果显示，100μmol／LRes持续暴露96h可明显增加斑马鱼胚胎死亡率（P〈0．05）。20-100μLmol／LRes与20mg／LCdCl：联合暴露较单独CdCl：暴露组相比，胚胎死亡率和未孵化率明显增加（P〈0．01）。100μm01／LRes与20mg／LCdCl2联合处理明显增加了胚胎总体ROS（P〈0．01）和线粒体内ROS（P〈0．01）的生成，降低了线粒体的膜电势（P〈0．05），胚胎细胞凋亡细胞数量明显增加。与CdCI：单独暴露组相比，Res联合处理明显下调了mtSSBP和OPAl的mRNA表达水平（P〈O．01）。由此可知，高浓度Res明显增强CdCl2所致的斑马鱼发育毒性，胚胎总体ROS和线粒体源ROS水平升高，线粒体膜电势下降，mtSSBP和OPAl表达下降，表明线粒体损害可能介导了Res对CdCl2育毒性的增敏作用。
- 王占洋邱理红李雅娟刘璟逸许波李刚谢建新李忌王振华
- 关键词：白藜芦醇氯化镉氧化胁迫发育毒性斑马鱼
- 氯化锂对冈田酸所致SK-N-SH神经元突触萎缩的保护作用被引量：3
- 2016年
- 目的考察氯化锂(LiCl)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)诱导的SK-N-SH细胞分化神经元损伤的保护作用和tau蛋白Ser-^(262)位点磷酸化水平的影响。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导SK-N-SH细胞分化为成熟的神经元细胞;采用OA诱导成熟神经元细胞建立AD模型;采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法考察LiCl对成熟的神经元细胞增殖的抑制作用;Giemsa染色观察SK-N-SH细胞形态学变化;并采用Image-Proplus软件测定神经元细胞的突触长度;采用Western blot检测synaptophysin蛋白和tau蛋白Ser-^(262)位点磷酸化水平。结果 10μmol·L^(-1)ATRA连续处理7 d,可诱导SK-N-SH细胞突触生长和synaptophysin蛋白表达等典型分化神经元的特征。20~100 nmol·L^(-1)OA作用于分化神经元,可浓度和时间依赖性抑制细胞增殖,同时致分化神经元突触萎缩,tau蛋白Ser-^(262)位点磷酸化水平也明显升高。10 mmol·L^(-1)LiCl预处理可维持synaptophysin蛋白高表达,抑制tau蛋白Ser-^(262)位点磷酸化水平(P<0.01)。结论LiCl能够改善OA所致分化神经元的突触损伤,并伴随着synaptophysin表达的升高、tau蛋白Ser-^(262)位点异常磷酸化水平的降低。
- 袁玉婷佀营营王占洋弥相权吕欢欢许波李刚李忌何杰王振华
- 关键词：LICL冈田酸TAU蛋白磷酸化
- 氯化镉对斑马鱼胚胎的发育毒性被引量：18
- 2013年
- 为探讨重金属Cd对斑马鱼胚胎发育的毒性效应,将受精1h后(1hpf)的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的CdCl2溶液中,观察CdCl2处理对胚胎死亡、孵化及幼鱼畸形的影响。采用吖啶橙(AO)染色,定性观察胚胎细胞凋亡情况;以活性氧(ROS)荧光探针DCFH-DA染色法检测胚胎ROS水平,TBA比色法测定胚胎脂质过氧化水平,DTNB比色法测定还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平。结果表明,10.0～30.0mg·L-1CdCl2浓度依赖性地诱导斑马鱼胚胎死亡和幼鱼畸形,胚胎孵化率亦降低。CdCl2处理引起斑马鱼胚胎心脏水肿,尾部弯曲和胚胎发育阻滞。胚胎半数致死浓度(LC50)为18.9mg·L-1,R2=0.973,幼鱼半数致畸浓度(EC50)为13.7mg·L-1,R2=0.967。20.0mg·L-1CdCl2处理组ROS水平、MDA含量明显升高,GSH/GSSG比值明显降低(P<0.01)。20mg·L-1CdCl2处理后,胚胎头部和尾部可见大量细胞凋亡。10mg·L-1N-乙酰半胱氨酸(NAC)与20mg·L-1CdCl2共同处理组斑马鱼胚胎的死亡率和畸形率明显降低,孵化率明显升高,ROS水平、MDA含量以及GSH/GSSG比值趋于正常。以上结果说明,CdCl2暴露对斑马鱼胚胎发育的毒性效应可能与CdCl2诱导的氧化应激相关。
- 鲁疆王占洋袁玉婷许波高永林张波郑秋生王振华
- 关键词：发育毒理学斑马鱼
- 异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用被引量：4
- 2016年
- 目的:考察异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,探究其作用机制。方法:采用3T3-L1前脂肪细胞,利用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,采用传统的鸡尾酒法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞,利用油红O染色法检测分化细胞脂滴形成;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应方法,检测细胞CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT-enhancer-binding proteins,C/EBP)亚型C/EBPα、C/EBPβ、脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)、脂肪分化相关蛋白adipophilin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptorγ,PPARγ)、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)的mRNA表达水平,Western blotting法检测AMPK蛋白磷酸化水平。结果:异甘草素可浓度依赖性地抑制3T3-L1细胞增殖,并明显抑制分化细胞内脂滴形成,同时抑制了细胞分化相关基因C/EBPα、C/EBPβ、FAS、adipophilin、PPARγ mRNA的表达,AMPK m RNA的表达未受影响,但异甘草素处理明显上调了AMPK蛋白的磷酸化水平。结论:异甘草素可抑制3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化,其机制可能与活化AMPK信号通路相关。
- 邱理红王占洋李雅娟佀营营周慧韩欢许波李刚谢建新李忌王振华
- 关键词：异甘草素3T3-L1前脂肪细胞分化腺苷酸活化蛋白激酶
- 异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响被引量：11
- 2015年
- 目的研究异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法和克隆形成实验考察异甘草素对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用;Giemsa染色观察细胞形态学变化;半定量RT-PCR、Western blot鉴定细胞分化相关基因及蛋白表达水平。结果大鼠C6胶质瘤细胞经异甘草素诱导后,以浓度依赖性抑制细胞增殖(P<0.01);光镜观察到异甘草素诱导前的C6胶质瘤细胞呈两极长梭形或多角形,胞质多,胞突短;而诱导后细胞突起数目不同程度增多,细胞形态变细变长。诱导前克隆形成出现早,数量多,直径大,克隆形成率高;异甘草素处理组克隆形成率降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR、Western blot结果显示,异甘草素诱导后C6细胞GFAP mRNA和蛋白表达均明显上升(P<0.01)。结论异甘草素能抑制大鼠C6胶质瘤细胞的增殖,并能诱导C6细胞分化。
- 李雅娟甘露王占洋邱理红佀营营张红马成俊李忌孙喜灵王振华
- 关键词：异甘草素C6胶质瘤克隆形成星形胶质细胞GFAP
