王镇 作品数:3 被引量:2 H指数:1 供职机构: 中国海洋大学海洋生命学院 更多>> 发文基金: 青岛市科技发展计划项目 山东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
菲律宾蛤仔碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究 被引量:1 2012年 经Tris-HCl缓冲液浸提、硫酸铵分级沉淀盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析等步骤,从菲律宾蛤仔内脏团中分离得到碱性磷酸酶,SDS-PAGE显示为单一条带,提纯倍数为14.42,比活力达到131.08U/mg。酶学性质研究表明:该酶亚基分子量约44kD,最适反应温度为45℃,最适pH值为9.0,米氏常数Km为0.098mmol/L,最大反应速度Vmax为1.01μmol/(mL·min)。Ca2+、Mg2+对酶活力表现出显著的激活作用。 焉翠蔚 随建强 王镇 赵庆娅 黎玲屹关键词:菲律宾蛤仔 碱性磷酸酶 分离纯化 酶学性质 氟哌啶醇对斑马鱼胚胎的神经毒性作用 被引量:1 2013年 目的探讨用斑马鱼制备帕金森病(PD)动物模型的可能性。方法每组500枚1 hpf受精卵(培养1 h的受精卵)分别加入10 ml氟哌啶醇(Hal)0.27,0.54,1.08,2.16和4.32μmo.lL-1,于3,12,24,48,72,96和120 h显微镜下观察胚胎发育,统计胚胎的孵化率、畸变率和死亡率;免疫组织化学染色法观察96 hpf幼斑马鱼脑部多巴胺(DA)能神经元面积。孵育5 d后,分别将Hal 0.54和1.08μmo.lL-1组的一半幼鱼转移至左旋多巴20 mmo.lL-1中孵育2 d,记录5 min幼鱼游泳速度。结果与正常对照组相比,Hal 0.54,1.08,2.16和4.32μmol.L-1孵育120 h,斑马鱼胚胎的孵化率明显降低〔(81±4)%,(56±5)%,(31±4)%和(8±3)%vs(94±2)%〕(P<0.01),胚胎发育迟缓。孵育96 h时斑马鱼胚胎LC50为1.31μmo.lL-1。免疫组织化学染色结果显示,与正常对照组相比,Hal 0.54,1.08和2.16μmol.L-1组幼鱼DA能神经元面积分别从(10 460±734)μm2减少至7237±1054,5044±389和(3342±320)μm2(P<0.01);Hal 0.54,1.08和2.16μmol.L-1组7 dpf幼鱼游泳速度从(1.94±0.21)mm.s-1下降至0.96±0.17,0.64±0.16和(0.38±0.15)mm.s-1(P<0.01),并出现僵直和侧翻等PD症状,转移至左旋多巴20 mmol.L-1中2 d后,Hal 0.54和1.08μmol.L-1组游泳速度恢复至1.56±0.31和(1.23±0.29)mm.s-1(P<0.01)。结论 Hal使斑马鱼产生类似哺乳动物的PD行为表现,左旋多巴能够改善PD样行为表现,说明斑马鱼有可能用来制备PD实验模型。 王镇 刘云 姜国良 曹文芝 随建强 李品关键词:氟哌啶醇 斑马鱼 神经毒性 帕金森病 虫草素发酵、纯化及产业化研究新进展 2013年 近几年,通过国内外学者的共同努力,虫草素在其产量、分离纯化技术方面取得了较大进展。本文对高产虫草素的生产方法及分离纯化技术的最新研究进展进行系统概述,并总结虫草素产品开发现状,旨在为中国虫草素的快速产业化提供指导。 王镇 曹文芝关键词:虫草素 发酵 分离纯化